همسانه‌سازی، بیان و تخلیص انتهای کربوکسیل زیرواحد C آنزیم اوره‌آز هلیکوباکتر پیلوری به منظور تولیدIgY در زرده تخم مرغ

نویسندگان

  • رسولی, ایرج دانشگاه شاهد
  • موسوی گرگری, سیدلطیف دانشگاه شاهد
  • نژادستاری, طاهر دانشگاه آزاداسلامی واحد علوم وتحقیقات
  • پریور, کاظم دانشگاه آزاداسلامی واحد علوم و تحقیقات
چکیده مقاله:

سابقه و هدف: هلیکوباکتر پیلوری (H.pylori) نوعی باکتری گرم منفی اسپیرال و میکروآیروفیل است که در لایه مخاطی معده انسان تکثیر و ایجاد عفونت می نماید. رویکردهای جدید در جهت بکارگیری درمان های اختصاصی نظیر ایمنوتراپی برای ریشه کنی این عفونت میباشند. آنزیم اوره آز یکی از مهمترین عوامل بیماری زا و آنتی ژنیک این باکتری است. روش بررسی: دراین مطالعه تجربی، ابتدا بخش انتهای کربوکسیل زیر واحد C اوره آز، پس از تخلیص ژنوم باکتری، با کمک واکنش زنجیره پلیمراز (PCR) تکثیر شده و محصول روی ناقل بیانی pET28a کلون شد. پروتئین نوترکیب پس از تراریخت سازه نوترکیب به باکتری E.coli سوش Bl21DE3 بیان شد و نتایج با استفاده از SDS-PAGE تحلیل و پروتئین نوترکیب از طریق کروماتوگرافی میل ترکیبی با کمک ستون Ni-NTA تخلیص شد. پروتئین نوترکیب تخلیص شده، به مرغ لگهورن سفید تزریق و IgY با روش استون/کلروفرم تخلیص و با روش ELISA و SDS-PAGE مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته ها: با تعیین توالی سازه نوترکیب، صحت انجام همسانه سازی تأیید شد. بررسی با SDS-PAGE نشان داد پروتئین نوترکیب rUreCc به خوبی بیان و تخلیص شده است. همچنین نتایج الایزا ایمن‌زایی بالای این پروتئین نوترکیب را نشان داد. نتیجه‌گیری: تولید پروتئین نوترکیب rUreCc هلیکوباکتر پیلوری در E.coli به عنوان سلول میزبان، امکان دسترسی آسان به آنتی-ژن را فراهم کرد. علیرغم کوچک بودن آنتی‌ژن نوترکیب، توانایی ایمنی زایی آن شبیه به کل زیر واحد C اوره آز است

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

همسانه سازی، بیان و تخلیص انتهای کربوکسیل زیرواحد c آنزیم اوره آز هلیکوباکتر پیلوری به منظور تولیدigy در زرده تخم مرغ

سابقه و هدف: هلیکوباکتر پیلوری (h.pylori) نوعی باکتری گرم منفی اسپیرال و میکروآیروفیل است که در لایه مخاطی معده انسان تکثیر و ایجاد عفونت می نماید. رویکردهای جدید در جهت بکارگیری درمان های اختصاصی نظیر ایمنوتراپی برای ریشه کنی این عفونت میباشند. آنزیم اوره آز یکی از مهمترین عوامل بیماری زا و آنتی ژنیک این باکتری است. روش بررسی: دراین مطالعه تجربی، ابتدا بخش انتهای کربوکسیل زیر واحد c اوره آز، پ...

متن کامل

اثر تزریق زرده تخم مرغ بومی خزک به زرده تخم مرغ سویه راس بر عملکرد، ایمنی و بیان ژن TLR4

به منظور ارزیابی اثرات مادری بر تکوین سیستم ایمنی نتاج، اثر تزریق زرده تخم­مرغ­های بومی خزک به زرده تخم­مرغ­های سویه تجاری راس بر عملکرد، ایمنی و بیان ژن TLR4 در مرغ­های سویه تجاری راس تعیین شد. بدین منظور تعداد 150 عدد تخم­مرغ سویه راس به طور تصادفی به دو گروه آزمایشی 75 تایی که شامل گروه I (گروه شاهد - تزریق زرده سویه راس) و گروه II (تزریق زرده نژاد خزک) تقسیم و برای مدت سه هفته در در دستگاه ...

متن کامل

تولید igy در زرده تخم مرغ بر علیه اوره آز هلیکوباکتر پیلوری از قطعه نوترکیب urec

هدف: هلیکوباکتر پیلوری یک باکتری گرم منفی مارپیچی شکل و میکروآئروفیل است که در لایه مخاطی معده انسان تکثیر یافته و ایجاد عفونت می نماید. عفونت ایجاد شده توسط این باکتری که با تخریب بافت پوششی معده همراه است، منجر به التهاب مزمن معده می شود که می تواند سبب ایجاد زخم های معده و دوازدهه شود. رویکردهای اخیر در راستای به کارگیری درمان های اختصاصی برای مقابله با این عفونت است که در این میان آنزیم اور...

متن کامل

ارزیابی محیط کشت کلمبیا آگار غنی شده با تخم مرغ به منظور جداسازی هلیکوباکتر پیلوری از نمونه های بیوپسی

زمینه و هدف: هلیکوباکتر پیلوری اولین باکتری سرطان زای شناخته شده و عامل بیماری های گاسترودئودنال متعددی است. هدف از این پژوهش ارزیابی محیط کشت غنی شده با تخم مرغ به منظور جداسازی هلیکوباکتر پیلوری از نمونه های بیوپسی گرفته شده از بیماران مبتلا به بیماری های گاسترودئودنال و مقایسه آن با تست اوره آز سریع بوده است. روش بررسی: این مطالعه مقطعی (توصیفی- تحلیلی) بر روی 192 بیمار مراجعه کننده به بخش آ...

متن کامل

تهیه و تخلیص آنتی بادی علیه استرپتوکک موتان از زرده تخم مرغ

سابقه و هدف: استرپتوکک موتان سروتیپ c عامل باکتریایی اصلی در پوسیدگی دندانهای انسان است. هدف از تحقیق تولید و خالص سازی آنتی بادی علیه استرپتوکک موتان سروتیپ c از زرده تخم مرغ بود. مواد و روشها: در این تحقیق آزمایشگاهی استرپتوکک موتان M T 8148 (سروتیپc ) بعنوان آنتی ژن استفاده شد. مرغها با باکتری- کشته شده با فرمالین- از طریق داخل عضلانی ایمونیزه و تخم مرغها روزانه جمع آوری شدند. ایمونوگلوبین Y...

متن کامل

بیان و تخلیص پروتئین نوترکیب انتهای کربوکسیل نوروتوکسین بوتولینوم A در باکتری اشریشیاکلی به عنوان کاندیدای تولید واکسن بوتولیسم

چکیده زمینه و هدف: بوتولیسم بیماری کشنده‌ای است که توسط نوروتوکسین یکی از هفت نوع کلستریدیوم بوتولینوم ایجاد می‌شود. بخش کربوکسیل زنجیره سنگین نوروتوکسین کلستریدیوم بوتولینوم تیپ A(BoNT/A-Hc)، از قابلیت بالایی در تحریک سیستم ایمنی برخوردار است که امروزه برای تولید واکسن نوترکیب علیه بوتولیسم به کار می‌رود. هدف از این پژوهش بیان و تخلیص فرم محلول این بخش از نوروتوکسین در باکتری اشریشیاکلی نوترک...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


عنوان ژورنال

دوره 22  شماره 1

صفحات  23- 31

تاریخ انتشار 2012-04

با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.

کلمات کلیدی

کلمات کلیدی برای این مقاله ارائه نشده است

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023