بررسی میزان ترشح خارج سلولی پپتید ضد سرطان VEGF111b در سلول های انسانی HEK-293

نویسندگان

  • حجتی, زهره بخش ژنتیک، گروه زیست شناسی، دانشگاه اصفهان، اصفهان
  • صادقی, مرتضی مرکز تحقیقات ژنتیک انسانی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله، تهران
چکیده مقاله:

سابقه و هدف: VEGF111b یک ایزوفرم جدید از فاکتورهای رشد اندوتلیال عروقی (VEGF) است که اخیرا به­ عنوان یک داروی ضد سرطان مطرح شده است. هدف مطالعه حاضر بررسی میزان ترشح این پروتئین از دیواره سلول­ های HEK293 به­ منظور تولید تجاری این فاکتور نوترکیب است. مواد و روش ها: توالی VEGF111b توسط نرم­افزار OLIGO و اطلاعات ژن بانک NCBI طراحی و داخل وکتور pBUD.cE4.1کلون شد. وکتور نوترکیب pBUD.VEGF111b با استفاده از کیت لیپوفکتامین به داخل سلول­ های HEK293 ترانسفکت شد. تولید VEGF111b 48 ساعت بعد از ترانسفکشن در عصاره لیز سلولی توسط وسترن بلاتینگ و آنتی ­بادیHuman anti-VEGF  بررسی شد. میزان ترشح VEGF111b در عصاره لیز سلولی و محیط کشت سلولی به روش ELISA اندازه گیری گردید. نتایج: کلونیتگ صحیح قطعهVEGF111b  در وکتور pBUD.cE4.1 توسط هضم آنزیمی و ژل الکتروفورز تائید شد. مشاهده باند شارپ 12 کیلودالتن در نتایج وسترن بلات عصاره لیز سلولی نشان­گر تولید پپتید نوترکیب VEGF111b در سلول­ های HEK293 بود. نتایج الایزا در جذب نوری 450 نانومتر برای  VEGF111bدر محیط کشت سلولی و عصاره لیز سلولی به­ ترتیب برابر با 2/81±19/20 pg/ml و  pg/ml7/42± 32/87 بود. و در نمونه ­های کنترل منفی بیان VEGF-111b مشاهده نشد. نتیجه گیری: یافته های این مطالعه نشان­گر قابلیت بالای انتقال و ترشح VEGF111b از دیواره سلول­ های HEK293 به محیط کشت سلولی بدون شکستگی و هضم پروتئولیتیکی است. به ­نظر می­ رسد تولید تجاری این پپتید دارویی و تخلیص از محیط کشت سلولی HEK293 با بازدهی بالا امکان­ پذیر باشد.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

بررسی میزان ترشح خارج سلولی پپتید ضد سرطان vegf۱۱۱b در سلول های انسانی hek-۲۹۳

سابقه و هدف: vegf111b یک ایزوفرم جدید از فاکتورهای رشد اندوتلیال عروقی (vegf) است که اخیرا به­ عنوان یک داروی ضد سرطان مطرح شده است. هدف مطالعه حاضر بررسی میزان ترشح این پروتئین از دیواره سلول­ های hek293 به­ منظور تولید تجاری این فاکتور نوترکیب است. مواد و روش ها: توالی vegf111b توسط نرم­افزار oligo و اطلاعات ژن بانک ncbi طراحی و داخل وکتور pbud.ce4.1کلون شد. وکتور نوترکیب pbud.vegf111b با است...

متن کامل

بررسی میزان تولید پپتید ضد سرطان VEGF-111b در سلول های انسانی ترنسفکت شده از طریق Real Time- PCR

Background and purpose: Endothelial growth factor type b with anti-angiogenic activity and inhibition of tumor growth are considered as new anticancer drugs. The aim of this research was to study the expression of vegf111b in HEK293 human cells. Materials and methods: In this experimental study, HEK293 cells were transfected by pBUD.VEGF111b vector containing the VEGF111B gene through lipofe...

متن کامل

The ethics of HEK 293.

1 Congregation for the Doctrine of the Faith, Donum vitae (February 2, 1987), Introduction, 5. 2 Ibid., I, 1. The topic of embryonic stem cells is very much in the forefront of public interest. The moral stance on obtaining stem cells from embryos is clear: The Church has always taught that all human life from the very beginning must be respected and protected. If human embryos are killed to ob...

متن کامل

بررسی میزان تولید پپتید ضد سرطان vegf-۱۱۱b در سلول های انسانی ترنسفکت شده از طریق real time- pcr

سابقه و هدف: فاکتورهای رشد اندوتلیالی تیپ b با فعالیت ضد رگ زایی و مهار رشد تومورها به عنوان داروهای جدید ضدسرطان مورد توجه هستند. در این مطالعه هدف بررسی میزان بیان vegf111b در سلول های انسانی hek293 بوده است. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی سلول های hek293 توسط وکتور pbud.vegf111b حاوی ژن vegf111b به روش لیپوفکتامین ترنسفکت شدند و mrna سلول های ترنسفکت شده و سلول های کنترل استخراج شدند و ا...

متن کامل

بررسی اثرسمیت پپتید GL-9 بر سلول های A549 و سلول های خونی انسانی و حیوانی

دانشمندان به کمک ترکیبات طبیعی همانند پپتید‌ها به دنبال راه های درمانی جدید با کمترین عوارض جانبی برای سرطان هستند . اهداف: هدف این مطالعه بررسی اثر سمیت پپتیدGL-9 بر روی رده سلولی آدنوکارسینومای اپیتلیال ریوی انسانی(A549) و همچنین گلبول‌های قرمز و سفید خونی انسان و گاو است. مواد و روش ها: پپتید 9 GL- یک پپتید 9 اسید آمینه ای با توالی GASRMWYFL است که درغلظت‌های متفاوت 12، 25 و 50 g/ml...

متن کامل

بررسی تأثیر استفاده از پپتید نشانه پروترومبین انسانی بر کارآیی ترشح فاکتور ۹ انسانی در رده سلولی hek۲۹۳t

هدف: به‏طور عمده پروتئین‏های یوکاریوتی دارای پپتید نشانه هستند که نه تنها نقش محوری در کارآیی ترشح دارند بلکه در بیان پروتئین نیز اهمیت دارند. فاکتور 9 انعقادی، گلیکوپروتئینی است که نقش محوری در مسیر انعقاد خون ایفا می‏کند. نقص یا کاهش تولید فاکتور 9 منجر به بیماری هموفیلی b می شود. در این پژوهش، با هدف افزایش و کارآیی ترشح پروتئین فاکتور 9، عملکرد پپتید نشانه پروترومبین انسانی در سامانه بیانی ...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


عنوان ژورنال

دوره 21  شماره 1

صفحات  28- 34

تاریخ انتشار 2017-04

با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.

کلمات کلیدی

کلمات کلیدی برای این مقاله ارائه نشده است

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023