مقاله

کلون سازی، تعیین توالی و بیان ژن آسپاراژیناز باکتری اروینیا کریزانتمی

راضیه افراسیابی، خسرو آقایی پور، فرشید کفیل زاده، صدیقه سادات صفویه

دانلود متن کاملرایگان، با حساب کاربری؛ ثبت نام با گوگل چند ثانیه است

چکیده

سابقه و هدف: آنزیم l - آسپاراژیناز داروی موثر در درمان لوکمی لنفوبلاستیک و لنفومای غیرهوچکینی است. مهم ترین باکتری های مولد این آنزیم باکتری های اشریشیا کلی و گونه های مختلف اروینیا به ویژه اروینیا کریزانتمی می باشند.هدف از این پژوهش، ارزیابی آنزیم l-آسپاراژیناز باکتری اروینیا کریزانتمی dsm 4610 بود. مواد و روش ها: در ابتدا dna ژنومی باکتری استخراج و پس از طراحی پرایمرهای اختصاصی echr asn f و echr asn r1 آزمون pcr انجام شد.در مرحله بعد، این ژن درون وکتورptz57r/t الحاق و به درون سلول میزبان اشریشا کلی dh5α وارد شد و پلاسمیدهای نوترکیب استخراج گردیدند. پس از تعیین توالی، نتایج توسط نرم افزارdnaman مورد بررسی قرار گرفت. با طراحی پرایمرهای بیانی، همسانه سازی در ناقل paed4 انجام شد و پس از تراریخت نمودن سلول های اشریشیا کلی bl21(de3) بیان پروتئین با روش sds-page ارزیابی شد. یافته ها: ژن جدا شده از سویه اروینیا کریزانتمی dsm4610 تفاوت های مشخصی با سایر ژن های مربوط به این آنزیم در بانک ژن داشت و با شماره دسترسی jf972567 در بانک ژن ثبت شد. بیشترین میزان بیان پروتئین پس از فرآیند بهینه سازی در شرایط. غلظت نیم میلی مولار iptg ، محیط کشت lb broth و دمای 37 درجه سانتی­گراد حاصل گردید. الکتروفورز پروتئین روی ژل sds-page ، پروتئینی به وزن مولکولی تقریبا 5/37 کیلودالتون را نشان داد . نتیجه گیری: نتایج این پژوهش نشان داد که آنزیم l-آسپاراژیناز باکتری اروینیا کریزانتمی، شرایط مناسب برای مطالعات بیشتر به عنوان یک آنزیم ضدلوکمی را دارد.

نویسندگان و وابستگی سازمانی
  1. راضیه افراسیابی — دانشگاه آزاد اسلامی، واحد جهرم، گروه میکروبیولوژی
  2. خسرو آقایی پور — بخش ژنومیکس و مهندسی ژنتیک، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی کرج
  3. فرشید کفیل زاده — دانشگاه آزاد اسلامی، واحد جهرم، گروه میکروبیولوژی
  4. صدیقه سادات صفویه — بخش ژنومیکس و مهندسی ژنتیک، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی کرج

اسناد مشابه

  • کلون سازی، تعیین توالی و بیان ژن آسپاراژیناز باکتری اروینیا کریزانتمی

    مقاله۲۰۱۰دنیای میکروب هاخسرو آقایی‌پور، راضیه افراسیابی، صدیقه سادات صفویه، فرشید کفیل‌زاده

    سابقه و هدف : آنزیم L - آسپاراژیناز داروی موثر در درمان لوکمی لنفوبلاستیک و لنفومای غیرهوچکینی است. مهم‌ترین باکتری‌های مولد این آنزیم باکتری‌های اشریشیا کلی و گونه‌های مختلف اروینیا به‌ویژه اروینیا کریزانتمی می‌باشند.هدف از این پژوهش، ارزیابی آنزیم L-آسپاراژیناز باکتری اروینیا ک

  • کلون سازی، تعیین توالی و بیان ژن آسپاراژیناز باکتری اروینیا کریزانتمی

    مقاله۲۰۱۰دنیای میکروب هاخسرو آقایی‌پور، راضیه افراسیابی، صدیقه سادات صفویه، فرشید کفیل‌زاده

    سابقه و هدف : آنزیم L - آسپاراژیناز داروی موثر در درمان لوکمی لنفوبلاستیک و لنفومای غیرهوچکینی است. مهم‌ترین باکتری‌های مولد این آنزیم باکتری‌های اشریشیا کلی و گونه‌های مختلف اروینیا به‌ویژه اروینیا کریزانتمی می‌باشند.هدف از این پژوهش، ارزیابی آنزیم L-آسپاراژیناز باکتری اروینیا ک

  • کلون سازی، تعیین ترادف و بیان ژن core ویروس هپاتیت c جدا شده از یک بیمار ایرانی مبتلا به هپاتیت مزمن

    مقالهپژوهش های آسیب شناسی زیستیnasrin rastgoo، m.sc. in medical biotechnology, tarbiat modares university, tehran, iran. ali karami، ph.d. in biotechnology, associate professor, bagyatallah university, tehran, iran. farzaneh sabahi، ph.d. in virology, associate professor, tarbiat modares university, tehran, iran

    مقدمه: ویروس هپاتیت c یکی از مهمترین عوامل ایجادکننده هپاتیت حاد ومزمن، سیروز و سرطان کبد در سطح جهان محسوب می شود. به دلیل روند رو به رشد ابتلا به hcv در سطح دنیا تحقیقات گسترد ه ای در نقاط مختلف جهان برای افزایش کیفیت روشهای تشخیصی و تعیین ژنوتیپ ویروس در حال انجام است. روشها:

  • همسان سازی، تعیین توالی و بیان بخش c ترمینال پروتئین شوک حرارتی 70 (hsp70 )مایکوباکتریوم آویوم تحت گونه پاراتوبرکلوزیس

    مقاله۲۰۱۱مجله تحقیقات دامپزشکی (journal of veterinary research)غلامرضا نیکبخت بروجنی، غلامرضا نیکبخت بروجنی، حسن تاجبخش، نادر مصوری

    پروتئین های شوک حرارتی (hsps) در نقش کمک ایمنی باعث افزایش توان پاسخ دستگاه ایمنی ذاتی و اختصاصی بدن نسبت به آنتی ژن های مختلـف بـه خصوص آنتی ژن های توموری و آنتی ژن های عوامل عفونی مختلف می شوند. بخش c ترمینال پروتئین شوک حرارتی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس در کنار آنتی ژن های پروتئ

  • کلون سازی و بیان سیتوپلاسمی l-آسپاراژیناز ii در باکتری اشریشیا کلی

    مقاله۲۰۱۰فصلنامه علمی پژوهشی دنیای میکروب هاحسین مهبودی، منصور عباچی، شهرام عراقی، هاله حامدی فر

    سابقه و هدف: ال-آسپاراژیناز (تیپ ii) با فعالیت ضدتوموری به طور طبیعی توسط باکتری اشریشیا کلی تولید می گردد. این آنزیم با تبدیل ال- آسپاراژین موجود در خون به آمونیوم و آسپارتیک اسید، در درمان لوکمیای لمفوبلاستیک حاد (all) مورد استفاده قرار می گیرد. هدف از این پژوهش، تولید سیتوپلاس

  • تعیین توالی ژن، کلونینگ و بیان آل- آسپاراژیناز نوترکیب از سودوموناس آیروجینوزا سویه sn۴ در اشریشیاکلی

    مقالهزیست شناسی میکروارگانیسم هاارسطو بدویی دلفارد، هیأت علمی زهرا کرمی، استادیار بیوشیمی، دانشگاه شهید باهنر کرمان، کرمان، ایران نرجس رمضانی پور، کارشناس ارشد میکروبیولوژی، دانشگاه شهید باهنر کرمان، کرمان، ایران

    مقدمه: ال- آسپاراژیناز جایگاه با ارزشی از جنبه کاربردهای پزشکی و صنایع غذایی دارد. تقاضا برای این آنزیم دارویی هرساله چندین برابر می‏شود. مواد و روش‏‏ها: در این پژوهش، یک آسپاراژیناز از سودوموناس ایروجینوزا سویه sn4، تعیین توالی و در اشریشیاکلی کلون شد. پرایمر‏ها بر اساس آل- آسپا