نام پژوهشگر: اکبر ولی نژاد

1- بررسی اثر whey acidic protein و lactoferrin استخراج شده از شیر شتر یک کوهانه بر روی رده های سلولی vero وmcf-7 .
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه رازی - دانشکده علوم 1390
  انیس بخشانی   سعید زیبایی

با توجه به شیوع سرطان در جوامع امروزی، یافتن داروهای جدید برای درمان آن از اهمیت بالایی برخوردار است. استفاده از داروهای شیمیایی موجود به دلیل عوارض جانبی که دارند با محدودیت مصرف روبه رو می باشند. از این رو محققین درصدد یافتن مواد طبیعی با خاصیت ضد سرطانی می باشند. هدف اصلی این پایان نامه بررسی اثرات ضد سرطانی lactoferrin وwhey acidic protein موجود در شیر شتر می باشد. در تحقیق حاضر تأثیر lactoferrin وwhey acidic protein موجود در شیر شتر بر درصد مرگ دو رده سلولی بررسی و با سلول های سالم مقایسه گردید. لاکتوفرین در ترشحات موکوسی شامل اشک، بزاق، صفرا و به میزان زیاد در کلستروم و شیر وجود دارد. این گلیکوپروتئین دارای خاصیت ضد میکروبی بوده و هم چنین ویژگی ضد سرطانی و ضد التهابی را نیز داراست. whey acidic protein مهم ترین whey protein در شیر شتر، موش، خرگوش، رت و کانگورو است. این پروتئین دارای نقش تنظیمی منفی در پیشرفت چرخه سلولی سلول های اپی تلیالی پستان (k6|eph4) می باشد، هم چنین باعث کاهش تومورزایی و تهاجم سلول های سرطان سینه می شود. در این تحقیق ابتدا پروتئین های قسمت آب پنیری شیر به کمک روش های اولتراسانتریفیوژ و رسوب دهی با اسید، از سایر ترکیبات آن جدا و سپس lactoferrin و whey acidic protein آن با روش های کروماتوگرافی تعویض یونی و ژل فیلتراسیون جداسازی گردید. در ادامه با الکتروفورز sds-page وزن مولکولی آن ها مشخص شد و با استفاده از تست برادفورد غلظت این پروتئین ها تعیین گردید. سپس مقادیر مختلفی از پروتئین های مذکور به محیط کشت رده های سلولی mcf-7 و vero و سلول های سالم کبد اضافه شد و تغییرات مورفولوژیکی سلول ها به کمک میکروسکوپ معکوس مشاهده گردید. جهت بررسی میزان بقای سلول ها تست mtt انجام شد و نتایج حاصل به صورت درصد زنده ماندن سلول ها بیان گردید. نتایج حاصل از این تحقیق نشان داد که پروتئین های لاکتوفرین وwhey acidic protein موجود در شیر شتر، بر روی رده های سلولی mcf-7 و vero دارای اثرات ضد سرطانی می باشند. به علاوه این پروتئین ها سبب افزایش تکثیر سلول های سالم کبدی در محیط کشت می گردند.

شناسایی ویروس عامل بیماری نکروز عفونی بافتهای خونساز (ihnv) در ماهی قزل آلا به روش nested-rt-pcr و بررسی فیلوژنتیک بر مبنای منطقه mid-g
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید مدنی آذربایجان - دانشکده کشاورزی 1391
  رضا حدادیان   سعید زیبایی

ویروس نکروز عفونی بافت های خونساز (ihnv) یکی از مهمترین ویروس های بیماری زا در ماهی قزل آلا می باشد. ihnv باعث ایجاد اپیدمی بیماری نکروز عفونی بافت های خونساز در ماهیان جوان شده و ماهیان بالغ، حامل این ویروس می شوند. در این مطالعه، 40 نمونه جمع آوری شده از مزارع پرورش قزل آلا در استان خراسان رضوی به روش nested-rt-pcr مورد بررسی قرار گرفت. بافت های کلیه، کبد و طحال ماهیان و همچنین تخم های چشم زده در شرایط استریل، جهت بررسی به موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، واحد شمال شرق کشور- مشهد منتقل و هموژن گردید. پس از استخراج rna و سنتز cdna، آزمایش rt-pcr برای ژن گلیکوپروتئین، وجود ویروس در یک نمونه را نشان داد. به منظور افزایش اختصاصیت واکنش، یک واکنش ثانویه nested-pcr روی محصول اولیه برای منطقه mid-g صورت پذیرفت. منطقه mid-g یک بخش به طول 303 نوکلئوتید در ژن g ویروس ihn است که شامل منطقه تعیین کننده آنتی ژنیک ویروس می باشد. کشف شده که این منطقه برای آنالیزهای فیلوژنتیک این ویروس بسیار با ارزش است، به همین دلیل در این مطالعه از همین منطقه برای بررسی فیلوژنتیک ویروس یافت شده و مقایسه آن با ویروس های دیگر یافت شده در جهان و ثبت شده در پایگاه بانک ژن ncbi و نسب شناسی آن استفاده گردید. با بررسی درخت فیلوژنتیک، که به وسیله نرم افزار mega5 رسم شد، و با مقایسه توالی مورد نظر با توالی های مربوط به آمریکا، اروپا، ژاپن و کره، قرابت نزدیک ویروس استحصالی از خراسان رضوی با آمریکا و اروپا را می توان توصیه کرد. به احتمال زیاد علت نزدیکی ویروس منطقه مورد مطالعه، واردات تخم چشم زده از آن مناطق می باشد.