اثر تیمارهای هورمونی در کشت لایه نازک سلولی (tcl) یونجه (medicago sativa) رقم کریساری

این تحقیق جهت بررسی پاسخ های ریخت زایی لایه نازک سلولیtcl) ) تهیه شده از هیپوکوتیل یک رقم یونجه (کاریساری) به غلظتهای متفاوت 2,4-d و kin انجام گرفت. بذور استریل روی محیط کشت sh کشت شدند. پس از یک هفته قطعات هیپوکوتیل بدست آمده زیر لوپ به ضخامت 0/5 -0/1 میلیمتر برش داده شدند و به محیط کشتsh حاوی ترکیبات مختلف 2,4-d و kin (با غلظت های صفر، 0/5 ، 1/0 ، 1/5 و 2/0 میلی گرم در لیتر) منتقل گردیدند. کال های حاصل پس از انتقال به محیط کشت القاء جنین (2,4-d بالا، kin پائین) بمدت یک هفته، سپس به محیط کشت boi2y منتقل شدند. در نهایت کال ها حاوی جنین به محیط کشت ms½ حاوی 0/5 میلی گرم در لیترga3 فیلترشده برای رشد بهتر جنین ها منتقل گردیدند. با توجه به اینکه در تمامی تیمارها، کالزایی 100 درصد بود بنابراین کالزایی از tcl هیپوکوتیل از غلظتهای مختلف 2,4-dوkin متاثر نشد. از طرف دیگر، اثر غلظتهای مختلف 2,4-d ، kin و اثر متقابل بین آنها بر قطر کال معنی داری نبود (p>0/05) و رشد کالها مستقل از ترکیب هورمونی بخوبی انجام شد. همچنین تعداد جنین در هر کال از نوع هورمون و غلظتهای آن متاثر نشد ( p>0/05). بر اساس نتایج بدست آمده تفاوت معنی داری بین غلظتهای مختلف 2,4-d و kin از نظر در صد جنین زایی وجود داشت ( p<0/01) بطوریکه حداکثر درصد جنین زایی سوماتیکی در 1/5 میلی گرم در لیتر 2,4-d مشاهده شد. با افزایش مقدار kin از درصد جنین زایی سوماتیکی کاسته شد و بنابراین حداکثر درصد جنین زایی سوماتیکی در غلظت صفر kin مشاهده شد. اثر متقابل این دو هورمون بر درصد جنین زایی معنی دار نبود و نشان داد که هر کدام از این هورمونها بطور مستقل درصد جنین زایی سوماتیکی را تحت تاثیر قرار می دهند. اختلاف معنی داری بین غلظتهای مختلف 2,4-d و kin از نظرتعداد جنین سوماتیکی تولیدی در هر تیمار وجود داشت ( p<0/01) بطوریکه تعداد جنین سوماتیکی در تمامی تیمارهای حاوی 2,4-d بطور معنی دار بیشتر از محیط کشت فاقد این هورمون بود. همچنین در غلظت صفر kin حداکثر تعداد جنین سوماتیکی مشاهده شد و با بکار گیری تیمارهای kin از تعداد جنین ها بطور معنی دار کاسته شد ( p<0/01). با توجه به نتایج حاصل به نظر می رسد که نیازهای هورمونی برای کالزایی از ریز نمونه های tcl هیپوکوتیل یونجه متفاوت از جنین زایی سوماتیکی می باشد همچنین برای القاء جنین زایی سوماتیکی از tcl نیازی به kin وجود نداشت و حداکثر جنین زایی سوماتیکی در غلظت 1/5 میلی گرم در لیتر 2,4-d حاصل شد.