نام پژوهشگر: حسن مرعشی

جداسازی و شناسائی ژن های القاء شونده در پاسخ مقاومت نخود در برابر قارچ عامل بیماری برق زدگی ascochyta rabiei
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد 1388
  حمیدرضا کاوسی   حسن مرعشی

بیماری برق ز دگی که به وسیله قارچ ascochyta rabiei ایجاد می شود، یکی از مهمترین عوامل محدود کننده کشت و تولید نخود در بیشتر مناطق دنیا و از جمله ایران بشمار می رود. شناخت دقیق از مکانیسم های دفاعی گیاه نخود در برابر این قارچ برای اصلاح ارقام مقاوم و مدیریت بهتر این بیماری حائز اهمیت زیادی است. این تحقیق با هدف جداسازی و شناسائی ژن های القاء شونده در پاسخ مقاومت نخود به قارچ عامل بیماری و ارائه مکانیسم های احتمالی موثر در مقاومت گیاه نخود در برابر آن انجام گردید. ابتدا ارزیابی فنوتیپی مقاومت ارقام در برابر نژادهای غالب و بیماریزای 3 و 6 صورت گرفت که بر اساس نتایج آن میزان مقاومت ارقام در برابر نژاد 3 متفاوت بود به طوری که ارقام kc-218848 و kc-218740 نسبت به ارقام دیگر مقاومت بیشتری از خود نشان می دادند و هیچ کدام از ارقام مورد بررسی در مقابل نژاد 6 قارچ مقاومت نداشتند. در بخش دوم با مقایسه الگوی بیان ‍ژن های گیاهان مقاوم و حساس نخود با استفاده از روش cdna-aflp اساس مولکولی برهم کنش بین قارچ عامل بیماری و میزبان بررسی شد. نتایج نشان داد که الگوهای cdna-aflp ارقام مقاوم و حساس بعد از آلودگی با قارچ عامل بیماری با یکدیگر متفاوت بودند. از میان 3730 قطعه cdna مشتق از رونوشت (tde) تولید شده به وسیله 16 ترکیب پرایمری، 15 قطعه که در رقم مقاوم در مقایسه با نوع حساس بیان متفاوت نشان می دادند، توالی یابی شدند. توالی 9 قطعه مشابه ژن هائی بود که در پاسخ های دفاعی عمومی نقش داشتند. توالی دو قطعه مشابه پروتئین های دخیل در مسیرهای انتقال پیام در واکنش به پاتوژن بود. توالی قطعات باقیمانده نیز مشابه ژن های ساختمانی/ ارگانلی بود. از میان این tdf های بررسی شده به وسیله cdna-aflp، بیان متفاوت سه قطعه نیز به وسیله روش rt-pcr نیمه کمی تائید گردید. نقش ژن های مسیر فنیل پروپانوئید که منجر به تولید ترکیبات فنلی دفاعی در گیاه می شود نیز در سیستم برهم کنش نخود در برابر نژاد 3 قارچ a. rabiei، بررسی گردید. نتایج نشان داد که در ژنوتیپ مقاوم هر چهار ژن بررسی شده مسیر فنیل پروپانوئید شامل فنیل آلانین آمونیا لیاز (pal)، چلکون سینتاز (chs)، ایزوفلاون ردوکتاز (ifr) و فلاوانون 3-هیدروکسیلاز (f3h) به سرعت شش ساعت بعد از تلقیح با نژاد 3 قارچ a. rabiei افزایش بیان پیدا می کند. هرجند رونوشت ژن های pal و ifr در هر دو رقم مقاوم و حساس به سرعت تجمع پیدا می کردند. بنابراین می توان نتیجه گرفت که بنظر می رسد القاء آنزیم های کلیدی مسیر فنیل پروپانوئید یک مکانیسم دفاعی مهم گیاه نخود در برابر قارچ a. rabiei می باشد.

کلونینیگ و آنالیز بیان ‍‍ژن انتی پورتر واکوئلی nhx در گیاه هالوفیت کالار گراس (leptochloa fusca )
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده کشاورزی 1390
  بهمن پناهی   حسن مرعشی

آنتی پورتر واکوئلی +na+/h در گیاهان نقش مهمی در مقاومت به شوری بر عهده دارد. در این بررسی cdnaی ژن +na+/h از گیاه هالوفیت .leptochloa fusca l (کالار گراس) با استفاده از روش pcr - race جداسازی و تعیین توالی گردید. این آنتی پورتر با نام lfnhx دارای طول 2452 جفت باز است و orf آن شامل 1620 جفت باز و 540 اسید آمینه با وزن مولکولی 8/59 کیلو دالتون می باشد. توالی اسید آمینی حاصل بیشترین شباهت را به گیاه alouropus littoralis با 93 درصد همولوژی داشت و توالی حاصل نیز دارای دومین متصل شونده به آمیلورید بود. در این تحقیق همچنین اثرات شوری های کوتاه مدت بر روی بیان این آنتی پورتر با استفاده از روش real time pcr مورد بررسی قرار گرفت. بررسی های بیان با استفاده از روش مذکور حاکی از افزایش بیان این آنتی پورتر در پاسخ به تنش شوری بود که نشان دهنده اهمیت این آنتی پورتر در مقاومت این گیاه به تنش شوری می باشد. علاوه بر این نتایج نشان داد که این گیاه توانایی بالایی در تجمع سدیم در ریشه خود در پاسخ به تنش شوری دارد این نتایج حاکی از همبستگی بالای بین بیان این ژن و تجمع سدیم در ریشه است. لذا می توان پیشنهاد کرد که این آنتی پورتر نقش فیزیولوژیکی مهمی در تجمع سدیم در واکوئل این گیاه در هنگام مواجهه با تنش شوری دارد.

غربالگری و شناسایی اکتینومیست های خاک های شور استان قم به منظور دستیابی به سویه های دارای قابلیت تولید ترکیبات آنتی بیوتیکی
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد 1390
  نسا جعفری   محمد فارسی

تاکنون بیش از 13000 متابولیت زیستی فعال از اکتینومیست ها مورد شناسایی و معرفی قرار گرفته اند که حدود 70% آنها خالص سازی شده است. در مطالعه حاضر 60 اکتینومیست از خاک شور قم جدا شد. با توجه به ویژگی های مرفولوژیکی و بیوشیمیایی 26 جدایه متفاوت شناسایی شد که این جدایه ها از نظر تولید ماده ضدباکتریایی مورد بررسی قرار گرفتند. فعالیت ضد باکتریایی این باکتری ها با استفاده از عصاره تغلیظ شده فاقد سلول حاصل از محیط کشت مایع این باکتری ها در برابر پاتوژن های باکتریایی نظیر pseudomonas aeruginosa،xanthomonas sp. staphylococcus aureus، escherichia coli ،klebsiella sp. ، bacillus subtilis،bacillus pusteurii و acinetobacter sp. بررسی شد. دو جدایه از جدایه های موجود دارای بیشترین فعالیت بودند. مطالعات مولکولی با استفاده از تکثیر ژن 16srrna نشان داد که این سویه ها متعلق به جنس سودونوکاردیا هستند که این جنس یکی از کمیاب ترین جنس های خانواده اکتینومیست ها است. از میان این دو، یکی از باکتری ها به صورت انتخابی در برابر پاتوژن های گرم مثبت فعال بود. خالص سازی جزئی ترکیب ضدباکتریایی تولیدی توسط این باکتری با استفاده از کروماتوگرافی ستونی در ستون سیلیکاژل انجام شد. سه فراکسیون که بیشترین هاله ممانعت را نشان دادند، مخلوط شده و با استفاده از طیف سنجی ftir مورد بررسی بیشتر قرار گرفتند. طیف ir نشان داد که ستون سیلیکا نتوانسته است ترکیب را به خوبی جداسازی کند و جداسازی کامل این ترکیب نیاز به مطالعات بیشتری دارد.

بررسی بیان برخی ژن های احتمالی موثر در مقاومت گوجه فرنگی به گیاه انگل گل جالیز (orobanche spp)
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده کشاورزی 1391
  محمدرضا فیاض   امین میرشمسی کاخکی

گل جالیز(orobanche spp) گیاه انگلی مطلق بوده که به ریشه بسیاری از گیاهان زراعی مهم همچون گوجه فرنگی، آفتابگردان، خیار، توتون و ... متصل شده و باعث کاهش قابل توجهی در عملکرد گیاه زراعی به ویژه در مناطق گرم و خشک همچون اروپا، آفریقا و آسیا می شود. تاکنون روش های متعددی برای کنترل گل جالیز استفاده شده است، اما عموماً این روش ها گران بوده و موثر عمل نمی کنند. درک بهتر نحوه واکنش گیاه میزبان و همچنین مکانیسم مولکولی مقاومت به این گیاه انگل به منظور یافتن روش های بهتر جهت کنترل آن ضروری به نظر می رسد. در این مطالعه بررسی بیان دو ژن کدکننده آنزیم-های کیتیناز (chi3) و سیستئین پروتئیناز (cyp1)، و همچنین یک ژن کدکننده انتقال دهنده ساکارز (sut1)، در واکنش گیاه گوجه فرنگی به آلودگی با گل جالیز، در دو ژنوتیپ متحمل و حساس با استفاده از تکنیک real time pcr انجام شد. هر سه ژن در ساعات اولیه پس از آلودگی افزایش بیان را نشان دادند. بیان انتقال دهنده ساکارز و همچنین آنزیم سیستئین پروتئیناز در هنگام تنش در دو ژنوتیپ با یکدیگر تفاوت داشته اما در مورد آنزیم کیتیناز این تفاوت مشاهده نشد. نحوه ی بیان ژن ها در دو ژنوتیپ حساس و مقاوم نشان داد که فعالیت های دفاعی گیاه گوجه فرنگی از همان ساعات اولیه پس از آلودگی شروع شده و رقم متحمل پاسخ دفاعی سریع تری به علائم منتقل شده از گیاه انگل می دهد. همچنین احتمالاً آنزیم های تجزیه کننده پروتئین (پروتئینازها)، یکی از ابزارهای دفاعی زودهنگام گیاهان در جلوگیری از نفوذ گل جالیز به ریشه می باشد

شناسایی، جداسازی، بررسی بیان، انتقال و خاموش سازی ژنهای القا شده در پاسخ به تنش خشکی در گیاه سورگوم sorghum bicolor
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده کشاورزی 1391
  مهدی شاهسوند   احمد رضا بهرامی

سورگوم پنجمین غله مهم دردنیا می باشدکه به لحاظ مقاومت بالایی که نسبت به شرایط نا مساعد محیطی دارد همواره مورد توجه بسیاری از محققان بوده است. مقاومت به گرما و خشکی، یک مشخصه مهم برای این گیاه محسوب می شود. در این پژوهش با استفاده از روش cdna-aflp بر روی یک رقم مقاوم تجاری سورگوم تعدادی از ژنهای مرتبط با تنش خشکی شناسایی گردید و سپس بیان تعدادی از این ژنها توسط روش rt- pcr نیمه کمی و کمی تحت سطوح مختلف تنش خشکی آزمون گردید. بدین منظور گیاهچه های سورگوم در مرحله 6-5 برگی به محیط کشت هیدروپونیک انتقال یافته وتوسط peg (6000) تحت تیمار تنش خشکی قرار گرفتند و در زمانهای مختلف پس از اعمال تنش (2، 6، 12و 24 ساعت پس از اعمال تنش)، نمونه گیری از بافتهای برگ و ریشه انجام گرفت. سپس با استفاده از تکنیک cdna-aflp ژنهای القا شده در تنش خشکی شناسایی شدند و بیان برخی از آنها با استفاده روش rt- pcr نیمه کمی و کمی مورد ارزیابی قرار گرفتند. نتایج نشان داد که الگوی بیان ژنهای مرتبط با تنش خشکی کاملا وابسته به نوع بافت و اندام و زمان نمونه گیری می باشد. در ضمن این آزمایش نتایج حاصل از آزمایشات cdna – aflp قبلی راکاملا تایید می کرد. در ادامه یکی از ژنهای شناسایی شده (ژن شماره 39) که در مطالعات بیوانفورماتیک پروتئین فرضی را کد می نمود، در ناقل pbi 121 کلون شد وسپس به منظور بررسی نقش و عمل دقیق آن به گیاه مدل توتون انتقال داده شد و در نهایت بیان این ژن در گیاه توتون تراریخت بررسی شد. نتایج در گیاه توتون نشان داد که گیاه تراریخت نسبت به شاهد از مقاومت به خشکی بالاتری برخوردار بود. همچنین به منظور بررسی ژن شماره 17 که در مراحل بعداز تنش بیانش کاسته شده بود این ژن با استفاده از ناقلهای خاموشی rnai در گیاه سورگوم خاموش شد ولی در نهایت هیچ گیاه سورگومی باززایی نشد

ارزیابی اثر سولامارژین حاصل از گیاه تاجریزی سیاه (solanum nigrum) در مهار مهاجرت و تهاجم سلولهای توموری
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده کشاورزی 1393
  ایمان کریمی ثانی   فاطمه کلالی نیا

سلول¬های توموری در فرآیندی که با عنوان متاستاز شناخته می¬شود به بافت¬های دیگر بدن تهاجم می¬کنند و باعث گسترش بیماری به دیگر نقاط بدن می¬شوند. همچنین متاستاز عامل90% مزگ و میر ناشی از سرطان است. گیاه solanum nigrum که در ایران با نام تاجریزی سیاه شناخته می شود تاثیرات دارویی زیادی نشان داده است که از مهمترین این اثرات خواص ضد سرطانی آن است. سولامارژین (solamargine) یکی از گلیکوآلکالوئیدهای اصلی گیاه تاجریزی سیاه است. هدف این پژوهش ارزیابی تاثیرات ترکیب سولامارژین روی تهاجم و مهاجرت سلول¬های سرطانی رده hepg2 بود. سمیت سلولی سولامارژین با آزمایش mtt، تاثیرات ضد مهاجرت سلولی با آزمایش wound healing migration assay و تاثیرات ضد تهاجمی با boyden chamber invasion assay بررسی شدند. مکانیسم مولکولی مهار تهاجم و متاستاز سلول های کارسینوم کبدی توسط سولامارژین با وسترن بلاتینگ و ژلاتین زیموگرافی پروتئین¬های mmp-2 و mmp-9 بررسی گردید. در این تحقیق اثرات مهارکنندگی تیمارهای حاوی سولامارژین روی رشد و تکثیر سلول های رده hepg2دیده شد و همچنین با افزایش غلظت سولامارژین این اثر مهاری افزایش بیشتری نشان داد. اثرات مهاری سولامارژین با غلظت ?m 7.5 روی تهاجم و مهاجرت سلول های رده hepg2 قابل توجه بود به طوری که سولامارژین با غلظت ?m 7.5 توانست بیش از 63% و 71% مهاجرت سلول های رده hepg2 را به ترتیب در حالت تیمار و پیش تیمار کاهش دهد. همچنین سولامارژین در غلظت ?m 7.5 توانست تهاجم سلول های رده hepg2 را بیش از 71% نسبت به شاهد کاهش دهد. نتایج ژلاتین زایموگرافی نشان دادند کاهش فعالیت پروتئین های mmp-2 و mmp-9 در محیط کشت با مقدار غلظت سولامارژین در ارتباط است. با استفاده از روش وسترن بلاتینگ مشاهده شد که میزان بیان پروتئین¬های mmp-2 و mmp-9 در سلول های تیمار شده با سولامارژین با غلظت ?m 7.5 به طور معنی¬داری نسبت به شاهد کاهش نشان داده است. به طور خلاصه نتایج این تحقیق نشان دادند که سولامارژین به طور موثری تهاجم و مهاجرت سلول های کارسینومای کبدی را در شرایط آزمایشگاهی کاهش می دهد که بنظر می¬رسد قسمتی از آن از طریق کاهش بیان پروتئین¬های mmp-2 و mmp-9 باشد.

مهندسی ژنتیک ریزجلبک chlamydomonas reinhardtii به منظور بررسی پتانسیل تولید amorpha-4,11-diene پیش ساز عامل ضد مالاریایی آرتمیزنین
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده کشاورزی 1393
  افسانه محکمی   حسن مرعشی

مالاریا بیماری خطرناکی است که بیش از یک سوم جمعیت کره زمین را تهدید می کند و امروزه از آرتمیزنین و مشتقات آن به عنوان مهم ترین داروی ضد مالاریا استفاده می شود. آرتمیزنین یک سسکوئی ترپن اندپروکسیدی می باشد که به میزان بسیار اندک در گیاه artemisia annua تولید می شود. برای دستیابی به تولید بیشتر این متابولیت ارزشمند از روش های مهندسی ژنتیک استفاده شده و از آن جا که ریزجلبک ها قابلیت استفاده به عنوان یک سکوی مناسب تولید فرآورده های نوترکیب می باشند، این تحقیق با هدف مهندسی ژنتیک جلبک به منظور بررسی تولید آمورفا دی ان، پیش ساز آرتمیزنین پایه گذاری و انجام شد. این مطالعه در دو آزمایش مورد بررسی قرار گرفت. در مرحله نخست دو ژن کلیدی ads و fpps، از مسیر بیوسنتزی این متابولیت انتخاب و بر اساس ترجیح کدونی کلروپلاست جلبک کلامیدوموناس و سازه کلروپلاستی طراحی شده، سنتز شدند. در آزمایش اول به منظور تراریزش هسته ای، ژن ads داخل ناقل pbi121 همسانه سازی شد. پس از هم کشتی کلامیدوموناس با نژادهای آگروباکتریوم حاوی ناقل pbi121-ads کلون های تراریخت جلبک مشاهده شد. در این آزمایش تعداد کلون های مشاهده شده در محیط گزینشی در هم کشتی با نژاد gv3101 بیش از نژادlba4404 بود. همچنین در این آزمایش بیان پایداری در انتقال با آگروباکتریوم مشاهده نشد و کلون ها بعد از چند روز رشد در محیط گزینشی از بین رفتند. ناپایداری بیان می تواند در نتیجه عدم استفاده از عناصر تنظیمی مناسب جلبک، عدم وجود بهینه سازی کدونی برای هسته و احتمالاً وجود بیان موقت انتقال با آگروباکتریوم باشد. در آزمایش دوم نخست سازه کلروپلاستی طراحی شده سنتز شد. برای این منظور ناحیه 3utr ژن rbcl در انتهای ژن fpps و پیشبر atpa در ابتدای ژن ads قرار گرفت. سپس دو ژن سنتزی و عناصر تنظیمی همراه آنها درکنار یکدیگر قرار گرفته و کاست بیانی موردنظر بدست آمد. در مرحله بعد این کاست بیانی در داخل ناحیه fr(flanking region) ژنوم کلروپلاست کلامیدوموناس قرار گرفت. سپس ناقل کلروپلاستی ایجاد شده از طریق تفنگ ژنی به ریز جلبک کلامیوموناس شلیک شد. تعداد کلون های بدست آمده از طریق شلیک با تفنگ ژنی بسیار کم بود و بین این کلون ها تنها در دو کلون نتایج pcr و rt-pcr آنها مثبت بود. بررسی میزان تولید متابولیت موردنظر در کلون های تراریخت در حال بررسی می باشد.

بیان ژن کد کننده آنتی ژن vp1 و بررسی امکان زراعت مولکولی آن جهت تولید واکسن نوترکیب تب برفکی در گیاه توتون (nicotiana tabacum)
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده کشاورزی 1393
  مازیار حبیبی   حسن مرعشی

بیماری تب برفکی (fmd) یکی از بیماری های مهم دامی است که باعث خسارت اقتصادی بالایی به صنایع تولید شیر و گوشت می شود. در حال حاضر از ویروس های ضعیف شده بعنوان واکسن علیه این بیماری استفاده می شود. هزینه بالای تولید و خطر فعال شدن ویروس های ضعیف شده در واکسن های سنتی باعث شده است که در سال های اخیر، تولید واکسن های نوترکیب برای مقابله با این بیماری مورد توجه قرار گیرد. در مطالعه حاضر، از یک رویکرد اپی توپ محور برای تولید واکسن نوترکیب تب برفکی در گیاه توتون استفاده شده است. بدین منظور توالی ژنی کدکننده آمینواسیدهای 129 تا 169 پروتئین vp1 که یکی از پروتئین های پوششی ویروس مولد تب برفکی است با استفاده از ناقل اگروباکتریوم در گیاه توتون بیان شد. لاین های تراریخته بر اساس مقاومت به کانامایسین و آزمون pcr گزینش شده و بیان ترانسژن در آنها در سطح رونویسی و ترجمه مورد بررسی قرار گرفت. هرچند در آزمون های real time pcr و الایزا تمامی لاین های گزینش شده سطحی از بیان ترانسژن را نشان دادند، اما در آزمون وسترن بلات، باند مورد نظر تنها در دو لاین 10 و 42 مشاهده شد. قابلیت ایمنی زایی پروتئین نوترکیب تولید شده در لاین های توتون از طریق تزریق به حیوان آزمایشگاهی (خرگوش) مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که واکسن نوترکیب تولیدی می تواند سیستم ایمنی میزبان را تحریک کند که این با مشاهده حضور آنتی بادی های اختصاصی در سرم بدست آمده از حیوانات تیمار شده در آزمون الایزا به اثبات رسید. علاوه بر این، از آن جا که یکی از اهداف مهم پژوهش حاضر افزایش سطح بیان ترانسژن در لاین های تراریخته از طریق راهکارهایی چون افزودن توالی اتصال ریبوزومی، بهینه سازی کدونی و کاربرد سیگنال پپتید بود، میزان بیان ژن در دو لاین 10 و 42 به شکل کمی اندازه گیری شد. نتایج نشان داد که سطح بیان ترانسژن در دو لاین 10 و 42 به ترتیب 65/0 و 72/0 درصد کل پروتئین های محلول گیاه است. در مجموع یافته های این پژوهش نشان داد که با به کارگیری استراتژی های مناسب و هم چنین استفاده از اپی توپ های درست می توان به یک واکسن نوترکیب موثر علیه تب برفکی دست یافت.

مطالعه سیتوژنتیکی و مقایسه کاریوتایپی تنوع در میان اکوتیپ های مختلف موسیر در ایران
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده کشاورزی 1393
  عبدالکریم معصومی فرد   حسن مرعشی

موسیر (regel alliums altissimum) گیاهی دو ساله و متعلق به خانواده آلیاسه است. این گیاه در معرض انقراض قرار دارد و در نتیجه بررسی تنوع در آن لازم است. یکی از روش های مرسوم در بررسی تنوع در گونه های گیاهی انجام مطالعات کاریوتایپی و سیتوژنتیکی است. در تحقیق حاضر برای مطالعات کاریوتایپی برخی اکوتیپ های مختلف ایران (شیروان، گلیان، زوارم، ده سرخ، طرقبه، همدان (سفید و زرد)) جمع آوری شدند. پس از آماده سازی ریشه ها، گسترش متافازی رنگ آمیزی شده بوسیله نرم افزار (karyotype analysis v 1.5) مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت و شاخص های کاریوتایپی اندازه گیری شدند. تجزیه واریانس نشان داد که اختلاف معنی داری بین صفات طول بازوی بلند، کوتاه و طول کل کروموزم در اکوتیپ های مختلف (01/0p?) وجود دارد. همچنین نتایج نشان داد که عدد پایه کروموزمی 8x= در تمام اکوتیپ ها دیده می شود (16n=2x=2). آنالیز کلاستر نشان داد که فاصله اقلیدسی بین اکوتیپ های گلیان و شیروان کمترین مقدار بود (73/1). همچنین این نتیجه بدست آمد که اکوتیپ ده سرخ کوچکترین کروموزم ها (05/3±91/23) و بزرگترین کروموزم ها مربوط به اکوتیپ زوارم (05/3±21/30) است. دو اکوتیپ همدان و ده سرخ بیشترین تقارن سانترومری و کاریوتایپی را دارند، بطور کلی نتایج نشان دهنده وجود تنوع قابل توجهی بین اکوتیپ ها بوده که می تواند در برنامه های اصلاحی آینده استفاده شود .

بهینه سازی شرایط باززایی برخی از پایه های مهم رز در شرایط این ویترو
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده کشاورزی 1393
  مریم مرادیان   عبدالرضا باقری

رز از مهمترین گیاهان زینتی است که امروزه به عنوان یکی از پرفروش ترین گل های شاخه بریده دنیا مطرح است. تکنیک های کشت بافت روش مناسبی را برای تکثیر این گیاه زینتی فراهم کرده است. لذا در این پژوهش به منظور بررسی عوامل موثر بر ریزازدیادی رز و کنترل زرد شدگی برگ ها در شرایط این ویترو، اثر عوامل مختلفی بر روی سه گونه رز (r. canina، r. beggeriana و r. multiflora) در آزمایش های جداگانه مورد ارزیابی قرار گرفتند. در مرحله اول اثر محیط کشت پایه ms (تیمار شاهد)، محیط کشت ms تغییریافته حاوی آهن سه برابر، آهن و کلسیم سه برابر در شرایط جامد و محیط کشت vs در شرایط جامد و مایع بهمراه 1 میلی گرم در لیتر هورمون ba و 0/5میلی گرم در لیتر هورمون naaبر روی سه گونه r. canina، r. beggeriana و r. multiflora در قالب فاکتوریل به صورت طرح کاملا تصادفی مورد برسی قرار گرفت. نتایج نشان داد بیشترین تعداد گیاهچه تولید شده (1، 2 و 2/5)، طول شاخه (3/5، 6/3 و 6/7 سانتی متر)، وزن خشک (0/03، 0/049و 0/05 گرم) و درصد شاخه زایی (100 درصد) به ترتیب در گونه r. beggeriana، r. multiflora و r. canina و درصد برگ سبز (84/4، 87/27 و 90/4 درصد) به ترتیب در گونه r. multiflora، r. beggeriana و r. canina در محیط کشت vs مایع مشاهده شد. در مرحله دوم گیاهچه های باززایی شده به منظور ریشه زایی به محیط کشت های vs2/1جامد و مایع حاوی 40 گرم در لیتر ساکارز، 25/0 میلی گرم در لیتر هورمون ba، 1 میلی گرم در لیتر هورمون iba و 0/1میلی گرم در لیتر هورمون naa انتقال یافتند. این آزمایش در قالب فاکتوریل بر پایه طرح کاملا تصادفی انجام شد. بیشترین درصد ریشه زایی (100 درصد) با تعداد 9/1 ریشه تولید شده و اندازه 3/4 سانتی متر طول ریشه در گونه r. canina و محیط کشت جامد مشاهده شد. همچنین در گونه r. multiflora بیشترین درصد ریشه زایی (91/6 درصد) در محیط کشت مایع مشاهده شد. اما در گونه r. beggeriana از لحاظ درصد ریشه زایی (69 درصد) بین دو نوع محیط کشت جامد و مایع تفاوت معنی داری مشاهده نشد. به منظور ریشه زایی قلمه ها در مرحله دوم آزمایشاتی با تیمارهای هورمونی مختلف در قالب فاکتوریل به صورت طرح کاملا تصادفی انجام گرفت. نتایج نشان داد بیشترین درصد ریشه زایی، تعداد ریشه و طول ریشه در هر سه گونه در محیط کشت vs2/1 مایع حاوی یک میلی گرم در لیتر iba ، 0/1میلی گرم در لیتر naa و 4 درصد ساکارز بدست آمد. 90 درصد از گیاهچه های ریشه دار شده پس از یک ماه قرار گرفتن در محیط گلخانه بطور موفقیت آمیزی سازگار شدند.

بهینه سازی شرایط تولید ریشه مویین در گیاه دارویی همیشه بهارcalendula officinalis به منظور تولید ترکیب دارویی اولئانولیک اسید و تولید نانوذرات نقره
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده کشاورزی 1394
  زهره سهرابی نژاد   حسن مرعشی

ریشه مویین گیاه دارویی همیشه بهار به منظور تولید ترکیب دارویی اولئانولیک اسید و سنتز نانوذران نقره به کمک عصاره آبی آن تولید شد و شرایط رشدی آن بهینه سازی گردید.

بررسی امکان انتقال ژن gus به ریشه موئین hyoscyamus muticus
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده کشاورزی 1386
  ناجیه السادات قدمی   حسن مرعشی

چکیده ندارد.

بررسی امکان جداسازی و همسانه سازی cdna ژن منگنز پراکسیداز (mnp) از قارچ خوراکی دکمه ای (agaricus bisporus)، مقدمه ای برای دستورزی ژنتیکی
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده کشاورزی 1388
  جواد حسن جانپور   محمد فارسی

تولید و پرورش قارچ خوراکی یکی از کاربردهای جاری فن آوری های میکروبی به منظور تبدیل زیستی ضایعات بخش کشاورزی به فرآورده های با ارزش غذایی است. در قارچ خوراکی دکمه ای (agaricus bisporus) آنزیم های مختلفی از ابتدای رشد میسلیومی تا انتهای دوره میوه دهی تجزیه ترکیبات لیگنینی را در محیط کمپوست برعهده دارند. یکی از مهمترین این آنزیم ها، آنزیم منگنز پراکسیداز است که سهم عمده ای در تجزیه ترکیبات لیگنینی دارد. به منظور انجام مطالعات ملکولی بر روی آنزیم منگنز پراکسیداز در قارچ خوراکی دکمه ای سفید نژاد im008 وآماده نمودن زمینه برای افزایش تولید این آنزیم در قارچ خوراکی دکمه ای اقدام به جداسازی و همسانه سازی cdna ژن کدکننده آنزیم منگنز پراکسیداز گردید. برای این منظور استخراج rna از میسلیوم های رشدیافته قارچ خوراکی بر روی محیط کشت مایع عصاره کمپوست انجام شد و cdna آن بوسیله آنزیم رونوشت بردار معکوس ساخته شد. پس از تکثیر قطعه مورد نظر بوسیله واکنش زنجیره ای پلیمراز، قطعه تکثیرشده در ناقل ptz57r/t قرار گرفت و سپس به باکتری e.coli سویه dh5αمنتقل گشت. پس از استخراج پلاسمید از باکتری های تراریخته، پلاسمید استخراج شده مورد هضم آنزیمی قرار گرفت و در مرحله آخر قطعه تکثیر شده تعیین توالی شد. در نتایج بلاست توالی نوکلئوتیدی در مکان¬های بازهای نوکلئوتیدی با شماره های 657 و 850 با توالی ژن mnp1 موجود در بانک اطلاعاتی ncbi تفاوت داشت که به ترتیب سبب تغییر اسید آمینه ایزولوسین به والین و اسید آمینه سرین به آلانین در توالی اسیدآمینه قطعه cdna همسانه شده، می شود.

مطالعه بیان ژن کیتیناز در نخود (cicer arietinum l.) با استفاده از real-time pcr
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده کشاورزی 1388
  حمیده سپهری زرندی   عبدالرضا باقری

گیاهان عالی راهکارهای متعددی را برای مقاومت و حفاظت خود در برابر تنش های زیستی و غیر زیستی، بکار می برند. یکی از این راهکارها، ساخت پروتئین های مرتبط با پاتوژن است که ژن کیتیناز از دسته ژن های مذکور می باشد. لذا به منظور درک بهتر سیستم های دفاعی گیاه نخود (cicer arietinum l.) در سطح مولکولی، بیان دو ژن کیتیناز مربوط به گروه i و گروه iii درحین آلودگی با قارچ فوزاریوم مورد مطالعه قرار گرفت. سطح تظاهر ژن های مذکور در گیاهان نخود تیمار شده و شاهد از ژنوتیپ حساس (mcc724) و مقاوم mcc10)) نسبت به آلودگی با ایزوله 85 قارچ بیماری زای fusarium oxysporum f. sp. ciceri، در ساعات معینی پس از تلقیح، ردیابی شد تا احتمال دخالت آن ها در ایجاد مقاومت به پژمردگی فوزاریومی به گیاه نخود بررسی شود. به منظور مطالعه الگوی تظاهر ژن کیتیناز درسطح رونوشت ها در گیاهان شاهد و تیمار شده، پس از گذشت 6، 24، 48 و 72 ساعت از آلودگی، rnaی کل از اندامهای هوایی استخراج شده و برای ساخت cdna و انجام rt-pcr مورد استفاده قرار گرفت. نتایج حاکی از افزایش بیان هر دو ژن پس از آلودگی بود اما سطح تظاهر ژن کیتیناز i در گیاهان شاهد و نیز پس از تلقیح، در ژنوتیپ حساس بیشتر بود. بنابراین ژن مذکور نمی تواند نقشی در مقاومت گیاه نخود در برابر ایزوله 85 فوزاریوم داشته باشد. برای بررسی دقیق تر تغییرات بیان ژن کیتیناز iii از روش real-time pcr استفاده شد. نتایج نشان داد که حداکثر القا (بیش از سه برابر افزایش بیان) ژنوتیپ مقاوم، در 48 ساعت پس از تلقیح روی می دهد. این در حالی است که سطح بیان در ژنوتیپ حساس پس از 6 ساعت به حداکثر می رسد (بیش از پنج برابر) و تا 72 ساعت سطح بیان در هر دو ژنوتیپ به کمتر از سطح اولیه تظاهر می رسد. اگرچه سطح بیان ژن کیتیناز iii در ژنوتیپ مقاوم دیرتر از ژنوتیپ حساس به حداکثر می رسد، اما بیش از سه برابر سطح تظاهر در ژنوتیپ حساس می باشد. بنابراین به احتمال زیاد ژن مذکور در اعطای مقاومت نسبت به پژمردگی فوزاریومی دخیل می باشد.

بررسی محاربه در قوانین موضوعه جمهوری اسلامی ایران
پایان نامه مجتمع آموزش عالی قم 1377
  موسی الرضا اکبری اسبق   حسن مرعشی

این پایان نامه در دو بخش تدوین یافته است . بخش اول مشتمل برسه مبحث و بخش دوم شامل چهار مبحث است . در بخش اول به تعریف جرم محاربه و ذکر ارکان متشکله آن و مقایسه جرم مذکور با جرم بغی و افساد فی الارض ، شروع به جرم، معاونت و شرکت در محاربه، مورد بحث قرار گرفته است . در بخش دوم به جرائمی که در قوانین موضوعه در حکم محاربه، قلمداد شده است و نیز به مجازات محاربه در قوانین موضوعه و نظرات فقهاء در نحوه اعمال و اجرای مجازاتهای چهارگانه مقرره، سپس به نحوه اثبات این جرم و شرایط سقوط حد و نیز موارد عدم سقوط حد محاربه، اختصاص یافته است . در بخش پایانی، خلاصه ای از جریان تحقیق و ابهامات و ایرادهایی که در رابطه با محاربه در قوانین موضوعه وجود دارد، اشاره گردیده است .

مطالعه تطبیقی مسئوولین پرداخت دیه درحقوق موضوعه، فقه امامیه و فقه عامه
پایان نامه مجتمع آموزش عالی قم 1378
  احمد اکرمی ابرقویی   حسن مرعشی

نوشتار حاضر در چهار فصل تدوین و ارائه گردیده است : فصل اول را به مباحث کلی نظیر تعریف ، تاریخچه، ماهیت حقوقی و موارد پرداخت دیه اختصاص داده ایم. در فصل دوم، از جانی به عنوان یکی از مسئولین پرداخت دیه سخن گفته و مباحثی چون قاعده اولیه در مسئولیت و موارد مسئولیت جانی در پرداخت دیه را مطرح نموده ایم. فصل سوم، اختصاص به دومین مسئول پرداخت دیه، یعنی عاقله، داشته و در آن، مسائلی همچون تعریف ، تاریخچه، شرایط عاقله، ماهیت حقوقی مسئولیت عاقله، موارد مسئولیت عاقله، شرایط مسئولیت عاقله، توجیه حقوقی و شبهات ضمان عاقله و پیشنهاد جهت جایگزینی عاقله، مورد بررسی قرارگرفته است و بالاخره، در فصل چهارم، بحث در مورد بیت المال و دیگر مسئولین پرداخت دیه را پی گرفته و ضمن بیان مفهوم بیت المال و ذکر تاریخچه ای کوتاه، و تشریح تفاوت یا عدم تفاوت بین دو اصطلاح بیت المال مسلمین و بیت المال امام، به بیان و شرح وتفسیر موارد مسئولیت او پرداخته و در آخر نیز اقدام به معرفی و تبیین مسئولیت کسان دیگری که در فقه، و بعضا"قانون ما، از آنها به عنوان مسئولین پرداخت دیه نام برده شده است ، نموده ایم.

محاسبه وراثت پذیری و نوع عمل ژن برای صفات اگرونومیکی جو درسه تلاق
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تهران 1370
  حسن مرعشی   عباسعلی زالی

هدف ازانجام این تحقیق تخمین عمل ژن ها و محاسبه وراثت پذیری عمومی و خصوص صفات زراعی جو درسه تلاقی مختلف بود . درهرتلاقی، والدین بهمراه افراد f1 و f2 دوبک کراس b1 و b2 در کرتهای جداگانه کاشته شدند. درهرتلاقی یکی از والدین دارای منشاء ژاپنی (پایه پدری) و دیگری دارای منشاء ایرانی بودند. دو تلاقی بین تیپ های شش ردیفه (تلاقی 1 و)2 و تلاقی دیگر (تلاقی)3 بین جوهای دو ردیفه ان گرفت صفات زراعی مورد بررسی عبارت بودند از : وزن کل گیاه، وزن کاه، عملکر دانه، شاخص برداشت نسبت کاه به دانه، تعداد دانه درخوشه، وزن دانه یک خو وزن هزار دانه، تعداد خوشه در بوته و ارتفاع گیاه، برای تخمین عمل ژن ها از مدل افزایشی - غلبه ساده استفاده گردید. ضرایب وراثت پذیری با تجزیه واریانس نسلها و بدست آوردن واریانسهای محیطی، افزایشی و غلبه محاسبه گردید نتایج بدست آمده هیچگونه اثر متقابل ژنی (اپیستازی) برای صفات مورد مطالعه درهرسه تلاقی نشان نداد. عمل ژن ها بانوع تلاقی، تیپ جواز نظر ردیف و صفت مورد بررسی رابطه ای نداشتند .