روش تشخیص سریع تر عفونت لیشمانیا با استفاده از تکنیکpcr و flash pcr
چکیده
زمینه وهدف: لیشمانیوز یک بیماری انگلی تک یاخته ای است که به عنوان یک معضل بهداشتی در بسیاری از کشورها مطرح است.هدف از این مطالعه، تشخیص عفونت انگل در انسان به منظور شناسایی اپیدمیولوژیک و ارائه برنامه کنترل با استفاده از پرایمر اختصاصی مشترک طراحی شده در سه گونه لیشمانیا است. مواد و روش ها:30 نمونه ایزوله شایع انگل لیشمانیا از مراکز مختلف در ایران جمع آوری شد. dna این ایزوله ها پس از کشت در محیط rpmi1640 استخراج و ژن its2-rrna با استفاده از pcr تکثیر یافت. امپلیکون ها توسط الکتروفورز در ژل آگارز 2 درصد مورد بررسی قرار گرفتند. از روش flash pcr نیز، یک پروب اختصاصی و رنگ فلورسانس به منظور بررسی وجود یا عدم وجود امپلیکون به کار گرفته شد. یافته ها: نتایج حاصل از روش های pcr و flash pcrنشان می دهند این دو روش دارای دقت و حساسیت قابل قبولی برای شناسایی لیشمانیا هستند. نتیجه گیری: تعیین آلودگی انگل لیشمانیا با استفاده از جفت پرایمر اختصاصی موفقیت آمیز بود و روش taqman می تواند یکی از حساس ترین روش های تشخیصی برای شناسایی کیفی انگل در ناحیه ی its2 لیشمانیا باشد.