نام پژوهشگر: حمید باخرد

تهیه نانوبادی های نوترکیب مشتق شده از آنتی بادی های زنجیره سنگین شتری بر علیه توکسین نوع e کلستریدیوم بوتولونیوم
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شاهد - دانشکده علوم پایه 1390
  حمید باخرد   محمد محمدی

مسمومیت غذایی ناشی از سموم کلستریدیوم بوتولینیم یکی از کشنده ترین مسمومیتهای شناخته شده می باشد. لذا تشخیص به موقع و درمان آن می تواند از اهمیت ویژه ای بخصوص در کشورهای جهان سوم برخوردار باشد. آنتی بادی های زنجیره سنگین شتری یا همان نانوبادی ها به دلیل خواص ویژه خود مانند ثبات، حلالیت بالا، محلول بودن در آب، تحمل گرمایی بالا و... کاربردهای زیادی در بیوتکنولوژی پیدا کرده-اند. با توجه به خصوصیات ویژه این آنتی بادی ها می توان از آنها برای شناسایی و درمان مسمومیتهای ناشی از سم کلستریدیوم بوتولینیم نوع e استفاده نمود. هدف تولید نانوبادی شتری بر علیه بخش اتصال دهنده سم کلستریدیوم بوتولینیم نوع e که بطور موثری سم مورد نظر شناسایی و خنثی نماید. روش بخش اتصال دهنده سم کلستریدیوم بوتولینیم نوع eبه صورت نوترکیب تولید و به شتر تزریق شد. میزان ایمنی شترها توسط الایزا مورد آزمایش قرار گرفت. بعد از خونگیری، لنفوسیتها جداسازی و rna تام آنها تخلیص و به cdna تبدیل شد. تکثیر ژنهای نانوبادی با nested pcr انجام و ژنهای بدست آمده در وکتور فاژمیدی مناسب قرار داده شد. و بعد از چند بار تکرار این مرحله کتابخانه ژنی با غنای کافی بدست آمد. غربالگری کتابخانه علیه سم مورد نظر در پنج مرحله صورت گرفت و بعد از مرحله پنجم 20 کلنی انتخاب و به وسیله الایزا یک کلنی با تمایل زیاد به آنتی ژن مورد نظر انتخاب گردید. نتیجه نتایج الایزا حاکی از آن است که نانوبادی تولید شده در این تحقیق تمایل زیادی به آنتی ژن مورد نظر نشان داده و می توان از آن برای تشخیص و درمان سم کلستریدیوم بوتولینیم نوع e استفاده کرد.