کاربرد الکترود خمیر کربن برهنه و اصلاح شده با نانوذرات طلا به عنوان زیست حسگر الکتروشیمیائی برای بررسی دورگه شدن dna با استفاده از متیل گرین به عنوان نشانگر الکتروفعال

در این تحقیق از ماده رنگی سبز متیل به عنوان نشانگر الکتروفعال شیمیائی جهت تشخیص پدیده دورگه شدن dna استفاده شد. الکترود کار خمیر کربن در مخلوطی از بافر استاتm 5/0 با 8/4 ph = و m nacl 0/1 ، با اعمال پتانسیلv 8/1 نسبت به (hg2cl2/hg) sce، به مدت 5 دقیقه فعال سازی شد و سپس نوکلئیک اسید تک رشته (کاوشگر) بر روی آن تثبیت شد و بدین ترتیب زیست حسگر الکتروشیمیایی dna تهیه گردید. پس از آن نشانگر الکتروفعال بر روی الکترود انباشته شد و در نهایت علامت تجزیه ای سبز متیل با روش الکتروشیمیائی ولتامتری موج مربعی آشکارسازی شد. پارامتر های آزمایشی نظیر نوع الکترولیت حامل در مرحله پیش تغلیظ و مرحله گرفتن علامت ولتامتری موج مربعی، غلظت الکترولیت حامل در پیش تغلیظ نشانگر و غیره بهینه شدند. پس از فعال سازی الکترود و تثبیت کاوشکر بر روی الکترود، نوکلئیک اسید با توالی هدف مکمل بر سطح الکترود تثبیت شد و سپس نشانگر الکتروفعال سبز متیل بر روی الکترود انباشته و علامت تجزیه ای آن با روش ولتامتری موج مربعی آشکارسازی شد و در نهایت علامت نشانگر قبل و بعد از دورگه شدن dna بر الکترود خمیر کربن مقایسه شد. در مرحله بعد برای مطالعه انتخاب پذیری زیست حسگر الکتروشیمیایی تهیه شده به dna هدف، تعدادی از توالی هایdna غیر مکمل به کار گرفته شد. پس از فعال سازی الکترود و تثبیت کاوشکر بر روی آن، نوکلئیک اسید با توالی هدف مکمل و توالی های غیر مکمل بر سطح الکترود انباشته و علامت تجزیه ای سبز متیل با روش الکتروشیمیائی آشکارسازی شد و در نهایت علامت نشانگر قبل و بعد از دورگه شدن dna با توالی هدف مکمل و توالی های غیر مکمل در الکترود بررسی شد و دریافته شد که به واسطه دورگه شدن ضعیف dna با توالی های غیر مکمل، علامت نشانگر پس از دورگه شدن کاهش چشم گیری نشان نداد، در حالیکه این کاهش بعد از دورگه شدن قوی dna با توالی هدف مکمل، قابل ملاحظه بود. بنابر این زیست حسگر الکترو شیمیایی تهیه شده، انتخاب پذیری خوبی به dna هدف نسبت به توالی های dna غیر مکمل نشان داد.در قسمت بعدی این کار، الکترود خمیر کربن اصلاح شده با نانو ذرات طلا تهیه و برای مطالعه پدیده دورگه سازی dna به کار رفت. در این مطالعه، ولتامتری پالس تفاضلی به عنوان یک روش ساده و سریع الکتروشیمیائی به کار گرفته شد. حد تشخیص کاوشگر تثبیت شده بر سطح الکترود خمیر کربن اصلاح نشده و خمیر کربن اصلاح شده با نانو ذرات طلا به ترتیب 135/0 وnm 051/0 محاسبه شد.