همسانه سازی تمام طول ژن e۲ از ژنوتیپ ۲a استرین jfh۱ ویروس هپاتیت سی درون وکتور pet۲۸a(+) و انتقال آن به باکتری اشریشیاکلی سویه dh۵α

سارا باقری، sara bagheri biology group, payameh nour university, tehran, iran.گروه زیست شناسی دانشکده علوم پایه دانشگاه پیام نور تهران ، ایران پونه رحیمی، pooneh rahimi department of hepatitis and aids, pasteur institute of iran, tehran, iran.گروه ویروس شناسی ، بخش هپاتیت و ایدز ، انستیتو پاستور تهران ، ایران روح الاه وهاب پور، rouhallah vahabpour department of hepatitis and aids, pasteur institute of iran, tehran, iran.گروه ویروس شناسی ، بخش هپاتیت و ایدز ، انستیتو پاستور تهران ، ایران سید مهدی سادات، seyed mehdi sadat department of hepatitis and aids, pasteur institute of iran, tehran, iran.گروه ویروس شناسی ، بخش هپاتیت و ایدز ، انستیتو پاستور تهران ، ایران محمدرضا آقا صادقی، mohammad reza aghasadeghi department of hepatitis and aids, pasteur institute of iran, tehran, iran.گروه ویروس شناسی ، بخش هپاتیت و ایدز ، انستیتو پاستور تهران ، ایران فاطمه متولی، fatemeh motevalli department of hepatitis and aids, pasteur institute of iran, tehran, iran.گروه ویروس شناسی ، بخش هپاتیت و ایدز ، انستیتو پاستور تهران ، ایران

چکیده

سابقه و هدف: پوشش گلیکوپروتئینی e2 ویروس هپاتیت سی برای ورود ویروس به سلول های میزبان مورد نیاز است، همچنین به دلیل اختلاف توالی نوکلئوتیدی در ناحیه c ترمینال ژن e2 تنوع ویروسی به وجود می آید که موجب پایداری عفونت می گردد، در نتیجه این ژن هدف اصلی برای تولید آنتی بادی های خنثی کننده و ساخت واکسن می باشد. در این تحقیق نیز جهت مطالعات مقدماتی، تمام طول ژن e2 از ژنوتیپ 2a استرین jfh1 ویروس هپاتیت سی درون وکتورpet28a(+) قرار گرفته و به درون باکتری e-coli انتقال یافته است. مواد و روش ها: ژن ناحیه e2 از ژنوتیپ2a استرین jfh1 ویروس هپاتیت سی پس از طراحی پرایمرهای دارای جایگاه آنزیم های محدودگر ecor1 و nde1 توسط واکنش pcr تکثیر گردید و محصول آن پس از تائید درون وکتورpet28a(+) نوترکیب گشت، سپس به روش شوک حرارتی درون سلول باکتری e-coli سویه dh5α، ترانسفورم شده و تائید گردید. یافته ها: همسانه سازی ژن e2 به صورت تمام طول درون وکتورpet28a(+) با موفقیت انجام شد و سازه نوترکیب (pet28a – e2) به درون سلول باکتریe-coli dh5α منتقل شده و تائید گردید. نتیجه گیری: ساخت وکتور نوترکیب pet28a(+) دارای ناحیه تمام طول ژن e2 از ژنوتیپ 2a استرین jfh1 ویروس هپاتیت سی و انتقال به درون باکتری e-coli این امکان را فراهم می کند تا جهت بیان ژن مزبور در سویه های بیانی از این وکتور نوترکیب استفاده شود.