تخلیص آنزیم لیپاز از بخش قدامی رودۀ ماهی قزل آلای رنگین کمان (oncorhynchus mykiss)
چکیده
در سال های اخیر آبزیان به منزلۀ منبع استخراج آنزیمهایی مانند لیپاز مورد توجه قرار گرفتهاند. امعا و احشای ماهی قزلآلای رنگین کمان منبع بسیار مناسبی برای جداسازی آنزیم است. در این تحقیق، آنزیم لیپاز از بخش قدامی رودۀ ماهی قزلآلای رنگین کمان تخلیص شد. برای تخلیص، از استون برای چربیزدایی، از آمونیوم سولفات برای راسب سازی، از اولترافیلتراسیون برای تغلیظ نمونه و از ستون کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون برای جداسازی آنزیم موردنظر استفاده شد. میزان فعالیت آنزیم لیپاز تخلیص شده با استفاده از پارانیتروفنیل پالمیتات به منزلۀ سوبسترا و میزان پروتئین این آنزیم با استفاده از روش لوری، در مراحل مختلف تخلیص سنجش شد. در این تحقیق پارامترهایی مانند درصد بازده و میزان تخلیص نیز در هر مرحله بررسی شد. نتایج نشان داد در آخرین مرحلۀ تخلیص، میزان فعالیت و پروتئین آنزیم به ترتیب 171/6 واحد در میلی لیتر و 53/0 میلی گرم در میلی لیتر، درصد بازده تخلیص برابر با 53/7 و میزان تخلیص برابر با 49/5 بود. وزن مولکولی آنزیم تخلیص شده با استفاده از روش sds-page، 32 کیلو دالتون تعیین شد. بر اساس این تحقیق میتوان نتیجه گرفت که آنزیم لیپاز رودۀ ماهی قزلآلای رنگین کمان دارای کارایی مناسبی است و میتواند در آینده به منزلۀ مادۀ افزودنی در صنایع مرتبط و تحقیقات بیوتکنولوژی مورد توجه قرار گیرد.