بهینه سازی شرایط باززایی و تراریختی گیاه کلزا، رقم های hyola ۳۰۸ و rgs۰۰۳
چکیده
هدف از این تحقیق، بررسی غلظت مناسب bap برای باززایی دو رقم مهم گیاه کلزا و همچنین مطالعۀ تأثیر زمان های پیش کشت، هم کشت و نیز غلظت های متفاوت استوسیرینگون (acetosyringon) بر تراریختی آنهاست. بدین منظور از دو رقم مهم کلزا hyola 308) و (rgs003 که در تولید بذرهای مورد نیاز کشور استفاده می شود برای انتقال ژن گزارشگر gus با واسطه آگروباکتریوم، استفاده شد. آزمایش ها در قالب طرح بلوک های کامل تصادفی با 5 تکرار برای هورمون بنزیل آمینو پورین (bap) و 3 تکرار برای زمان های پیش کشت و هم کشت و استوسیرینگون انجام شد. نتایج به دست آمده نشان داد که در غلظت 5/3 میلی گرم در لیتر bap، میزان باززایی رقم hyola 308 به 112 درصد و رقم rgs003 به 120 درصد افزایش یافت. تراریختی ارقام مورد استفاده که روی محیط کانامایسین رشد کرده بودند با استفاده از آزمون pcr و بیان ژن توسط سنجش فعالیت gus اثبات گردید. نتایج مقایسه میانگین اثرات متقابل سه گانه طول دوره پیش کشت، طول دوره هم کشت و غلظت های متفاوت استوسیرینگون بر میزان تراریختی ارقام مورد مطالعه نشان داد که بیشترین میزان تراریختی در رقم hyola 308 (33 درصد) در شرایط 100 میکرومولار غلظت استوسیرینگون، و 48 ساعت برای زمان های پیش کشت و هم کشت، و در رقم rgs003 (38 درصد) در 50 میکرومولار غلظت استوسیرینگون، زمان پیش کشت 48 ساعت و زمان هم کشتی 72 ساعت به دست آمد و هر دو نسبت به سایر تیمارها در گروه های آماری جداگانه قرار گرفتند. از شرایط بهینه به دست آمده برای انتقال ژن های هدف به این ارقام می توان استفاده نمود.