ساخت وکتور بیانی pcDNA3.1-FSHβ به منظور انتقال ژن زیرواحد FSHβ به سلول لاین پستانداران
نویسندگان
چکیده مقاله:
سابقه و هدف: هورمون محرک فولیکولی (Follicle stimulating hormone, FSH)، یکی از هورمون‌های گلیکوپروتئینی هیپوفیز است که از دو زیرواحد آلفا و بتا تشکیل شده است. زیرواحد بتا حاوی 111 اسیدآمینه و یک سیگنال پپتید 18 اسیدآمینه‌ای و مسئول فعالیت بیولوژیکی هورمون می‌باشد. هدف از این مطالعه ساخت وکتور بیانی pcDNA3.1-FSHβ به منظور انتقال ژن زیرواحد FSHβ به سلول لاین پستانداران بود. مواد و روش‌ها: ابتدا یک جفت پرایمر برای ساب‌کلونینگ زنجیره β از T.vector طراحی گردید تا علاوه بر داشتن نواحی ابتدا و انتهای ژن زنجیره β دارای محل اثر آنزیم‌های HindΙΙΙ و EcoRΙ باشد. زنجیره بتای آمپلیفیه شده از ناحیه جای‌گاه دو آنزیم فوق در پلاسمید pcDNA3.1 کلون و پلاسمید نوترکیب به وسیله ترانسفورماسیون وارد سلول E.coli گردید. کلون‌های تشکیل‌شده به وسیله PCR مجدد بررسی و پلاسمید تعدادی از کلون‌های مثبت تخلیص گردید. صحت پلاسمیدهای خالص شده به دو روش هضم آنزیمی و تعیین توالی تأیید گردید. یافته‌ها: آنالیز آنزیمی و تعیین توالی نشان داد که پلاسمید pcDNA3.1-F390β دارای ساختار پلاسمیدی و توالی ژنی صحیح است و تطابق کامل با ژن بتای هورمون FSH گزارش شده در GenBank دارد. نتیجه‌گیری: این پلاسمید نوترکیب به لحاظ ساختاری صحیح و جهت انتقال ژن به سلول کشت پستانداران و ارزیابی بیان مناسب می‌باشد.
منابع مشابه
ساخت وکتور بیانی pcdna۳.۱-fshβ به منظور انتقال ژن زیر واحد fshβ به سلول لاین پستان داران
سابقه و هدف: هورمون محرک فولیکولی (follicle stimulating hormone, fsh)، یکی از هورمون های گلیکوپروتئینی هیپوفیز است که از دو زیر واحد آلفا و بتا تشکیل شده است. زیرواحد بتا حاوی 111 اسیدآمینه و یک سیگنال پپتید 18 اسیدآمینه ای و مسئول فعالیت بیولوژیکی هورمون می باشد. هدف از این مطالعه ساخت وکتور بیانی pcdna3.1-fshβ به منظور انتقال ژن زیر واحد fshβ به سلول لاین پستانداران بود. مواد و روش ها: ابتدا ...
متن کاملHuman FSHβ subunit gene is highly conserved
FSH is a pituitary gonadotropin that along with LH plays a key role in the regulation of gonadal function. The gonadotropic hormones are composed of two subunits, the common subunit and the hormone-specific subunit, which determines the binding to specific receptors and induction of biological response. Unlike the LH gene, shown in earlier studies to harbour several amino acid-altering polymorp...
متن کاملجداسازی و کلونینگ ژن فولیکول استیمولایتینگ هورمون انسانی hFSH با سیگنال سکانس طبیعی ژن در شاتل وکتورpPIC9 مخمر متیلوتروف Pichia pastoris
سابقه و هدف: فولیکول استیمولاتینگ هورمون (FSH) از خانواده هورمون‌های گلیکوپروتئینی هیپوفیز و متشکل از دو زیرواحد آلفا و بتا می‌باشد که فعالیت بیولوژیک این هورمون مربوط به زیرواحد بتای آن است. این مطالعه به منظورجداسازی ناحیه کدکننده ژن انسانی FSHβ با سیگنال سکانس طبیعی ژن و کلونینگ آن در شاتل وکتورpPIC9 تحت پروموتر AOX1 و سیگنال سکانس آلفا فاکتور انجام شد. مواد و روش‌ها: طی دو مرحله امپلیفیکا...
متن کاملIdentification of Smad Response Elements in the Promoter of Goldfish FSHβ Gene and Evidence for Their Mediation of Activin and GnRH Stimulation of FSHβ Expression
As an essential hormone regulating gonads in vertebrates, the biosynthesis and secretion of follicle-stimulating hormone (FSH) is controlled by a variety of endocrine and paracrine factors in both mammalian and non-mammalian vertebrates. Activin was initially discovered in the ovary for its specific stimulation of FSH secretion by the pituitary cells. Our earlier studies in fish have shown that...
متن کاملهمسانه سازی و ساخت وکتور بیانی ژن گلوتامات دکربوکسیلاز باکتری لاکتوباسیلوس پلانتاروم
سابقه و هدف: گاما آمینو بوتیریک اسید (گابا) یک اسیدآمینه چهار کربنه غیر پروتئینی است که در درمان فشارخون، دیابت، التهاب و افسردگی می تواند بکار رود. گابا توسط آنزیم گلوتامیک اسید دکربوکسیلاز در بسیاری از موجودات شامل باکتری‌ها سنتز می شود. از اینرو همسانه سازی این آنزیم جهت بهینه‌سازی تولید گابا اهمیت دارد. هدف از این پژوهش همسانه سازی و ساخت وکتور بیانی حاوی ژن گلوتامات دکربوکسیلاز از باکتری ...
متن کاملهمسانهسازی ژن زیرواحد بتا هورمون گونادوتروپین جفت انسانی در پی انتقال ژن به اسپرم خروس
هدف از این مطالعه، همسانه‌سازی‌زیرواحد بتای هورمون گونادوتروپین جفت انسانی در ناقل مناسب بود که بتواند از طریق اسپرم در تولید طیور تراریخت به کار گرفته شود. به این منظور زیرواحد بتای این هورمون به کمک یک جفت آغازگر اختصاصی تکثیر و درناقل T همسانه‌سازی شد. فرآیند ترانسفورماسیون پلاسمید نوترکیب در سلول‌های مستعد اشریشیاکلی انجام گرفت و کلونی‌های دارای پلاسمید نوترکیب به‌وسیله PCR انتخاب شدند. صح...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
عنوان ژورنال
دوره 14 شماره 4
صفحات 382- 388
تاریخ انتشار 2013-06
با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.
کلمات کلیدی برای این مقاله ارائه نشده است
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023