انتقال ژن expa1 به گیاه آرابیدوپسیس تالیانا از طریق غوطه وری گل آذین
چکیده
خشکی مهمترین تنش محیطی است که تاکنون به محصولات کشاورزی خسارت وارد کرده است. تاکنون تلاش¬های زیادی در جهت بهبود محصول در شرایط کمبود آب صورت گرفته است.اکسپنسین ها یک ابرخانواده پروتئینی هستند که در گیاهان آوندی از چهار خانواده تشکیل شده¬اند. اکسپنسین ها دسته¬ای از پروتئین¬های دیواره سلولی هستند که زمینه نرم شدن وابسته به اسیدیته دیواره سلولی از طریق شکستن پیوندهای هیدروژنی بین سلولز و شبکه گلیکان ها را فراهم می کنند. در این تحقیق برای بدست آوردن گیاهان تراریختی که دارای ریشه توسعه یافته تری باشند ابتدااز گیاهآرابیدوپسیس rna استخراج گردید و پس از ساخت cdna رشته اول و سپس تکثیر آن از طریق اغازگرهای اختصاصی برای ژن expa1در مرحله همسانه سازی، سازه ژنی pbiexpa1 ساخته شد. از این سازه که حاوی ژن nptii و ژن atexpa1 تحت کنترل راه انداز camv35s بود در مرحله انتقال ژن جهت تراریختی آرابیدوپسیس استفاده گردید. عمل تراریختی با استفاده از آگروباکتریوم و تکنیک غوطه وری گل آذین صورت گرفت که این تکنیک به مراحل وقت گیر کشت بافت نیاز ندارد و گیاهان بدست آمده از آن نسل t1می¬باشند. در نتیجه وارد شدن سازه ژنی به برخی از بذر¬ها، گیاهچه¬های حاصل از آنها بر روی محیط حاوی 50 میلی گرم در لیتر کانامایسین سبز باقی ماندند. تراریختی گیاهان بدست آمده با استفاده از واکنش زنجیره¬ای پلی¬مراز در سطح dna تائید گردید. طبق انتظار دو باند 753 و 1080 جفت بازی در گیاهان تراریخت مشاهده گردید