تب برفکی یک بیماری ویروسی می باشد، عامل آن ویروس fmdv است که یکی از کوچک ترین ویروس های حیوانی است که به خانواده پیکورناویریده و جنس آفتوویروس تعلق دارد. اپیدمیولوژی تب برفکی پیچیده بوده و به وسیله فاکتورهای مختلف ویروسی، میزبان و محیط تحت تاثیر قرارمی گیرد. عوامل متعددی نظیر تعداد تیپ ها و سروتیپ های مختلف ویروس، قدرت زیاد موتاسیون، تغییرات سریع آنتی ژنیک، پنهان ماندن علائم ژنتیکی در اثر ابتلا به بعضی از تیپ های خاص، قدرت انتقال بین گونه ای، هزینه های بسیار زیاد کنترل، شکل گیری حاملین و مقررات سخت بین المللی برای کشورهای دارای این بیماری از دلایل پر اهمیت بودن آن می باشد. در این مطالعه تعداد94 نمونه شامل 57 نمونه لوزه و37نمونه کام نرم از گوسفندان به ظاهر سالم کشتارگاه صنعتی مشهد اخذ و پس از حمل در مجاورت یخ به آزمایشگاه طی مراحل مختلف با استفاده از کیت مخصوص استخراج rna و به روش qpcr مورد بررسی قرار گرفت. نتایج حاصل نشان داد از میان این 94 نمونه که فاقد علائم بالینی بودند تعداد 15 نمونه لوزه و 10 نمونه کام نرم و در مجموع 25 نمونه از لحاظ حضور ویروس مثبت و تعداد42 نمونه لوزه و 27 نمونه کام نرم و در مجموع 67 نمونه منفی بودند. نتایج نشان داد که حضور 6/26 درصدی ویروس در گوسفندان محدوده استان خراسان که جهت کشتار به کشتارگاه ارجاع داده می شوند، می تواند مورد توجه دامپزشکان و تصمیم گیرندگان مدیریت و کنترل پیشگیری بیماری تب برفکی قرار گیرد.

تب برفکی یک بیماری ویروسی می باشد، عامل آن ویروس fmdv است که یکی از کوچک ترین ویروس های حیوانی است که به خانواده پیکورناویریده و جنس آفتوویروس تعلق دارد. اپیدمیولوژی تب برفکی پیچیده بوده و به وسیله فاکتورهای مختلف ویروسی، میزبان و محیط تحت تاثیر قرارمی گیرد. عوامل متعددی نظیر تعداد تیپ ها و سروتیپ های مختلف ویروس، قدرت زیاد موتاسیون، تغییرات سریع آنتی ژنیک، پنهان ماندن علائم ژنتیکی در اثر ابتلا به بعضی از تیپ های خاص، قدرت انتقال بین گونه ای، هزینه های بسیار زیاد کنترل، شکل گیری حاملین و مقررات سخت بین المللی برای کشورهای دارای این بیماری از دلایل پر اهمیت بودن آن می باشد. در این مطالعه تعداد 106 نمونه شامل 7 نمونه لوزه و 99 نمونه کام نرم از گاوها به ظاهر سالم کشتارگاه صنعتی مشهد اخذ و پس از حمل در مجاورت یخ به آزمایشگاه طی مراحل مختلف با استفاده از کیت مخصوص استخراج rna و به روش qpcr مورد بررسی قرار گرفت. نتایج حاصل نشان داد از میان این 106 نمونه که فاقد علائم بالینی بودند تعداد 5 نمونه لوزه و 41 نمونه کام نرم و در مجموع 46 نمونه از لحاظ ویروس مثبت و در مقابل تعداد 2 نمونه لوزه ،58 نمونه کام نرم و در مجموع 60 نمونه منفی بودند. نتایج نشان داد که حضور 43 درصدی ویروس را در گاو های محدوده استان خراسان رضوی که جهت کشتار به کشتارگاه ارجاع داده می شوند، می تواند مورد توجه دامپزشکان و تصمیم گیرندگان مدیریت و کنترل پیشگیری بیماری تب برفکی قرار گیرد.

هدف اصلی این تحقیق بهینه سازی روش real time pcr نسبی مبتنی بر سایبرگرین جهت اندازه گیری نسبی بیان دو ژن tnf? و il-10 در خوکچه های هندی واکسینه شده با واکسن تب برفکی تیپ o بود. برای این کار نمونه ی خون از دو گروه خوکچه هندی واکسینه شده و شاهد در سه زمان متفاوت و مشخص گرفته شد. پس از انجام خونگیری ، استخراج rna و تبدیل آن به cdna صورت گرفت. برای اندازه گیری میزان بیان، ژن های tnf? و il-10 از واکنش real-time pcr به صورت نسبی استفاده شد. داده های خام به صورت ct از دستگاه مربوطه گرفته و با استفاده از فرمول لیواک داده ها آنالیز شدند. ?ctهای به دست آمده با استفاده از نرم افزار jmp و آزمون student t-test مورد تجزیه و تحلیل آماری قرار گرفتند.اختلاف معنی داری (p < .05) برای بیان ژن های tnf? و il-10 بین گروه تیمار و شاهد مشاهده نگردید. البته افزایش بیان در خونگیری سوم برای این دو ژن مشاهده شد.

بیماری تب برفکی یکی از مسری ترین بیماریهای دامی و بزرگترین تهدید در تجارت دام محسوب می شود. در حال حاضر این بیماری بومی کشور ماست و برنامه مبارزه با این بیماری از طریق واکسیناسیون انبوه به منظور کنترل آن از 6 سال قبل انجام شده است لذا به منظور ارزیابی و بررسی این برنامه کنترلی مطالعه حاضر که به صورت غیر مستقیم بازگو کننده وضعیت ویروس در گردش در جمعیت دامی است انجام گردید. در این مطالعه که در کشتارگاه صنعتی مشهد انجام شد نمونه کام نرم پشتی به صورت تصادفی از 255 راس گاو های کشتار شده این کشتارگاه اخذ گردید وجهت تشخیص گاو های حامل ویروس تب برفکی با روش rt-pcr آزمایش شدند. نتایج نشان داد که 96 مورد از نمونه ها (6/37 درصد) با روش مزبور مثبت بوده و حامل ویروس تب برفکی قلمداد شدند. نمونه های مثبت جهت تعیین تیپ های a ، asia 1 ، o آزمایش شدند که 58 مورد (4/60 درصد) از آنها از نظر سروتیپ o مثبت بودند. برای سایر سروتیپ های asia 1 و a با استفاده از آغازگرهای اختصاصی آنها نتیجه ای نداشت. از 96 نمونه مثبت با روش rt-pcr 52 نمونه به صورت تصادفی انتخاب و مورد کشت سلولی قرار گرفتند که فقط در 5 مورد آنها ویروس جدا گردید. نتایج توالی باز های نوکلئوتید و درخت فیلوژنیک نمونه های مثبت با روش rt-pcr در این مطالعه شباهت بسیار زیاد این ویروس ها با نمونه های جدا شده از پاکستان را نشان داد. با توجه به اینکه بیش از 80 درصد ازجمعیت دامی کشور هر 4 ماه علیه بیماری تب برفکی واکسینه می شدند نرخ بالای فراوانی حاملین ویروس تب برفکی(6/37درصد ) نشاندهنده در معرض ویروس قرار داشتن گسترده دامها است . لذا این مطالعه نشان می دهد واکسیناسیون به تنهایی قادر به کنترل این بیماری نیست ولازم است سایر اقدامات کنترلی به ویژه رعایت شرایط امنیت زیستی و کنترل جابجایی دام سر لوحه فعالیت های دستگاههای اجرایی قرار گیرد. از آنجائیکه تفاوت قیمت گوشت انگیزه ای قوی برای ورود دام به صورت قانونی و یا غیر قانونی از مرزهای شرقی ایجاد می کند توصیه می شود برنامه های کنترلی بر پایه واکسیناسیون و کنترل جایجایی دام همراه با مانیتورینگ منظم برنامه های کنترلی به صورت فرا منطقه ای انجام شود.از طرفی پایش و دیده بانی آزمایشگاهی به منظور باز خور برنامه های کنترلی به صورت دوره ای در گاو و گوسفند ضروری به نظر می رسد.

هدف اصلی این تحقیق بهینه سازی روش real-time pcr نسبی مبتنی بر سایبرگرین جهت اندازه گیری بیان ژن های ifn-? و tgf?1 در خوکچه های هندی واکسینه شده با واکسن تب برفکی تیپ o بود. برای این مطالعه، نمونه های خون از دو گروه خوکچه هندی واکسینه شده و شاهد در سه زمان متفاوت و مشخص گرفته شد. پس از انجام خونگیری، استخراج rna و تبدیل آن به cdna صورت گرفت. به منظور اندازه-گیری میزان بیان ژن‏های ifn-? و tgf?1از روش real-time pcr به صورت نسبی استفاده شد. سپس داده های خام به صورت ct از دستگاه گرفته و برای تعیین بیان ژن ها از فرمول لیواک استفاده شد. بررسی آماری داده ‏ها توسط برنامه excel و آزمون t استیودنت در سطح 5% (p<0.05) انجام شد. نتایج نشان داد بیان ژن های ifn-? و tgf?1 در خونگیری های دوم و سوم نسبت به خونگیری اول، به طور معنی داری (p<0.05) افزایش یافت.

این مطالعه با هدف همسانه سازی و بیان پروتئین های ساختاری p1 و غیر ساختاری 3c ویروس تب برفکی سروتیپ o جدا شده از استان خراسان رضوی در مخمر پیشیا پاستوریس و ارزیابی پاسخ ایمنی آن ها در خوکچه هندی، انجام گرفت. ژن های پروتئین های ساختاری p1 و غیر ساختاری 3c این ویروس تکثیر و تعیین توالی شدند و توالی های به دست آمده با توالی سایر سویه های سروتیپ o و سویه های سروتیپ های این ویروس از نظر فیلوژنتیکی مقایسه شدند. نتایج آنالیز تعیین توالی و فیلوژنتیکی نشان دادند که ژن p1 بیشترین شباهت نوکلئوتیدی و اسید آمنیه ی را با سویه سروتیپ o پاکستان pak/39/2008 به ترتیب (%93 /94) و (37/98%) داشت. ژن 3c بیشترین میزان شباهت توالی نوکلئوتیدی و اسید آمینه ی را با دو سویه سروتیپ a هندوستان aind288/07 و aind 287/96 به ترتیب با 74/93 و 100 درصد داشت. این نتایج نشان می دهند که ویروس شیوع یافته در ایران در سال 1389 ممکن است از کشورهای همسایه شرقی به ایران وارد شده باشد. در این تحقیق ژن p1-2a و 3c با دنباله های چسبان kpniو xbai توسط pcr تکثیر شدند و ژن p1-2a درون ناقل ptz57r/t الحاق و به باکتری dh5? انتقال داده شد. پس از تائید صحت همسانه سازی به روش هضم آنزیمی و pcr، ژن p1-2a و 3c به درون ناقل بیانی ppicz-b مخمر الحاق و به باکتری dh5? جهت تکثیر انتقال داده شدند. ناقل های بیانی ppicz-bp1-2a و ppicz-b3c پس از غربالگری و تائید صحت همسانه سازی به روش هضم آنزیمی و توالی یابی با آنزیم pmei خطی شده و با روش الکتروپوریشن به مخمر پیشیا پاستوریس انتقال داده شدند. مخمر پیشیا پاستوریس نوترکیب در محیط mmh کشت داده و با متانول بیان پروتئین های مورد نظر القاء شد. بیان پروتئین های p1-2a و 3c به روش لکه گذاری، sds-page و وسترن بلات تایید گردید. پروتئین های تولید شده از مخمر استخراج و با کمک ستون کروماتوگرافی میل ترکیبی ni-nta خالص سازی شد ند و به عنوان آنتی ژن تحریک کننده سیستم ایمنی به خوکچه های هندی تزریق شدند. نتایج این پژوهش نشان داد که ژن p1-2a در ناقل ptz57r/t و ناقل بیانی ppicz-b و ژن 3c در ناقل بیانی ppicz-b به درستی همسانه شده اند. ورود ژن های p1-2a و3c به داخل ژنوم مخمر پیشیا پاستوریس با روش نوترکیبی همولوگ با استخراج dna ژنومی مخمر و انجام pcr تائید شد. بیان پروتئین های p1-2a و 3c در مخمر به روش وسترن بلات با مشاهده باند اختصاصی پروتئین هدف کاملا تایید شدند. غلظت پروتئین های نوترکیب p1-2a و 3c با روش برادفورد به ترتیب، 100 و 40 میکروگرم در میلی لیتر اندازه گیری شدند. نتایج تجزیه واریانس نشان داد که نوع پروتئین نوترکیب در تحریک سیستم ایمنی در برابر ویروس تب برفکی در سطح 05/0 معنی دار بود. ولی اثر افزودن یاور در تحریک سیستم ایمنی معنی دار نبود (p>0.05). بین دو تیمار p1-2a و p1-2a3c همراه با یاور در تحریک سیستم ایمنی تفاوت معنی داری مشاهده نشد. به طور کلی می توان گفت که در این تحقیق ژن های p1-2a و 3c با موفقیت در مخمر پیشیا پاستوریس تکثیر، همسانه و بیان شدند و پروتئین های تولید شده قادر به تحریک سیستم ایمنی و تولید آنتی بادی علیه ویروس تب برفکی سروتیپ o می باشند.

بیماری تب برفکی یکی از بیماری های ویروسی و به شدت مسری در بین حیوانات اهلی بخصوص زوج سمان می باشد که هر ساله خسارات اقتصادی فراوانی به صنعت دامپروری کشور وارد می کند. این بیماری در کشور ایران از طریق واکسیناسیون و قرنطینه حیوانات بیمار کنترل می شود. به منظور کنترل مناسب و موثر شیوع بیماری تب برفکی، تست های تشخیصی مختلفی که قادر به شناسایی حیوانات آلوده از واکسینه شده هستند، توسعه یافته اند. در حال حاضر تشخیص آنتی بادی های پروتئین-های غیرساختاری به ویژه پلی پپتید غیرساختاری 3ab مطمئن ترین روش برای تشخیص حیوانات آلوده از واکسینه می باشد. هدف از انجام این پژوهش تعیین توالی نوکلئوتیدی ژن کد کننده ناحیه 3ab ویروس بیماری تب برفکی به منظور استفاده از آن برای تولید کیت های تشخیصی در تحقیقات آینده می باشد. در این مطالعه، سروتایپ o ویروس بیماری تب برفکی از موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی شعبه شمال شرق تهیه گردید. این ویروس در سال 2010 از نمونه های دام مشکوک به بیماری تب برفکی در استان خراسان رضوی جدا شد و توسط آزمایش های ساندویج الایزای غیرمستقیم و rt-pcr مورد تشخیص قرار گرفت و سروتایپ آن تعیین گردید. rna ویروسی از ویروس تخلیص گردید و واکنشrt-pcr با هدف جداسازی و تکثیر قطعه 672 جفت بازی ناحیه ژنی 3ab انجام پذیرفت. محصول pcr خالص سازی شد و در داخل وکتور ptz57r/t کلون گردید. پلاسمیدهای حاوی قطعه ژنی مورد نظر، تخلیص شدند و با استفاده از روش های کلونی pcr و joined pcr مورد تأیید قرار گرفتند.

بیماری تب برفکی از مسری ترین بیماری دام ها بوده و از نظر اقتصادی مهم ترین بیماری گاو ، خوک و دیگر حیوانات زوج سم نشخوارکننده می باشد. این بیماری در تعداد زیادی کشورها به صورت بومی وجود دارد تحقیق پیش رو با هدف تعیین میزان بیان ژن های il-2 و il-12 در خوکچه هندی واکسینه شده با واکسن بیماری تب برفکی تیپ o صورت گرفت. با استفاده از آزمایش real time pcr میزان بیان این ژن ها سنجیده شد. برای آزمایش هشت خوکچه هندی به وزن 450 الی 500 گرم تهیه و در دو گروه تحت تیمار با واکسن و گروه شاهد قرار گرفتند. واکسن تب برفکی به مقدار 0.5 میلی لیتر در دو مرحله، روز صفر و واکسن یادآور چهارده روز بعد تزریق گردید. نمونه های خون در سه مرحله از تمام حیوانات گرفته شد و سپس استخراج rna انجام و cdna نمونه ها تهیه گردید. برای تعیین کمیت از rlative real time pcr برای هر سه ژن il-2، il-12 و –actin? انجام شد و نتایج به صورت ct از دستگاه دریافت گردید. آنالیز آماری با برنامه اکسل انجام شد. و نتایج نشان، که ژن il-2 افزایش معنی دار نداشته و اختلافات معنی داری نبود. ولی برای ژن il-12 میزان بیان افزایش داشته و اختلافات بین گروه واکسن خورده و گروه کنترل معنی دار می باشد.

هدف از انجام این مطالعه توالی یابی و بررسی سازماندهی ژن هورمون رشد (gh) و ناحیه پروموتور آن و همچنین بررسی تفاوت های تک نوکلئوتیدی (snps) ممکن این ژن در دوگونه شتر تک کوهانه و دو کوهانه ایران بود. تعداد 10 عدد نمونه خون شتر نر و ماده تک کوهانه از کشتارگاهی در یزد، همچنین تعداد 6 عدد نمونه خون شتر های نر و ماده دو کوهانه از ایستگاه تحقیقات منابع طبیعی و امور دام استان اردبیل واقع در روستای جهاد آباد و همچنین یک عدد نمونه خون شتر دو کوهانه از باغ وحش مشهد تهیه گردید. پس از عمل استخراج dna واکنش pcr برای هریک از نمونه ها توسط پرایمرهای اختصاصی انجام شد و عمل توالی یابی با استفاده از محصولات pcr انجام شد. توالی های مورد توافق برای هریک از شترهای تک کوهانه و دوکوهانه بدست آمد. با استفاده از همین توالی های مورد توافق ترکیب نوکلئوتیدی، بررسی های فییلوژنتیکی و سایر بررسی ها انجام شد. همانند سایر پستانداران، ژن هورمون رشد در شتر دارای 5 اگزون است که توسط 4 اینترون از هم جدا شده اند. بر اساس مقایسه توالی های بدست آمده در مطالعه با توالی ثبت شده در ncbi مشخص شد که توالی ژن هورمون رشد شتر تک کوهانه کاملاً با توالی ثبت شده در ncbi مشابه می باشد. در مرحله بعد بیشترین شباهت را مربوط به lama pacos و lama glama بود که به ترتیب 93/92% و 53/92% بود. همچنین توالی بدست آمده ژن هورمون رشد شتر دوکوهانه بیشترین شباهت را با توالی این ژن در شتر تک کوهانه داشت که 52/99% بود. بعد از آن بعد بیشترین شباهت را مربوط به lama pacos و lama glama بود که به ترتیب 93/92% و 53/92% بود. در ناحیه پروموتور توالی جعبه tata یک جهش را نشان داد و به ctat تبدیل شده بود. مشابه همین حالت در لاما (lama glama) نیز مشاهده شده است. توالی یابی10 نمونه مختلف ژن هورمون رشد از شتر تک کوهانه و 7 نمونه مختلف از شتر دوکوهانه به ما این اجازه را داد که تعدای تفاوت تک نوکلئوتیدی را در این ژن شناسایی کنیم. بررسی ها دو نوع هاپلوتایپ را در شتر های تک کوهانه نشان داد. همچنین مقایسه توالی های مورد توافق شتر تک کوهانه و دو کوهانه 9 اختلاف تک نوکلئوتیدی را بین این دو گونه مشخص کرد.

با توجه به شیوع سرطان در جوامع امروزی، یافتن داروهای جدید برای درمان آن از اهمیت بالایی برخوردار است. استفاده از داروهای شیمیایی موجود به دلیل عوارض جانبی که دارند با محدودیت مصرف روبه رو می باشند. از این رو محققین درصدد یافتن مواد طبیعی با خاصیت ضد سرطانی می باشند. هدف اصلی این پایان نامه بررسی اثرات ضد سرطانی lactoferrin وwhey acidic protein موجود در شیر شتر می باشد. در تحقیق حاضر تأثیر lactoferrin وwhey acidic protein موجود در شیر شتر بر درصد مرگ دو رده سلولی بررسی و با سلول های سالم مقایسه گردید. لاکتوفرین در ترشحات موکوسی شامل اشک، بزاق، صفرا و به میزان زیاد در کلستروم و شیر وجود دارد. این گلیکوپروتئین دارای خاصیت ضد میکروبی بوده و هم چنین ویژگی ضد سرطانی و ضد التهابی را نیز داراست. whey acidic protein مهم ترین whey protein در شیر شتر، موش، خرگوش، رت و کانگورو است. این پروتئین دارای نقش تنظیمی منفی در پیشرفت چرخه سلولی سلول های اپی تلیالی پستان (k6|eph4) می باشد، هم چنین باعث کاهش تومورزایی و تهاجم سلول های سرطان سینه می شود. در این تحقیق ابتدا پروتئین های قسمت آب پنیری شیر به کمک روش های اولتراسانتریفیوژ و رسوب دهی با اسید، از سایر ترکیبات آن جدا و سپس lactoferrin و whey acidic protein آن با روش های کروماتوگرافی تعویض یونی و ژل فیلتراسیون جداسازی گردید. در ادامه با الکتروفورز sds-page وزن مولکولی آن ها مشخص شد و با استفاده از تست برادفورد غلظت این پروتئین ها تعیین گردید. سپس مقادیر مختلفی از پروتئین های مذکور به محیط کشت رده های سلولی mcf-7 و vero و سلول های سالم کبد اضافه شد و تغییرات مورفولوژیکی سلول ها به کمک میکروسکوپ معکوس مشاهده گردید. جهت بررسی میزان بقای سلول ها تست mtt انجام شد و نتایج حاصل به صورت درصد زنده ماندن سلول ها بیان گردید. نتایج حاصل از این تحقیق نشان داد که پروتئین های لاکتوفرین وwhey acidic protein موجود در شیر شتر، بر روی رده های سلولی mcf-7 و vero دارای اثرات ضد سرطانی می باشند. به علاوه این پروتئین ها سبب افزایش تکثیر سلول های سالم کبدی در محیط کشت می گردند.

ویروس نکروز عفونی بافت های خونساز (ihnv) یکی از مهمترین ویروس های بیماری زا در ماهی قزل آلا می باشد. ihnv باعث ایجاد اپیدمی بیماری نکروز عفونی بافت های خونساز در ماهیان جوان شده و ماهیان بالغ، حامل این ویروس می شوند. در این مطالعه، 40 نمونه جمع آوری شده از مزارع پرورش قزل آلا در استان خراسان رضوی به روش nested-rt-pcr مورد بررسی قرار گرفت. بافت های کلیه، کبد و طحال ماهیان و همچنین تخم های چشم زده در شرایط استریل، جهت بررسی به موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، واحد شمال شرق کشور- مشهد منتقل و هموژن گردید. پس از استخراج rna و سنتز cdna، آزمایش rt-pcr برای ژن گلیکوپروتئین، وجود ویروس در یک نمونه را نشان داد. به منظور افزایش اختصاصیت واکنش، یک واکنش ثانویه nested-pcr روی محصول اولیه برای منطقه mid-g صورت پذیرفت. منطقه mid-g یک بخش به طول 303 نوکلئوتید در ژن g ویروس ihn است که شامل منطقه تعیین کننده آنتی ژنیک ویروس می باشد. کشف شده که این منطقه برای آنالیزهای فیلوژنتیک این ویروس بسیار با ارزش است، به همین دلیل در این مطالعه از همین منطقه برای بررسی فیلوژنتیک ویروس یافت شده و مقایسه آن با ویروس های دیگر یافت شده در جهان و ثبت شده در پایگاه بانک ژن ncbi و نسب شناسی آن استفاده گردید. با بررسی درخت فیلوژنتیک، که به وسیله نرم افزار mega5 رسم شد، و با مقایسه توالی مورد نظر با توالی های مربوط به آمریکا، اروپا، ژاپن و کره، قرابت نزدیک ویروس استحصالی از خراسان رضوی با آمریکا و اروپا را می توان توصیه کرد. به احتمال زیاد علت نزدیکی ویروس منطقه مورد مطالعه، واردات تخم چشم زده از آن مناطق می باشد.

بیماری تب برفکی اولین بیماری ویروسی شناخته شده در حیوانات است که با گذشت بیش از صد سال از شناخت آن، همچنان یکی از مهمترین خطراتی است که صنعت دامپروری دنیا را تهدید می نماید. یکی از مهمترین روش های شناسایی حیوان واکسینه شده از حیوان مبتلا به تب برفکی استفاده از پروتئین غیرساختاری 3abcبه عنوان آنتی ژن در کیت الایزا می باشد. از اینرو، ژن 3abc ویروس تب برفکی سروتایپ o با استفاده از واکنش زنجیره پلیمراز و پرایمرهای اختصاصی حاوی سایت های برشی bamhi و hindiii جداسازی شد. به منظور بررسی خصوصیات نوکلوتیدی، ژن تکثیر شده به ناقل ptz57r/t انتقال و حضور ژن هدف در ناقل کلونینگ ptz57r/t با استفاده از روش¬های کلونی pcr، هضم آنزیمی و توالی یابی تایید شد. به منظور تولید آنتی ژن نوترکیب، ژن هدف به وکتور بیانی pet21a (+) وارد و سپس به باکتری اشرشیاکلی bl21(de3) به عنوان میزبان بیان منتقل شد. باکتری حاوی وکتور نوترکیب با استفاده از iptg در غلظت نهایی5/1 میلی مولار القا شد. تولید پروتئین نوترکیب با استفاده از الکتروفورز پروتئین و وسترن بلاتینگ تایید شد. وزن مولکولی پروتئین تولید شده در حدود 50 کیلودالتون مشخص شد. نتایج آزمون الایزا نشان داد که آنتی ژن نوترکیب تولید شده به خوبی با آنتی بادی اختصاصی اتصال پیدا می کند و این آنتی ژن، پتانسیل مناسبی جهت استفاده در کیت تشخیصی الایزا برای شناسایی حیوانات اهلی آلوده از حیوانات واکسینه شده دارد.

179 باکتری از 9 نمونه شیر شتر جداسازی و از لحاظ ویژگی های فنوتیپی و مولکولی شناسایی شدند. براساس آنالیز ardra در نواحی 16s rdna و its، جدایه ها به 12 الگوی مختلف گروه بندی شدندکه توسط توالی یابیdna ریبوزومی به عنوان pediococcus pentosaceus, enterococcus lactis, enterococcus hirae, enterococcus faecium bibt_vc, enterococcus faecium ccmmb, enterococcus mundtii, enterococcus durans, lactobacillus fermentum, lactobacillus pentosus, lactobacillus brevis, lactobacillus plantarum وleuconostoc mesenteroides شناسایی شدند. نتایج تایپینگ مولکولی (rep-pcr) نشان داد که 6 سویه مختلف در بین 9 سویه l.plantarum وجود داشت و تنوع ژنتیکی در بین سویه های e. faecium ناحیه گنبد بیش تر از چات بود. نتایج ارزیابی تکنولوژیکی و فعالیت ضدباکتریایی نشان داد کهp. pentosaceus, e. lactis, e. faecium, e. mundtii, l. fermentum, l. brevis و l. plantarum کاندیدهای مناسبی برای فرایند تخمیری شیر شتر و سایر فرایندهای تخمیری لبنی پیشنهاد می شوند.

چکیده ندارد.

چکیده ندارد.

چکیده ندارد.