مقاله

تشخیص دو گونه بورلیا میکروتی و بورلیا پرسیکا عوامل تب راجعه با روش pcr-rflp و آغازگرهای اختصاصی

نیره چوبدار، گروه حشره شناسی پزشکی و مبارزه با ناقلین، دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتی و درمانی تهران، تهران، ایران جواد رفیع نژاد، گروه حشره شناسی پزشکی و مبارزه با ناقلین، دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتی و درمانی تهران، تهران، ایران نورایر پیازک، بخش انگل شناسی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران زکیه تلمادره ای، گروه حشره شناسی پزشکی و مبارزه با ناقلین، دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتی و درمانی تهران، تهران، ایران فاطمه محترمی، گروه حشره شناسی پزشکی و مبارزه با ناقلین، دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتی و درمانی تهران، تهران، ایران محمدعلی ali عشاقی، گروه حشره شناسی پزشکی و مبارزه با ناقلین، دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتی و درمانی تهران، تهران، ایران

چکیده

هدف: در این مطالعه کارآیی روش مولکولی pcr-rflp و pcr اختصاص به گونه به عنوان روش های نوین و سریع برای تعیین آلودگی نمونه های خون آلوده به بورلیا پرسیکا و بورلیا میکروتی عوامل تب راجعه بررسی شد. مواد و روش ها: dna بورلیا از خون حاوی بورلیا پرسیکا و بورلیا میکروتی با پارازیتمی بالا استخراج شد و به کمک آغازگرهای اختصاصی مناطق حفاظت شده دو ژن مختلف glpq و 16s rdna تکثیر و تعیین توالی شد؛ سپس برای افتراق بین دو گونه نقشه فیزیکی و محل برش آنزیمی روی مولکول dna هر گونه تعیین و نشانگرهای مولکولی مورد نظر شناسایی شد. سپس کارایی آنزیم های برش دهنده انتخابی در واکنش های pcr-rflp برای تفکیک و شناسایی دو گونه از همدیگر بررسی شدند. همچنین با توجه به اختلافات موجود در توالی ژن glpq آغازگرهای اختصاص به گونه برای تشخیص دو گونه طراحی و آزمایش شدند. نتایج: نتایج مطالعه نشان داد که روش pcr می تواند آلودگی را به خوبی در نمونه های خون آلوده مشخص نماید. به دنبال pcr، آنزیم های drai، hinfi، ecori، sspi، taqi برای ژن glpq و آنزیم taqi برای ژن 16s rdna قادرند دو گونه بورلیا پرسیکا و بورلیا میکروتی را از هم تفکیک نمایند. همچنین با آغازگرهای اختصاصی ژن glpq، جفت آغازگر 795r و bmglpf محصول pcr اختصاصی برای بورلیا میکروتی به طول 451 جفت باز و جفت آغازگر 128f و bpglpr محصول اختصاصی برای بورلیا پرسیکا به طول 252 جفت باز تولید می کنند که تشخیص دو گونه را امکان پذیر می سازد. نتیجه گیری: در این مطالعه روش pcr-rflp و pcr با آغازگرهای اختصاصی برای نخستین بار برای تمایز دو گونه بورلیا میکروتی و بورلیا پرسیکا استفاده شد. آغازگرهای اختصاصی (bmglpf/r) این مطالعه و pcr-rflp بسیار خوب عمل نموده و با توجه به سرعت و دقت بالای آن ها می توانند جایگزین روش کلاسیک و وقت گیر تعیین آلودگی و تشخیص این دو گونه شوند و برای استفاده در آزمایشگاه های تشخیص طبی ایران و سایر مناطق آلوده در خاورمیانه توصیه شود.

اسناد مشابه

  • مقایسه روش pcr-rflp با روش های بیوشیمیایی در تشخیص عوامل سل ریوی انسانی

    مقاله۲۰۱۰فصلنامه علمی پژوهشی دنیای میکروب هابهنام رفیعی، علی اصغر فرازی، داود صادقی، سپیده غنی

    سابقه و هدف: بیماری سل هنوز هم یکی از مهم ترین عوامل مرگ و میر در بسیاری از کشورها است. کمپلکس مایکوباکتریوم توبرکیلوسیس از مجموعه ای از باکتری ها با شباهت ژنتیکی زیاد تشکیل شده است که با توجه به طولانی بودن زمان کشت تعیین هویت آن ها بسیار مشکل است. هدف از این پژوهش، ارزیابی روش

  • مقایسه روش PCR-RFLP با روش‌های بیوشیمیایی در تشخیص عوامل سل ریوی انسانی

    مقاله۲۰۱۰دنیای میکروب هابهنام رفیعی، داود صادقی، راضیه نظری، روح اله کشاورز

    سابقه و هدف : بیماری سل هنوز هم یکی از مهم‌ترین عوامل مرگ و میر در بسیاری از کشورها است. کمپلکس مایکوباکتریوم توبرکیلوسیس از مجموعه‌ای از باکتری‌ها با شباهت ژنتیکی زیاد تشکیل شده است که با توجه به طولانی بودن زمان کشت تعیین هویت آن‌ها بسیار مشکل است. هدف از این پژوهش، ارزیابی روش

  • مقایسه روش PCR-RFLP با روش‌های بیوشیمیایی در تشخیص عوامل سل ریوی انسانی

    مقاله۲۰۱۰دنیای میکروب هابهنام رفیعی، داود صادقی، راضیه نظری، روح اله کشاورز

    سابقه و هدف : بیماری سل هنوز هم یکی از مهم‌ترین عوامل مرگ و میر در بسیاری از کشورها است. کمپلکس مایکوباکتریوم توبرکیلوسیس از مجموعه‌ای از باکتری‌ها با شباهت ژنتیکی زیاد تشکیل شده است که با توجه به طولانی بودن زمان کشت تعیین هویت آن‌ها بسیار مشکل است. هدف از این پژوهش، ارزیابی روش

  • تشخیص گونه‏های کریپتوسپوریدیوم جدا شده از انسان با روش pcr-rflp در تهران

    مقالهپژوهش های آسیب شناسی زیستیabdolhossein dalimi، department of parasitology, faculty of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran farid tahvildar-biderouni، department of parasitology and mycology and research center of cellular and molecular biology, shahid beheshti university of medical sciences, tehran, iran fatemeh ghaffarifar، department of parasitology, faculty of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran bahram kazemi

    هدف: کریپتوسپوریدیوزیس از عفونت‏های انگلی شایع در ایران و به‏عنوان عامل ایجاد اسهال در انسان و دام به‏شمار می‏آید. از این رو شناسایی گونه‏های شایع آن در جمعیت‏های انسانی ضروری است. هدف از انجام مطالعه حاضر تعیین گونه‏های کریپتوسپوریدیوم جدا شده از بیماران مراجعه کننده به سه بیمار

  • تشخیص و تفریق گونه ای تیلریا و بابزیا در گوسفندان منطقه اهواز با یک روش جدید pcr-rflp

    مقالهفصلنامه دامپزشکی و آزمایشگاهسیده میثاق جلالی1، زهره خاکی2، بهرام کاظمی3، صادق رهبری4، پرویز شایان4، مژگان بنده پور3، سیده پرستو یاسینی2

    مقدمه و هدف: تیلریوز گوسفند یک بیماری هموپروتوزوآیی مهم ناشی از گونه های مختلف تیلریا می باشد. با این وجود جنبه های اپیدمیولوژیک تیلریوز گوسفند در ایران به خوبی شناخته شده نیست. مطالعه حاضر به منظور بررسی وضعیت دقیق آلودگی هموپروتوزوآیی در گوسفندان اهواز و نواحی اطراف آن انجام گر

  • تشخیص و تفریق گونه ای تیلریا و بابزیا در گوسفندان منطقه اهواز با یک روش جدید PCR-RFLP

    مقاله۲۰۱۲فصلنامه دامپزشکی و آزمایشگاهسیده میثاق جلالی1، زهره خاکی2، بهرام کاظمی3، صادق رهبری4، پرویز شایان4، مژگان بنده پور3، سیده پرستو یاسینی2

    مقدمه و هدف: تیلریوز گوسفند یک بیماری هموپروتوزوآیی مهم ناشی از گونه های مختلف تیلریا می باشد. با این وجود جنبه های اپیدمیولوژیک تیلریوز گوسفند در ایران به خوبی شناخته شده نیست. مطالعه حاضر به منظور بررسی وضعیت دقیق آلودگی هموپروتوزوآیی در گوسفندان اهواز و نواحی اطراف آن انجام گر