جداسازی و شناسایی باکتریهای مولد بیوپلیمر پلیهیدروکسیآلکانوآت از خاکهای آلوده به نفت منطقه مسجد سلیمان و بهینهسازی شرایط تولید
چکیده
مقدمه: پلی هیدروکسیآلکانوآت (pha) از جمله پلیمرهای زیست تخریب پذیر است که توسط باکتریها تولید میشود و کاربرد آن بهجای پلاستیکهای پتروشیمیایی میتواند موجب کاهش آلودگی محیط زیست شود. هدف از پژوهش حاضر، جداسازی و شناسایی باکتریهای مولد pha از ناحیه نفتی مسجدسلیمان، تعیین درصد pha تولیدی توسط این باکتریها، تعیین شرایط بهینه دما، اسیدیته، غلظت و نوع منابع کربن و نیتروژن بر میزان سنتز pha و امکان استفاده از پسماندهای نفتی به عنوان بستر ارزان قیمت کربن برای سنتز pha توسط باکتریهای جداشده است. مواد و روشها: در ابتدا 9 نمونه خاک از چهار ناحیه آلوده به نفت مسجدسلیمان برداشت شد و غربالگری اولیه با استفاده از محیط msm در دمای 28 درجه سانتیگراد انجام گرفت. جدایهها از نظر تولید pha با استفاده از رنگ آمیزی سودان سیاه تایید و با استفاده از آزمونهای فنوتیپی و تعیین توالی 16s rrna تعیین هویت شدند. بهینهسازی دما، اسیدیته، منابع کربن و نیتروژن برای رشد باکتریها نیز انجام شد. نتایج: در این پژوهش، 11 جدایه مولد pha شناسایی شد که از بین آنها جدایه mis-1 با 522/58 درصد وزن خشک سلولی بیشترین میزان pha را تولید میکرد. این جدایه بر اساس ویژگیهای فنوتیپی و بررسی توالی 16s rrna با 95 درصد شباهت متعلق به گونه pseudomonas aeruginosa تشخیص داده شد. بهعلاوه نتایج آزمونهای بهینهسازی نشان داد که این جدایه در دمای 37 درجه سانتیگراد، اسیدیته 7، گلوکز به عنوان منبع کربن، سولفات آمونیوم به عنوان منبع نیتروژن و در نهایت، غلظت 10 گرم بر لیتر منبع کربن و غلظت 5/0 گرم بر لیتر منبع نیتروژن بالاترین میزان pha را سنتز میکند. بحث و نتیجهگیری: نتایج این پژوهش نشان میدهد که خاک های آلوده به نفت منطقه مسجدسلیمان به علت آلودگی طولانی مدت و میزان کربن بالا، زیستگاه مناسبی برای غربالگری باکتریهای مفید از جمله مولد pha هستند.