بهبود تولید prp هموفیلوس آنفلوانزا تیپ b با استفاده از محیط کشت cy اصلاح شده در مقیاس نیمه صنعتی
چکیده
زمینه و هدف : همـوفیلوس آنفلوانزا، نوعی باسیل گرم منفی است که سویه های مختلف آن در دو گروه کپسول دار و بدون کپسول طبقه بندی شده اند. هموفیلوس آنفلوانزا سروتیپ b ، یکی از عوامل شایع مننژیت نوزادان و کودکان زیر 5 سال در سراسر جهان می باشد که از کپسول پلی ساکاریدی آن موسوم به پلی ریبوزیل ریبیتول فسفات ( prp ) جهت تولید واکسنهای کونژوگه گلیکوپروتئینی علیه هموفیلوس آنفلوانزا تیپ b استفاده شده است. هدف از انجام این مطالعه، بهبود شرایط کشت هموفیلوس آنفلوانزا به منظور افزایش تولید prp در مقیاس نیمه صنعتی است. مواد و روش ها: سویه استاندارد هموفیلوس آنفلوانزا سروتیپ b ابتدا در فرمانتورهای 2 لیتری حاوی محیط cy (کازآمینواسید- عصاره مخمر) با غلظتهای عادی و یا اصلاح شده گلوکز، عصاره مخمر، hemin و nad (نیکوتینامید آدنین دی نوکلئوتید) کشت داده شد و سپس بذر تلقیحی بطور مجزا وارد فرمانتور 50 لیتری با غلظتهای عادی و یا اصلاح شده مواد فوق گردید. پس از هربار فرمانتاسیون، میزان توده سلولی و تولید prp مورد بررسی قرار گرفت. نتایج: با استفاده از محیط کشت cy (کازامینواسید- عصاره مخمر) اصلاح شده ( گلوکز : 6 ، عصاره مخمر : 5/2، hemin : 03/0 و 015/0 nad : گرم برلیتر) و فرمانتاسیون در فرمانتور 50 لیتری ، وزن خشک سلولی و غلظت prp بترتیب به حدود 2/5 و 1/1 گرم برلیتر رسید که در مقایسه با محیط کشت cy معمولی ، بطور معنی داری افزایش نشان میداد. نتیجه گیری : در مجموع ، استفاده از محیط کشت cy اصلاح شده ، در کنار کنترل ph و اکسیژن محلول ، موجب افزایش و بهبودتولید prp می گردد که بالطبع ، کاهش هزینه های تولید و در نتیجه ، کاهش قیمت تمام شده واکسنهای کونژوگه هموفیلوس آنفلوانزا تیپ b را به دنبال دارد.