مدل‌سازی ایمونوانفورماتیکی، ساخت پلاسمیدهای حامل اپی‌توپ‌های CTL ویروس هپاتیت C و بررسی اولیه ایمنی‌زایی آنها

نویسندگان

  • روحوند, فرزین فرزین روحوند، انستیتو پاستور ایران، بخش هپاتیت و ایدز، بانک ژن نوترکیب
  • معمارنژادیان, آرش
  • آرش کیا, آرش بخش هپاتیت و ایدز، بانک ژن نوترکیب، انستیتو پاستور ایران
  • ابراهیمی, ملانیا
  • علیزاده, شهاده
  • متولی, فاطمه
چکیده مقاله:

زمینه و اهداف: تاثیرات سرکوب کنندگی برخی از کلیدی ترین پروتئین‌های ویروس هپاتیت c بر سیستم ایمنی و جهش سریع ویروس، توجه را به واحدهای ایمونوژن کوچک و پایدار جلب نمود. لذا، واکسن های مولتی اپی توپ به منظور تمرکز پاسخ ایمنی بر این واحدها معرفی شدند. ولی، به دلیل پاسخ ایمنی نسبتاً ضعیف علیه این واکسن ها، افزایش ایمنی زایی نیازمند تمهیدات بیشتری است. این مطالعه با هدف ساخت پلاسمیدهای حامل اپی‌توپ‌های CTL ویروس هپاتیت C به‌روش مدل سازی ایمونوانفورماتیک و تعیین اولیه ایمنی زایی آنها انجام شد. روش بررسی: یک اپی توپ H-2Dd و دو اپی‌توپ HLA-A*0201 از نواحی E2، E1 و core در HCV انتخاب شد و با ابزارهای ایمونوانفورماتیک برای بهترین ترادف آنالیز شد. توالی مولتی اپی توپ به روش SOEing-PCR ساخته شد و در ناقل pcDNA3.1+ کلون گردید. توالی های ارتقاء دهنده PADRE، سیگنال رتیکولوم آندوپلاسمیک (ER signal sequence: ERss) و HBsAg به انتهای '5 توالی مولتی اپی توپ متصل شد و بیان پلاسمیدها به صورت in-vitro به روش های RT-PCR، دات-بلات، وسترن-بلات و ایمونوفلورسانس بررسی شد. ارزیابی اولیه ایمنی‌زایی به صورت in-vivo با آزمایش ازدیاد حساسیت تاخیری (Delayed type hypersensitivity: DTH) انجام شد. نتایج با آزمون‌های Non parametric Mann-Whitney و ANOVA ارزیابی شدند. یافته ها: نتایج آزمایش‌های in-vitro، بیان پلاسمیدها را تائید کرد و ارزیابی‌های اولیه in-vivo، پردازش و عرضه اپی‌توپ H-2Dd را در موش BALB/c نشان داد. همچنین در حالیکه اثرات ارتقاء پاسخ برای ERss و PADRE نشان داده شدند، اتصال HBsAg تاثیری در افزایش پاسخ نداشت.نتیجه گیری: این مطالعه ارزش پیش بینی های ایمونوانفورماتیک و آزمایش DTH را، برای آنالیز اولیه واکسن-های داوطلب مولتی اپی‌توپی در موش‌های BALB/c، نشان داد. نتایج، تائید کافی برای بررسی بیشتر سازه های طراحی شده را در موش ترانس ژنیک (تراریخته) HLA-A2 فراهم می کند.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

مدل سازی ایمونوانفورماتیکی، ساخت پلاسمیدهای حامل اپی توپ های ctl ویروس هپاتیت c و بررسی اولیه ایمنی زایی آنها

زمینه و اهداف: تاثیرات سرکوب کنندگی برخی از کلیدی ترین پروتئین های ویروس هپاتیت c بر سیستم ایمنی و جهش سریع ویروس، توجه را به واحدهای ایمونوژن کوچک و پایدار جلب نمود. لذا، واکسن های مولتی اپی توپ به منظور تمرکز پاسخ ایمنی بر این واحدها معرفی شدند. ولی، به دلیل پاسخ ایمنی نسبتاً ضعیف علیه این واکسن ها، افزایش ایمنی زایی نیازمند تمهیدات بیشتری است. این مطالعه با هدف ساخت پلاسمیدهای حامل اپی توپ ها...

متن کامل

بررسی ژنوتیپ ویروس هپاتیت C در بیماران همودیالیزی مبتلا به هپاتیت C در استان گیلان

زمینه: بیماران همودیالیزی در ریسک بالاتر ابتلا به عفونت هپاتیت (HCV) C می باشند. عفونت HCV یکی از عوامل افزایش دهنده موربیدیتی و مورتالیتی در بیماران همودیالیزی است. ژنوتیپ های مختلف HCV پاسخ های متفاوتی به درمان می دهند. هدف این مطالعه بررسی شیوع ژنوتیپ های HCV در بیماران همودیالیزی در استان گیلان می باشد.روش کار: تمامی بیماران مراجعه کننده به 11 مرکز همودیالیز استان طی سال 87 با روش نمونه گیر...

متن کامل

فراوانی آنتی بادی ویروس هپاتیت A در مبتلایان هپاتیت B و C در ایران

Background: Superinfection of hepatitis A in chronic hepatitis B and C may worsen the course of disease. This study attempted to study frequency of hepatitis A virus antibodies in patients with hepatitis B and hepatitis C. Materials and methods: 115 hepatitis C and 56 hepatitis B patients who visited the Hepatitis Association of Hamedan province during 2004-2005 were enrolled. Hepatitis A viru...

متن کامل

الگوهای جدید درمانی برای عفونت ویروس هپاتیت C

Hepatitis C virus (HCV) infection has affected approximately 180 million people across the world. In most cases, HCV-infection remains chronic, which expose patients at high risk of cirrhosis and hepatocellular carcinoma. The rates of disease incidence and mortality diminish as a result of successful treatment of HCV infection. Until the recent years, despite the associated toxicities and l...

متن کامل

مروری بر روش های تشخیص آزمایشگاهی ویروس هپاتیت C

ویروس هپاتیت سی (HCV)باعث ایجاد بیماری های هپاتیت حاد،سیروز کبدی و هپاتوسلولار کارسینوما می شود.در این مقاله به طور خلاصه به بیماری زایی و بررسی روش های تشخیصی بر پایه تست های سرولوژیکی و تکنیک های مولکولی برای تشخیص و مدیریت عفونت ویروس هپاتیت سی بررسی می شود. پس از خواندن این مقاله باید بتوانید تست های آزمایشگاهی که برای تشخیص و مدیریت ویروس هپاتیت سی استفاده می شود را توصیف کنید و در ت...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


عنوان ژورنال

دوره 4  شماره 4

صفحات  30- 40

تاریخ انتشار 2011-03

با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.

کلمات کلیدی

کلمات کلیدی برای این مقاله ارائه نشده است

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023