ارزیابی اثر توالی‌های پپتید نشانه پلاستیدی LIM14 و AtCPrecA در هدایت پروتئین‌های گزارشگر فلورسنت سبز (GFP) و بتاگلوکورونیداز (GUS) در گیاهان سیب‌زمینی تراریخت

در این پژوهش، توالی‌های پپتید نشانه یک پروتئین اختصاصی بساک در گیاه Lilium longiflorum cv. Hinomoto به نام LIM14 و یک پروتئین در گیاه آرابیداپسیس با نام AtCPrecA که ویژگی‌های توالی‌های نشانه کلروپلاستی را دارا هستند، به طور جداگانه به پایانه آمینی ژن‌های گزارشگر پروتئین فلورسنت سبز (Green Fluorescent Protein=GFP) و بتاگلوکورونیداز (β-glucoronidase=GUS) متصل شده، سازه‌های حاصل به واسطه اگروباکتریوم به رقم کاردال گیاه سیب‌زمینی (Solanum tuberosum L. cv. Kardal) منتقل شدند. بررسی با میکروسکوپ فلورسنت و همچنین رنگ‌آمیزی هیستو شیمیایی GUS، نشان داد که پروتئین‌های نوترکیب LIM14-GUS و LIM14-GFP به آمیلوپلاست‌ غده و کلروپلاست سیب‌زمینی‌های تراریخت هدایت شده‌اند. سنجش کمّی فعالیت آنزیم GUS نشان داد که میزان بیان این پروتئین در بخش‌های غنی از آمیلوپلاست گیاهان تراریخت سیب‌زمینی، در حالت حضور توالی نشانه به مراتب بیشتر از گیاهان تراریخت واجد ژن gus به تنهایی است. در این مطالعه همچنین عملکرد پپتید نشانه AtCPRecA، در بالادست پایانه آمینی پروتئین فلورسنت سبز بررسی شد و بیان این پروتئین در سلول‌های اپیدرم پیاز (Allium cepa L.) نشان‌دهنده این بود که AtcpRecA-GFP به طور ویژه در پلاستیدها متمرکز شده‌اند. بر اساس نتایج حاصل از این بررسی، توالی‌های نشانه AtCPRecA و LIM14 وظیفه پیش‌بینی شده را انجام داده، قابلیت هدایت پروتئین نوترکیب را به درون پلاستید دارا هستند.