مقایسه snrna-u۶ و microrna-۱۶ برای تعیین ژن کنترل درون زاد مناسب برای بررسی بیان ژن های microrna تحت تیمار کورکومین دندروزومی در رده های سلولی سرطان کبد

mina zamani، dept of genetics, faculty of biological sciences, tarbiat modares university, tehran, iran majid sadeghizadeh، dept of genetics, faculty of biological sciences, tarbiat modares university, tehran, iran mehrdad behmanesh، dept of genetics, faculty of biological sciences, tarbiat modares university, tehran, iran

چکیده

هدف: micrornaها rnaهای کوچک تک رشته ای با طول 18-25 نوکلئوتید است که با مهار ترجمه و برش mrna در تنظیم بیان ژن شرکت دارد. بیان ناهنجار micrornaها از عوامل رخداد بیماری های مختلف است که این مسئله علاقه به بررسی نمایه بیان آن ها را افزوده است. rq-pcr تکنیکی کمّی و حساس در بررسی بیان ژن هاست. برای تصحیح تغییرات سیستماتیک از جمله میزان الگوی آغازین، کیفیت rna، کارآیی آنزیم ها داده های rq-pcr نسبت به یک ژن کنترل درون زاد که در مجموعه نمونه های آزمون به طور پایدار بیان می شود، استاندارد سازی می شود. برای جلوگیری از رخداد خطاهای بیشتر در زمینه کمّی سازی داده های بیان، ارزیابی ژن های کنترل درون زاد کاندید برای هر نمونه آزمایش ضروری است. در این مطالعه بیان ژن های microrna-16 و snrna-u6 در رده های سلولی سرطانی کبد تحت تیمار با کورکومین دندروزومی به منظور تعیین کنترل درون زاد مناسب برای مطالعات سنجش بیان micrornaها مرتبط با کورکومین دندروزومی ارزیابی شد. مواد و روش ها: رده های سلولی مورد نظر توسط کورکومین دندروزومی تیمار شدند. ورود کورکومین دندروزومی به رده های سلولی hepg2 و huh-7 با تصویربرداری توسط میکروسکوپ فلورسنت بررسی شد. rna از نمونه های مورد نظر استخراج و سنتزcdna با روش افزودن دم پلی a انجام شد. سپس توسط روش rq-pcr سنجش بیان صورت گرفت. نتایج: نتایج نشان داد u6 یا ترکیبی از u6 و mirna-16 برای huh-7 و mirna-16 برای hepg2 در این شرایط تیمار برای ژن کنترل درون زاد مناسب است. نتیجه گیری: در مجموع می توان از این ژن های کنترل درون زاد به دلیل عدم تغییر بیان معنی دار و پایداری بیان بین نمونه های آزمون، برای سنجش بیان micrornaها تحت تیمار با کورکومین دندروزومی در این رده های سلولی استفاده کرد.