انتخاب ژن رفرانس مناسب جهت نرمالیزه کردن داده های کمّی سنجش میکرو rnaها در نمونه پلاسمای افراد مبتلا به سرطان معده

پگاه پروایی، pegah parvaee department of biotechnology and molecular medicine, arak university of medical sciences, arak, iran.گروه زیست فن آوری و پزشکی مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی اراک، اراک، ایران. مهدیه موندنی زاده، mahdieh mondanizadeh department of biotechnology and molecular medicine, arak university of medical sciences, arak, iran.گروه زیست فن آوری و پزشکی مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی اراک، اراک، ایران.سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی اراک (arak university of medical sciences) بهزاد خوانساری نژاد، behzad khansarinejad department of microbiology and immunology, arak university of medical sciences, arak, iran.گروه میکروب شناسی و ایمنی شناسی، دانشگاه علوم پزشکی اراک، اراک، ایران.سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی اراک (arak university of medical sciences) امیر نادر امامی رضوی، amir nader emami razavi cancer institute, tehran university of medical sciences, tehran, iran.انستیتو سرطان، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران.سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی اراک (arak university of medical sciences)

چکیده

زمینه و هدف: میکرو rnaهای موجود در گردش خون بیومارکرهایی امیدبخش برای تشخیص و ارزیابی بیماران مبتلا به سرطان می باشد. آزمون واکنش زنجیره ای پلی مراز کمی زمان واقعی(rt-qpcr) روشی حساس برای برآورد میزان بیان میکرو rna ها است. با این وجود، در حال حاضر هیچ توافقی برای انتخاب ژن های رفرنس مناسب برای آنالیزهای qpcr بر روی میکرو rna در گردش خون وجود ندارد. از این رو، هدف از این مطالعه انتخاب ژن رفرنس مناسب جهت نرمالیزه کردن نتایج rt-qpcr در نمونه های پلاسمای بیماران مبتلا به سرطان معده بوده است. مواد و روش ها: بر اساس مطالعات پیشین سه مولکول snord47، u6 و mir-103 به عنوان ژن رفرنس منتخب مورد بررسی قرار گرفتند. بدین ترتیب بعد از استخراج از نمونه های پلاسمای 40 بیمار مبتلا به سرطان معده و 40 نفر سالم، سطوح بیان این مولکول ها به روش real-time pcr ارزیابی شد. یافته ها: نتایج نشان داد که تست های طراحی شده قادر به تشخیص حساس اهداف تعیین شده در یک دامنه خطی مناسب می باشند. بر اساس مقایسه دو گروه افراد بیمار و سالم، اگرچه میزان بیان مولکول mir-103 بین دو گروه یکسان نبود (017/0p=)، rnaهای snord47 و u6 دارای تغیرات سطوح بیانی مشابه بودند. با این وجود تغییرات در بیان مولکول snord47 کمتر از مولکول u6 بود. نتیجه گیری: نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد که مولکول snord47 دارای سطوح بیانی پایداری در نمونه پلاسمای افراد مبتلا به سرطان معده و افراد سالم است و می تواند به عنوان یک ژن رفرانس مناسب جهت نرمالیزه کردن داده های کمّی تست qpcr مورد استفاده قرار گیرد.