بررسی چند شکلی اگزون چهارم ژن کاپاکازئین در گوسفند نژاد ماکویی با استفاده از روش pcr-sscp
چکیده
تحقیق حاضر به منظور شناسایی چندشکلی موجود در ناحیه اگزون چهارم ژن کاپاکازئین گوسفند نژاد ماکویی با استفاده از روش چندشکلی فضایی رشته های منفرد مبتنی بر واکنش زنجیره ای پلی مراز انجام شد. برای این منظور از صد رأس گوسفند مرکز اصلاح نژاد گوسفند ماکویی، بطور تصادفی خونگیری انجام شد. استخراج dna با استفاده از کیت آماده فرمنتاز انجام گرفت. یک جفت آغازگر اختصاصی جهت تکثیر قطعه 459 جفت بازی از ناحیه اگزون چهارم این ژن به کمک واکنش زنجیره ای پلی مراز (pcr) بکار برده شد. نمونه های dna استخراجی و نمونه های حاصل از واکنش زنجیره ای پلی مراز به ترتیب با استفاده از ژل های آگارز یک درصد و آگارز دو درصد تعیین کیفیت شدند. در نهایت نمونه های تکثیر شده با استفاده از روش چندشکلی فضایی رشته های منفرد (sscp) تعیین ژنوتیپ شدند که در تمامی نمونه های بررسی شده تنها یک شکل مشاهده شد. با توجه به یکسان بودن ژنوتیپ نمونه-های بررسی شده در این تحقیق هیچ جهشی مورد تأیید قرار نگرفت. عدم مشاهده چندشکلی احتمالاً می تواند به دلیل عدم آمیزش با سایر نژاد ها، بسته بودن محیط پرورش و کوچک بودن تعداد نمونه های بررسی شده باشد.