تأثیر سیستم هم کشتی سلول های لوله فالوپ موش بر تکثیر سلولهای بنیادی آندومتر انسانی
چکیده
هدف: بررسی تأثیر سیستم هم کشتی سلول های لوله فالوپ موش بر تکثیر سلولهای بنیادی استرومای آندومتر انسانی مواد و روشها: سلولهای آندومتر از نمونه های هیسترکتومی استخراج شد. سپس سلول ها با استفاده از روش هضم آنزیمی و کلاژناز تیپ 3 جداسازی شدند و پس از آن سلول ها به ترتیب از فیلترهایی به ابعاد 150 و 45 میکرومتر عبور داده شدند و در محیط کشت dmem+f12 کشت شدند. در پایان پاساژ چهارم برای تأیید ماهیت مزانشیمی سلول ها، از نشانگر cd90 استفاده شد و سلول های cd90 مثبت با استفاده از روش فلوسایتومتری بررسی شدند. سپس سلول های حاصل از کشت مرحله چهارم در دو گروه استفاده شد. در یک گروه، پس از کشت سلول های لوله فالوپ موش و تهیه تک لایه از آن ها، سلول ها با میتومایسین c غیر فعال شد و به عنوان لایه پشتیبان استفاده شد و در گروه دیگر به تنهایی کشت شد. نرخ تکثیر در هر دو گروه (سلول های بنیادی آندومتر بدون هم کشتی با لوله فالوپ و با هم کشتی) با استفاده از آزمون mtt بررسی و سپس مقایسه شد. نتایج: سلولهای آندومتر انسانی 24 ساعت پس از کشت به کف فلاسک چسبیدند و با گذشت 72 ساعت این سلولها دوکی شکل شدند و از نظر مورفولوژی شبیه به سلولهای فیبروبلاست شدند. میزان سلولهای cd90 مثبت در انتهای پاساژ چهارم 08 /0±26/94 درصد بود. نرخ تکثیر در سلولهای بنیادی استرومای آندومتر تحت هم‌کشتی و سلولهای بنیادی بدون هم کشتی با لوله فالوپ به ترتیب 02/0±1/1 و 17/0±17/1 بود و بین این دو گروه تفاوت معنی دار دیده نشد. نتیجه گیری: هم کشتی با سلول های لوله فالوپ موش تأثیری بر افزایش تکثیر سلول های بنیادی استرومای آندومتر ندارد.