زیرهمسانهسازی و بیان ژن ممزوجی ML1-stxB دارواش در E. Coli و تولید آنتی‌بادی آن در موش سوری
نویسندگان
چکیده مقاله:
زمینه و هدف: عصاره برگ‌های دارواش (Viscum album L) دارای پروتئین MLI از نوع RIP2 (پروتئین‌های غیرفعال ریبوزومی تیپ 2) با خواص لکتینی هستند. STxB شیگا توکسین به‌عنوان یک ایمونواجوانت و حامل، مطرح بوده و به گیرنده سطح سلولی خود به‌نام Gb3 متصل می‌گردد که روی اکثر سلول‌های بدن بیان می‌شود. در این مطالعه، بیان آنتی‌ژنML1-stxB در E. coli و تولید آنتی‌بادی آن در موش سوری بررسی گردید. روش بررسی: در این مطالعه تجربی، پلاسمید pUC57 حاوی ژن MLI با جایگاه‌های آنزیمی NdeI و SalI در وکتور بیانی pET28a(+)-stxB، زیرهمسانهسازی شد و به باکتری E. coli سویه BL21(DE3) تراریخت (ترانسفورم) گردید. بیان کاست ژنی MLI-StxB تحت القایIPTG انجام گرفت. پس از تخلیص، پروتئین نوترکیب MLI-STxB به‌وسیله ستون نیکل کروماتوگرافی در چهار نوبت متوالی به موش‌های سوری تزریق شد. یافته‌ها: در این مطالعه، ژن ML1-stxB کلون‌شده در وکتور بیانی pET28a(+)، با واکنش PCR و آنالیز آنزیمی تأیید گردید. همچنین پروتئین نوترکیب تولیدشده به‌وسیله SDS-PAGE و لکه‌گذاری وسترن مورد تأیید قرار گرفت، سپس آنتی‌بادی تولیدشده از سرم موش جداسازی و با روش تست ELISA بررسی گردید. نتیجه‌گیری: براساس نتایج این مطالعه، پروتئین ML1 دارای خاصیت غیرفعال‌کننده ریبوزومی و STxB نقش یاوری و حاملی دارد؛ لذا این پروتئین نوترکیب، کاندیدای واکسن علیه سم دارواش شیگلا دیسانتری بوده که از آنتی‌بادی آن می‌توان به‌عنوان شناساگر استفاده کرد.
منابع مشابه
بیان کاست ژنی blf1-stxB در باکتری E. coli و بررسی تیترآنتی بادی در موش
Background and Objectives: One of the ways to strengthen the effect of vaccines is using the adjuvant. STxB has a carrier and adjuvant role that we can fuse it with vaccine candidate antigens and produce efficient vaccines. BLF1 has a role in the pathogenesis and infection by Burkholderia pseudomallei, that can be studied when fused with stxB.The aim of this study expression blf1-stxB gene Cass...
متن کاملبیان پروتئین نوترکیب IpaD-STxB و بررسی ایمنی زایی آن در موش سوری
Background and purpose: The most common cause of diarrhea is Shigella and no vaccine has been found so far. IpaD and STxB proteins (B subunit of Shiga toxin) play an important role in invasion, infection and pathogenesis caused by Shigella. To evaluate the immunogenicity of each of the proteins IpaD and STxB can using of two animal models mice and guinea pigs and could be determined role of eac...
متن کاملDegenerate Four Wave Mixing in Photonic Crystal Fibers
In this study, Four Wave Mixing (FWM) characteristics in photonic crystal fibers are investigated. The effect of channel spacing, phase mismatching, and fiber length on FWM efficiency have been studied. The variation of idler frequency which obtained by this technique with pumping and signal wavelengths has been discussed. The effect of fiber dispersion has been taken into account; we obtain th...
متن کاملمقایسه تیتر آنتی بادی علیه پروتئین ها ی نوترکیب منفرد، مخلوط و ممزوج STxB، IpaD و STxB-IpaD
مقدمه: پروتئین IpaD نقش مهمی در تهاجم، بیماری زایی و ایجاد عفونت توسط باکتری های شیگلا و اشریشیاکلی دارد. یکی دیگر از فاکتورهای بیماریزای اصلی در شیگلا دیسانتری تیپ 1 و E.coli O157:H7 انتروتوکسین شیگلا یا (StxB) می باشد. با مخلوط یا ممزوج پروتئین IpaD با STxBمی توان منتخب احتمالی مناسب برای واکسن تهیه نمود. در این مطالعه ایمنی زایی و تیتر آنتی بادی ممزوجی، مخلوط و جداگانه پروتئین های نوتر...
متن کاملهمسانه سازی و بیان ژن مولد پپتید AcAMP از قارچ Aspergillus clavatus در باکتری E. coli و بررسی تیتر آنتی بادی آن در موش سوری
Background: Antimicrobial peptides have been considered as the key to change in the current antibiotics. AcAMP, Antimicrobial peptide is one of them, which has been purified from the Aspergillus clavatus ES1 fungus, and its biochemical properties and characterization indicate that this peptide has unique properties. The aim of this study was to express the gene of AcAMP peptide in Escherichia c...
متن کاملبیان کاست ژنی blf۱-stxb در باکتری e. coli و بررسی تیترآنتی بادی در موش
زمینه و هدف: یکی از راه های تقویت اثر واکسن ها استفاده از ادجوانت ها می باشد. stxb شیگلا دارای نقش ادجوانتی و حاملی بوده و می توان با ممزوج کردن آنتی ژن های کاندیدای واکسن با این ادجوانت به تولید واکسن مناسب پرداخت. blf1نقش مهمی در بیماری زایی و ایجاد عفونت توسط بورخولدریا سودومالئی دارد. هدف این مطالعه، بیان ژن blf1-stxb در باکتری e. coli و بررسی تیتر آنتی بادی آن در موش می باشد. روش...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
عنوان ژورنال
دوره 12 شماره 12
صفحات 42- 52
تاریخ انتشار 2019-02
با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.
کلمات کلیدی برای این مقاله ارائه نشده است
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023