شناسایی فوزاریومهای پوساننده ریشه گل مریم در منطقه دزفول و تعیین تنوع ژنتیکی گونه غالب توسط گروههای سازگار رویشی و نشانگر مولکولی rapd
چکیده
جهت شناسایی گونهها و جدایههای مختلف فوزاریوم عامل پوسیدگی ریشه گل مریم و بررسی تنوع ژنتیکی آنها در شهرستان دزفول نمونهبرداری از گیاهان آلوده مزارع مختلف این شهرستان انجام گرفت. قارچهای وابسته به ریشه با استفاده از روشهای معمول جداسازی در آزمایشگاه جداسازی گردیدند. جمعاً 143 جدایه از جنس فوزاریوم شامل 110 جدایه fusarium oxysporum، 27 جدایه f. solani و 6 جدایه f. equiseti شناسایی گردید. تنوع ژنتیکی جمعیت f.oxysporum با استفاده از گروههای سازگار رویشی و روش rapd مورد بررسی قرار گرفت. برای بررسی گروههای سازگار رویشی 45 جدایه به طور تصادفی انتخاب گردید. سپس جهش یافتگان نیت در محیطdox agar chlorate c`zapeck و محیط حداقل (mmc) هر کدام با 3% کلرات پتاسیم تولید شدند.کلاس فنوتیپی جهشیافتگان نیت نیز روی محیط کشت پایه حاوی یکی از چهار منبع ازت (نیترات، نیتریت، هیپوزانتین و تارتارات آمونیوم) تعیین گردید. ازکل جهشیافتگان نیت تعداد ٣٠١، ١۷١ و ۷۵ عدد به ترتیب به nit1، nit3 و nitm تعلق داشتند. آزمون مکمل سازی بین جهشیافتگان تمام جدایههای انتخابی انجام شد. درنهایت چهار گروه vcg مشخص گردید که vcg a شامل 28 جدایه، vcg b شامل 10جدایه، vcg c شامل سه جدایه و vcg d شامل چهار جدایه بود. همچنین تنوع ژنتیکی این جدایهها با استفاده از سیزده آغازگر تصادفی بررسی شد. تجزیه خوشهای دادههای rapd با استفاده از روشهای upgma، single و complete انجام گرفت. بهترین نتیجه با استفاده از روش upgma وضریب تشابه dice در سطح تشابه 61% بهدست آمد که بر این اساس شش گروه ژنتیکی مختلف تشخیص داده شد. گروه i شامل دو جدایه، گروه ii حاوی 12جدایه، گروه iii حاوی دو جدایه و گروه ivو v تک عضوی و گروه vi نیز شامل دو جدایه بود. آزمون بیماریزایی که با استفاده از جدایههای انتخابی از گروههای مختلف vcg انجام گرفت نشان داد که تمام جدایهها بیماریزا بودند. این مطالعه اولین گزارش از بررسی تنوع ژنتیکی f.oxysporum روی گل مریم در ایران میباشد.