بررسی اثر جهش زایی هدفمند اسیدآمینه های موجود در سطح مشترک آکاربز-آلفا-آمیلاز حاصل از گونه ی باسیلوس kr-8104 در اتصال آکاربز و مهار آنزیم

به منظور بررسی مهار آنزیم آلفا آمیلاز مزوفیل bacillus kr-8104 توسط آکاربز دو اسید آمینه ی سرین 105 و تایروزین 175 موجود در نزدیکی جایگاه فعال به اسید امینه های معادل در آلفاآمیلاز bacillus subtilis که مقاوم به آکاربز می باشد تغییر یافتند. در موتان tyr175phe حذف پیوند هیدروژنی تایروزین با gln205 که در کنار ریشه ی کاتالیتیک glu208 قرار دارد منجر به کاهش میزان مهار شده است.در موتان ser105phe حذف پیوند هیدروژنی گروه جانبی که احتمالا با نیتروژن گر.ه آکاروِیوزین در آکاربز می باشد، باعث کاهش مهار شده است.km ،kcat و آنتروپی کمپلکس فعال شده ی آنزیم سوبسترا در هر دو موتان نسبت به آنزیم وحشی کاهش یافته است. کاهش آنتروپی احتمالا با محدود کردن انواع کانفورماسیونهای کمپلکس فعال آنزیم سوبسترا و سفت کردن ساختار ناحیه ای آنزیم منجر به افزایش تمایل آنزیم به سوبسترا شده است که توسط برهمکنشهای هیدروفوب دو اسیدآمینه ی جدید فنیل آلانین به وجود آمده است . آین دو جهش تغییری در پروفایل ph آنزیم ایجاد نکرده اند که دلیلی بر عدم تغییر pka اسیدآمینه های کاتالیتیک در اپر موتاسیون می باشد.