شناسایی ساختار ژنی سویه های بومی باکتری thuringiensis bacillus جداسازی شده از خاک های مناطق جنگلی استان مازندران
چکیده
سویههای بومی (bt) bacillus thuringiensis از خاکهای جنگلی مناطق مختلف استان مازندران جداسازی و ژن cry1عامل تولید پروتئین موثر روی حشرات،در آنها ردیابی شد. از 32 نمونه خاک مورد بررسی از طریق بازدارندگی انتخابی استاتسدیم، 144 سویهی باسیلوس جداسازی گردید. پس از کشت کلنیها، رنگآمیزی اختصاصی و شناسایی میکروسکوپی در 63/32% از سویهها پروتئینهای کریستالی مشاهده شد که برای بسیاری از حشرات سمی هستند. بررسی جدایههای bt نشان داد که در هفت جدایه، ژن cry1وجود دارد. آزمایش های تعیین ساختار ژنی برای وجود چهار ژن cry1a(شاملaa، ab، ac و ad) و ژن های cry1b، cry1c، cry1d، cry1e، cry1f، cry1g، cry1h، cry1i، cry1j و cry1k با استفاده از 14 جفت آغازگر اختصاصی انجام شد. ژنهای cry1ac و cry1i در تمامی سویهها مشاهده شد، ولی ژنهای cry1aa، cry1e و cry1g در هیچ یک از سویهها یافت نشدند. نتایج این پژوهش نشان داد که از این شیوه های مولکولی میتوان برای ردیابی سویههای بومی باکتری bt که دارای پروتئینهای موثر روی حشرات هستند، استفاده کرد.