تشخیص مولکولی و ژنوتایپینگ ایزوله های بالینی اسینتوباکتربامانی بیان کننده ژن های کرباپنمازی

چکیده: اسینتوباکتر بامانی عامل مهم عفونت های بیمارستانی است. مشکل پیش روی درمان در این باکتری، گزارشات روز افزون از مقاومت به طیف وسیعی از آنتی بیوتیک ها، از جمله کرباپنم ها است. آنزیم های کرباپنمازی اگزاسیلینازها ((oxa-type، متالوبتالاکتامازها(mbls) و نوعی بتالاکتاماز وسیع الطیف (ges)، از عوامل اصلی مقاومت به کرباپنم ها هستند. هدف این مطالعه تشخیص مولکولی اسنیتوباکتر بامانی و ژن های مقاومت به کرباپنم ها و تیپ بندی ژنتیکی ایزوله های اسنیتوباکتر بامانی مقاوم به کرباپنم ها به روش mlva می باشد. ایزوله های بالینی با روش های بیوشیمیایی تا حد جنس و با روش pcr، گونه اسینتوباکتر بامانی شناسایی شد. الگوی حساسیت میکروبی وmic برای ایمی پنم و مروپنم به روش دیسک دیفیوژن و آگار دایلوشن انجام شد. ژن های مقاومت به کرباپنم ها ges, oxa-type, vim, imp و اینتگرون ها را با پرایمرهای اختصاصی به روش pcr بررسی و با استفاده از پرایمرهای ترکیبی عناصر الحاقی بالادست ژن های اگزاسیلیناز شناسایی گردید. تیپ بندی ژنومی ایزوله های مقاوم به کرباپنم باروش multiple-locus vntr analysis typing انجام شد. از 131 اسینتوباکتر، 123 ایزوله (9/93%) دارا ی ژن oxa-51 bla بودند که به عنوان اسینتوباکتر بامانی شناسایی شدند. درصد مقاومت این ایزوله ها به آنتی بیوتیک های ایمی پنم و مروپنم به ترتیب 5/54% و 7/83% بود. mic50 در نمونه های مقاوم به ایمی پنم برابر با 64 میکروگرم در میلی لیتر و در نمونه ها ی مقاوم به مروپنم برابر با 32 میکروگرم در میلی لیتر بود. 8/87% ایزوله ها دارای ژن ,bla oxa-238/13% حاوی ژن bla oxa-24 و6/1% حامل ژن bla oxa-58 بودند. 3/29% سویه ها حاوی عنصر الحاقی یک دربالادست ژن blaoxa-51، 2/96% حامل isaba-1در بالادست blaox-a23 بودند. 9/30% دارای ژن blavim و 6 نمونه دارای ژن blaimp، یک نمونه حامل ژن blages بود. 9/34% سویه به طور همزمان حامل اینتگرون کلاس 1و 2 و 3/59% سویه ها فقط حامل اینتگرون کلاس 1 بودند. شاخص تنوع (diversity index) روش mlva برای ایزوله های مقاوم به کرباپنم 96/0بود، که قدرت تفکیک discriminatory power)) بالای این روش را نشان می دهد. هفت کمپلکس کلونال و 25 سینگلتون مشاهده شد که 6/38% نمونه ها در کمپلکس کلونال 1 قرار داشتند. نتایج این تحقیق نشان می دهد که ایزوله های مقاوم به کرباپنم اسینتوباکتر بامانی در دو بیمارستان مورد بررسی دارای الگوی ژنوتیپی تقریبا یکسان بودند و bla oxa-23شیوع بالایی داشت. استفاده فزاینده از کرباپنم ها در درمان، احتمالا فشار انتخابی برای ایزوله های مقاوم است.