شناسایی ایزوله های محیطی تولیدکننده ی بیوسورفکتانت،خالص سازی و بررسی اثرات ضدمیکروبی بیوسورفکتانت هایِ حاصل

چکیده در حال حاضر اغلب تحقیقات روی بیوسورفکتانت ها برای کاربردهای صنعتی و محیطی صورت گرفته و علیرغم پتانسیل بالا و منشأ زیستی شان، مطالعات کمتری بر روی کاربردهای آنها در زمینه های زیست پزشکی انجام می شود. استفاده از کاربردهای بالقوه بیوسورفکتانت ها در زمینه پزشکی تنها در طی دهه اخیر گسترش یافته است . هدف از این تحقیق شناسایی بهترین سویه های بومی تولید کننده بیوسورفکتانت و پیدا کردن روش مناسب برای خالص سازی آن به منظور طراحی سیستمهای محافظت کننده ی ضد میکروبی طبیعی برای فرمولاسیونهای بهداشتی است. تولید بیوسورفکتانت 14سویه جدا شده از خاک آلوده به نفت در اهواز، به لحاظ کمی و کیفی مورد بررسی قرار گرفتند. از بین آنها بهترین سویه تولید کننده به لحاظ تولید بیوسورفکتانت، برای بررسی های بعدی انتخاب گردید. شناسایی سویه مورد نظر با استفاده از توالی یابی ژن 16s rrna و آزمون های بیوشیمیایی نشان داد که سویه مورد بررسی bacillus amyloliquefaciens می باشد. بیوسورفکتانت حاصل با روش کروماتوگرافی کاغذی و معرفهای مناسب، به لحاظ نوع ماده مورد بررسی قرار گرفت و از جنس لیپوپپتید شناخته شد. خالص سازی اولیه شامل لیوفیلیزه کردن بافر زیستی حاوی رسوب حاصل از اسیدی کردن محیط عاری از سلول صورت گرفت. پس از آن ویژگی های بیوسورفکتانت به لحاظ وزن ماده با استفاده از تکنیک tricine page، تست حلالیت در حلال های آلی و خارج سلولی بودن، مورد سنجش قرار گرفت بر این اساس وزن مولکولی بیوسورفکتانت کمتر ازkda 10 تخمین زده شد و نشان داده شد که بیوسورفکتانت مورد بررسی قادر به کاهش کشش سطحی آب ازmn/m 72 بهmn/m 31 بود. خالص سازی نهایی با روش ستون کروماتوگرافی و به کمک حلال های آلی انجام شد. در نهایت، طیف اثرگذاری بیوسورفکتانت خام و خالص شده روی پاتوژن های مخـتلف با روش میکرودایلوشن صورت گرفت و نتایج با هم مقایسه گردید که نتایج حاصله بیانگر همانطور که از نتایج بررسی اثرات ضد میکروبی بیوسورفکتانت خام و خالص استنباط می شود، این ترکیب روی کوکسی های گرم مثبت بیش از باسیل های گرم منفی اثر داشته و همچنین اثر ضد قارچی بسیار چشمگیری از خود نشان داده است.