مقاله

بیان کاست ژنی blf۱-stxb در باکتری e. coli و بررسی تیترآنتی بادی در موش

چکیده

زمینه و هدف: یکی از راه­ های تقویت اثر واکسن­ ها استفاده از ادجوانت­ ها می ­باشد. stxb شیگلا دارای نقش ادجوانتی و حاملی بوده و می ­توان با ممزوج کردن آنتی ­ژن ­های کاندیدای واکسن با این ادجوانت به تولید واکسن مناسب پرداخت. blf1نقش مهمی در بیماری­ زایی و ایجاد عفونت توسط بورخولدریا سودومالئی دارد. هدف این مطالعه، بیان ژن blf1-stxb در باکتری e. coli و بررسی تیتر آنتی بادی آن در موش می ­باشد. روش کار: ژن صناعی در پلاسمید puc57 از شرکت ندای فن خریداری شد. پلاسمید puc57 حاوی ژن blf1 با جایگاه­ های آنزیمی bamhi وsali در وکتور بیانی pet28a(+)-stxb زیرهمسانه­ سازی گردید و به باکتری e. coli سویه bl21(de3) تراریخت (ترانسفورم) شد. بیان کاست ژنی blf1-stxb تحت القایiptg انجام گردید. بعد از تخلیص پروتئین نوترکیب با ستون کروماتوگرافی، چهار نوبت متوالی به موش سوری تزریق شد. یافته ها: در این مطالعه، ژن blf1-stxb کلون شده در وکتور بیانی pet28a(+) به وسیله ­ی pcr و آنالیز آنزیمی تأیید گردید. همچنین پروتئین نوترکیب تولید شده به وسیله sds-page و لکه ­گذاری وسترن تایید شد. سپس آنتی ­بادی تولید شده از سرم موش جداسازی و توسط تست الایزا تایید گردید. نتیجه ­گیری: با توجه به اینکه پروتئین blf1 توانایی توقف پروتئین­ سازی و stxb دارای نقش ادجوانتی است. این پروتئین نوترکیب می­ تواند به عنوان کاندیدای واکسن علیه بورخولدریا سودومالئی و شیگلا دیسانتری مورد استفاده واقع شود.

اسناد مشابه