جداسازی، بیان فراوان و بررسی خصوصیات فیزیولوژیک پروتئین شبه تئوماتین از گیاه یونجه یکساله

پروتیین های مرتبط با بیماری زایی در اثر تنش های محیطی مانند تنش شوری و خشکی و زخم شدن مکانیکی آلودگی میکروبی و کاربرد تعدادی از همورمون های گیاهی و الیسیتورها تولید می شوند. براساس توالی آمینواسیدی و فعالیت بیوشیمیایی این پروتیین ها تاکنونن به 17 گروه (rr-1 تا rr-17) طبقه بندی شده اند. هدف تحقیق حاضر نیز شناسایی بیان فراوان و بررسی فعالیت فیزیولوژیک پروتیین شبه تیوماتین (گروه 5 پروتیین های مرتبط با بیماری زایی) در گیاه یونجه یکساله می باشد. پروتیین های مرتبط با بیماری زایی گروه 5 با دارا بودن تشابه بالا در سطح آمینواسیدی با پروتیین شیرین مزه تیوماتین در بسیاری گیاهان در اثر حمله بیمارگرهای گیاهی تولید می شوند. با این وجود شناسایی کامل اعضای این گروه در گیاه یونجه یکساله تاکنون تنها برای دو ژن و تنها در سطح mrna صورت گرفته است. با این وجود به دلیل توالی یابی در حال تکمیل ژنوم یونجه یکساله و در دسترس بودن بخش قابل توجهی از ژنوم آن شناسایی اعضای جدید خانواده پروتیین های شبه تیوماتین در این گیاه امکان پذیر گردید. در این تحقیق سه چارچوب خواندن در کنار دو cdna مربوط به پروتیین های شبه تیوماتین در گیاه یونجه یکساله ردیابی گردیدند. بالاترین شباهت بین توالی مذکور و توالی پروتیین های pr-5 که پیش از این مطالعه شده اند عبارت است از: 87% شباهت بین tlp-1 و aad02499، 63% بین tlp-2 و aad02499، 78% بین tlp-3 و np-173261، 68% بین tlp-4 و l76632 و 56% بین tlp-5 و a1010501 (نخود) قطعات مورد نظر با استفاده از آغازگرهای اختصاصی از گیاه یونجه یکساله جداسازی و سپس در ناقل بیانی pet-21c(+) وارد شدند. بررسی منابع علمی نشان داد که تا پیش از این تحقیق مطالعه مشابهی بر روی پروتیین های شبه تیوماتین یونجه یکساله انجام نشده است.