کلونینگ و بیان ژن ناحیه 3abc سروتایپ o ویروس بیماری تب برفکی ایران و استفاده از آن در راستای تولید کیت تشخیصی الایزا.
پایان نامه
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده کشاورزی
- نویسنده امیررضا پریزاده
- استاد راهنما سعید زیبایی محمدرضا نصیری مجتبی طهمورث پور محمدرضا باسامی
- سال انتشار 1393
چکیده
بیماری تب برفکی اولین بیماری ویروسی شناخته شده در حیوانات است که با گذشت بیش از صد سال از شناخت آن، همچنان یکی از مهمترین خطراتی است که صنعت دامپروری دنیا را تهدید می نماید. یکی از مهمترین روش های شناسایی حیوان واکسینه شده از حیوان مبتلا به تب برفکی استفاده از پروتئین غیرساختاری 3abcبه عنوان آنتی ژن در کیت الایزا می باشد. از اینرو، ژن 3abc ویروس تب برفکی سروتایپ o با استفاده از واکنش زنجیره پلیمراز و پرایمرهای اختصاصی حاوی سایت های برشی bamhi و hindiii جداسازی شد. به منظور بررسی خصوصیات نوکلوتیدی، ژن تکثیر شده به ناقل ptz57r/t انتقال و حضور ژن هدف در ناقل کلونینگ ptz57r/t با استفاده از روش¬های کلونی pcr، هضم آنزیمی و توالی یابی تایید شد. به منظور تولید آنتی ژن نوترکیب، ژن هدف به وکتور بیانی pet21a (+) وارد و سپس به باکتری اشرشیاکلی bl21(de3) به عنوان میزبان بیان منتقل شد. باکتری حاوی وکتور نوترکیب با استفاده از iptg در غلظت نهایی5/1 میلی مولار القا شد. تولید پروتئین نوترکیب با استفاده از الکتروفورز پروتئین و وسترن بلاتینگ تایید شد. وزن مولکولی پروتئین تولید شده در حدود 50 کیلودالتون مشخص شد. نتایج آزمون الایزا نشان داد که آنتی ژن نوترکیب تولید شده به خوبی با آنتی بادی اختصاصی اتصال پیدا می کند و این آنتی ژن، پتانسیل مناسبی جهت استفاده در کیت تشخیصی الایزا برای شناسایی حیوانات اهلی آلوده از حیوانات واکسینه شده دارد.
منابع مشابه
کلونینگ ناحیه کد کننده پروتئین غیرساختاری 3ab ویروس بیماری تب برفکی سروتایپ oایران
بیماری تب برفکی یکی از بیماری های ویروسی و به شدت مسری در بین حیوانات اهلی بخصوص زوج سمان می باشد که هر ساله خسارات اقتصادی فراوانی به صنعت دامپروری کشور وارد می کند. این بیماری در کشور ایران از طریق واکسیناسیون و قرنطینه حیوانات بیمار کنترل می شود. به منظور کنترل مناسب و موثر شیوع بیماری تب برفکی، تست های تشخیصی مختلفی که قادر به شناسایی حیوانات آلوده از واکسینه شده هستند، توسعه یافته اند. در ...
15 صفحه اولکلونینگ و توالی یابی ژن 3b تحت تیپ نوپدید سروتایپ a ویروس بیماری تب برفکی جدا شده از ایران
چکیده ندارد.
15 صفحه اولشناسایی دگرگونی ژنتیکی در ویروس تب برفکی تیپ A با استفاده از تعیین ردیف نوکلئوتیدی قسمتی از ژن VP1 ویروس
,1s1ya:.J'$n :7tb !9y.tu;1 9; q 5t'1& p I r lt 4!lr 9 61,; .l.iy c.!! ob lr+ : tt 4jr.'j .Al JLrob.;qrolr,J'fll t q ..rlaLr. 4 RT-PCR ri,Sle 1r o.ri 6bi!l Jt-t5 RIA :.pe, .pe1 *q&,.5b.'.;9; VPr Oijl ,r,iiqo-f .ddisl-t,r-a.ttJ nlceloltl Jlhr""gbyp,glrrsc*l . d,ri$ multiplexRT-PCR cycle sequencing cie) jlosu:pl t r PCR Jr-e .ri . 'r-JJl9; a{.Jt Fluorescent dye deoxy-terminator ar.bgy.5bai...
متن کاملطراحی کیت الیزای تشخیصی فرم حاد بیماری تب کیو انسان
زمینه و اهداف: باکتری کوکسیلا بورنتی عامل ایجاد بیماری تب کیو است که یک بیماری با گسترش جهانی می باشد. این بیماری یک مشکل سلامت عمومی در بسیاری از کشورها بخصوص در سال های اخیر است. تشخیص تب کیو بر اساس روش های سرولوژی می باشد. از میان روش های تشخیصی سرولوژیکی تب کیو، تکنیک الیزا نسبت به سایر تست های سرولوژی ارجحیت دارد، زیرا یک روش قابل اعتماد با حساسیت و ویژگی بالا است. هدف از تحقیق حاضر طراحی...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده کشاورزی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023