بیان ترشحی بخش کروی هماگلوتینین (HA1) ویروس آنفولانزای H5N1) A) در باسیلوس سوبتیلیس

نویسندگان

  • بحرینیان, مائده گروه ژنتیک مولکولی، مرکز تحقیقات علوم و فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران.
  • بهزادیان, فریدا گروه ژنتیک مولکولی، مرکز تحقیقات علوم و فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران.
  • بیدرام, مریم گروه ژنتیک مولکولی، مرکز تحقیقات علوم و فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران.
  • دلدار, علی اصغر گروه ژنتیک مولکولی، مرکز تحقیقات علوم و فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران.
  • علی اکبری, معین گروه ژنتیک مولکولی، مرکز تحقیقات علوم و فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران.
  • مهیاد, بهارک گروه نانوبیوتکنولوژی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
چکیده مقاله:

زمینه و اهداف: ویروس H5N1  ممکن است قابلیت انتقال بین انسان ها را بدست آورد. بنابراین امکان وقوع یک بیماری همه گیر وجود دارد. پروتئین HA1  نقش اصلی را در اتصال ویروس به سلول هدف بازی می کند و پاسخ های آنتی بادی خنثی کننده عمدتاً علیه این ناحیه است. باسیلوس سوبتیلیس میزبانی بدون اندوتوکسین جهت بیان وترشح پروتئین های هترولوگ واجد فعالیت ایمونولوژیک شناخته شده است. اگر چه این باکتری قادر به تولید پروتئین های گلیکوزیله نیست اما تحقیقات نشان داده است که گلیکوزیلاسیون HA برای ایمنی زایی آن چندان ضروری نمی باشد. در این مطالعه پروتئین نوترکیب HA1  در باسیلوس سوبتیلیس به صورت ترشحی تولید شد. مواد و روش کار: توالی HA1 در وکتور  (–)  pGEM® 5Zfکلون شد. سپس این توالی در شاتل وکتور PHT43 ساب کلون وجهت تکثیر به اشریشیاکلی منتقل گردید.پلاسمید نوترکیب استخراج شده از اشریشیاکلی به منظور ترانسفورم باسیلوس سوبتیلیس با روش الکتروپوریشن مورد استفاده قرار گرفت. پس از القای باسیلوس سوبتیلیس نوترکیب با IPTG، کل پروتئین­های سلول و پروتئین ترشح شده درون محیط کشت طی یک بازه زمانی، با استفاده از SDS-PAGE بررسی شد. یافته‌ها: صحت ساختار HA1-PHT43 با تعیین توالی و هضم آنزیمی تایید شد. نتایج SDS-PAGE  نشان داد که پروتئین نوترکیبHA1  با موفقیت بیان و درون محیط کشت ترشح شده است.                                                      نتیجه‌گیری:  باسیلوس سوبتیلیس میزبانی بدون اندوتوکسین است که می تواند به عنوان یک بستر پروکاریوتی مناسب جهت تولید پروتئین نوترکیب HA1  مورد استفاده قرار گیرد. پروتئین تولید شده در این پژوهش می تواند به عنوان کاندیدی برای واکسن مورد توجه قرار گیرد و لازم است توان ایمنی زایی آن در کنار مدل های حیوانی همراه با گروه های کنترل مناسب ارزیابی شود.                                                         

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

بیان ترشحی بخش کروی هماگلوتینین (ha۱) ویروس آنفولانزای h۵n۱) a) در باسیلوس سوبتیلیس

زمینه و اهداف: ویروس h5n1  ممکن است قابلیت انتقال بین انسان ها را بدست آورد. بنابراین امکان وقوع یک بیماری همه گیر وجود دارد. پروتئین ha1  نقش اصلی را در اتصال ویروس به سلول هدف بازی می کند و پاسخ های آنتی بادی خنثی کننده عمدتاً علیه این ناحیه است. باسیلوس سوبتیلیس میزبانی بدون اندوتوکسین جهت بیان وترشح پروتئین های هترولوگ واجد فعالیت ایمونولوژیک شناخته شده است. اگر چه این باکتری قادر به تولید پ...

متن کامل

کلون و بیان ترشحی آنزیم dfpase در باسیلوس سوبتیلیس

آفت¬کش¬های ارگانوفسفره برای کنترل آفت¬های کشاورزی استفاده می¬شوند و 38% کل آفت کش های موجود در جهان را شامل می شوند. این ترکیبات استیل کولین استراز را مهار می کنند که منجر به تجمع استیل کولین و در نهایت نقص در اندام و حتی مرگ می گردند. یکی از آنزیم¬هایی که دارای ویژگی سوبسترایی وسیع برای تجزیه ارگانوفسفات¬هاست آنزیم دی ایزوپروپیل فلوروفسفاتاز(dfpase ) می¬باشد که در مغز ماهی مرکب( loligo vulgari...

15 صفحه اول

بیان ترشحی آنزیم تجزیه کننده ترکیبات ارگانوفسفره با کاربرد نظامی و صنعتی در باکتری باسیلوس سوبتیلیس

مقدمه: ارگانوفسفات نام عمومی استرهای اسید فسفریک است که در زمینه های مختلف بخصوص حوزه نظامی کاربرد دارند. با توجه به اینکه تولید و استفاده از سلاح های شیمیایی در جنگ های نوین چشمگیر می باشد، لذا مطالعه و پژوهش در زمینه شناسایی، پیشگیری و درمان آلودگی با این ترکیبات امری ضروری است. این ترکیبات اثرات منفی زیادی بر سیستم بیولوژیک بدن موجودات زنده دارند. مطالعات نشان داده تجزیه بیولوژیک این ترکیبات...

متن کامل

تخلیص پروتیین نوترکیب هماگلوتینین (HA1) ویروس آنفلوانزا سویه (A(H1N1 و تولید آنتی‌بادی پلی‌کلونال علیه آن

Background: Each year, Human influenza A (H1N1) virus causes moderate to severe infections with a high prevalence throughout the world. Accordingly, the rapid, sensitive and cost-effective laboratory diagnosis based on viral antigen detection is important. Moreover, the generation of specific antibodies directed against Influenza antigens is essential to the success of both basic and applied re...

متن کامل

کلونینگ و بیان ترشحی ژن آنزیم لیپاز باسیلوس پومیلوسF3 بومی ایران در باکتری باسیلوس سوبتیلیس و مقایسه میزان بیان آن نسبت به فرم طبیعی آنزیم

سابقه و هدف : لیپازها بیوکاتالیست های ارزشمندی هستند که به علت کاتالیز نمودن واکنش های شیمیایی مانند آبکافت، کافت الکلی، کافت اسیدی و استرفیکاسیون در صنعت دارای کاربردهای فراوانی می باشند. لیپازهای میکروبی از مهمترین انواع این آنزیم ها هستند که به علت پایداری بالا در حلال های آلی، توانایی کاتالیز ملایم واکنش های هیدرولازی، سهولت در تولید و هزینه های نسبتا پایین آن یکی از مهمترین منابع تولید در ...

متن کامل

کلونینگ و بیان ژن آنزیم ضد قارچ نوترکیب کیتیناز باسیلوس پومیلوس در باسیلوس سوبتیلیس 168

  سابقه و هدف: کیتین، پلی ساکارید خطی و یکی از فراوان‌ترین پلی ساکاریدهای طبیعی است که جزء اصلی ساختار دیواره سلولی بسیاری از موجودات است. کیتینازها، آنزیم‌های اصلی کاتالیز‌کننده کیتین به اجزاء مونومری و الیگومری‌ آن هستند و می‌توانند به عنوان یک عامل ضد قارچ طبیعی استفاده شوند. هدف از این تحقیق کلونینگ و بیان ژن نوترکیب کیتیناز در باکتری باسیلوس سوبتیلیس در درمان عفونت‌های قارچی و جای‌گزینی آن...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


عنوان ژورنال

دوره 9  شماره 3

صفحات  48- 53

تاریخ انتشار 2015-10

با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.

کلمات کلیدی

کلمات کلیدی برای این مقاله ارائه نشده است

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023