نام پژوهشگر: مونا شاه علی

استخراج و تخلیص پروتئین hbsu از باکتری bacillus subtilis
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه الزهراء - دانشکده علوم پایه 1388
  مونا شاه علی   پریناز قدم

باکتری ها نیز همچون سایر موجودات با مسأله فشرده کردن dna کروموزومی شان روبه رو هستند. ژنوم این موجودات در قالب ساختار متراکمی که نوکلئوئید خوانده می شود، فشرده می گردد. پروتئین های کوچکی که در ارتباط با dna کروموزومی هستند منجر به فشرده شدن قابل توجه این ساختار می گردند. از آنجایی که این پروتئین ها دارای جرم مولکولی، بارالکترواستاتیکی و قابلیت اتصال به dna مشابه هیستونهای یوکاریوتی را دارند، شبه- هیستون (hlp) خوانده می شوند.آنها در فرآیندهایی مانند تنظیم بیان ژن، نوترکیبی و همانندسازی نقش دارند. از میان پروتئین های شبه هیستونی پروتئینhu برای اتصال به dna دارای بریدگی، شکاف یا ساختارهای صلیبی شکل تمایل بیشتری دارد. این پروتئین به صورت دایمر به dna متصل شده و آنرا خمیده می کند.دراین مطالعه حضور پروتئین kda10تا 5/9 مشابه پروتئین شبه هیستونی hu در باکتری bacillus subtilis که یک باکتری گرم مثبت است ودر باکتری گرم مثبت هالوفیل متعادل halobacillus karajensis که از خاک های سطحی منطقه کرج جداسازی شده است، بررسی شد. برای این منظور، استخراج این پروتئین ها به کمک پرکلریک اسید پنج درصد سرد با روش johns که مخصوص استخراج هیستون h1 یوکاریوتی است و همچنین ترسیب با آمونیوم سولفات که بوسیله آن می توان hu را از باکتری های گرم مثبت استخراج کرد، انجام گرفت. طرح sds-page نتیجه استخراج فرضیه وجود پروتئینی با حرکت الکتروفورزی مشابه پروتئین شبه هیستونی hu را در ناحیه kda10در این باکتری تقویت کرد.دراین تحقیق همچنین تخلیص پروتئین huبا دو روش الکتروفورpreparative و کروماتوگرافی تعویض آنیونی انجام شد وpi آن نیز چک شد که مشابهhu بود.