نام پژوهشگر: نوشین شیخ جباری

بررسی کنترل بیماری لکه موجی در سیب زمینی تراریخت به واسطه بیان ژن گلوکز اکسیداز
پایان نامه دانشگاه بین المللی امام خمینی (ره) - قزوین - دانشکده کشاورزی 1392
  نوشین شیخ جباری   قاسمعلی گروسی

عوامل باکتریایی و قارچ های بیماری زا از جمله مهم ترین عوامل ایجاد خسارت در محصولات کشاورزی می باشد. بیماری لکه موجی (early blight) با عامل قارچی alternaria solani یکی از رایج ترین بیماری های سیب زمینی در مناطق سیب زمینی کاری است و میزبان های اصلی آن در گیاهان خانواده سولاناسه سیب زمینی، گوجه فرنگی و فلفل می باشد. یکی از کاربردهای بیوتکنولوژی برای مبارزه با بیماری های گیاهی مقاوم نمودن گیاه از طریق دستکاری ژنتیکی و انتقال ژن های رمزکننده آنزیم های اکسیداسیون، از جمله گلوکز اکسیداز به گیاهان زراعی است. آنزیم های فوق موجب افزایش اکسیژن های فعال(ros) در گیاه می-گردد که خود از عوامل موثر در ایجاد مقاومت سیستمیک اکتسابی (sar)، به عنوان یک سیگنال ویژه در توانایی گیاهان برای دفاع از خود می باشد. در این مطالعه از ژن گلوکزاکسیداز (gox) با منشا قارچ penicillium foeniculsum همسانه سازی شده در پلاسمید pbi121 جهت تهیه گیاه تراریخت سیب زمینی استفاده شد. پلاسمید بیان نوترکیب در جهت سنس و آنتی سنس به واسطه آگروباکتریوم سوش gv3101 با ریزنمونه برگی و میان گره سیب زمینی تلقیح شد. ساقه های ایجاد شده در محیط جامد ms حاوی هورمون 5/2 میلی گرم در لیتر tdz (تیدیازرون) و آنتی بیوتیک کانامایسین و سفوتاکسیم به محیط ms جامد حاوی 1 میلی گرم در لیتر iba و آنتی بیوتیک های ذکر شده برای ریشه-زایی منتقل شدند.تا پس از رشد کافی گیاهان تراریخت، بررسی های بعد از جمله آزمایش سریع واکنش زنجیره ای پلی مراز با آغازگرهای اختصاصی روی آن صورت گرفت. نتایج مولکولی و تراریختی نشان داد که گیاهان تراریخت با پلاسمید در جهت سنس به وضوح به محیط انتخابی حاوی کانامایسین دارای مقاومت می باشند، نتایج حاصل از واکنش زنجیره ای پلی مراز نیز درستی تراریختی را تایید نمود.