مقاله

بررسی خصوصیات آنتی ژن های سطحی اسپرم انسان توسط آنتی بادی منوکلونال hs۵۶

چکیده

مقدمه: با وجود پیشرفت و گسترش تحقیقات در زمینه تولید مثل و ناباروری و به ویژه فرآیند لقاح، در حال حاضر تعداد اندکی از آنتی ژن های مؤثر در فرآیند لقاح در سطح اسپرم و تخمک، شناسائی شده است. مطالعه این مولکول ها و بررسی خصوصیات بیوشیمیایی، بیوفیزیکی و فیزیولوژیکی آنها، درک هرچه بهتر فرآیند لقاح را تسهیل می کند. گذشته از آن، علت اصلی درصد بالایی از ناباروری های با علت نامشخص که ناشی از وجود نقایص مولکولی آنتی ژن های دخیل در عمل لقاح می باشند، لذا هدف این مطالعه تعیین خصوصیات آنتی ژن مورد شناسائی توسط آنتی بادی منوکلونال hs56 می باشد. مواد و روشها: سلول های هیبریدومای مولد آنتی بادی منوکلونال hs56 علیه آنتی ژن سطحی اسپرم انسان به صفاق موش های نر بالغ 8-6 هفته تزریق شدند تا مقادیر زیاد آنتی بادی از مایع آسیت، به دست آید. آنتی بادی مذکور توسط ستون افینیتی کروماتوگرافی پروتئین g، تخلیص و ایزوتیپ این آنتی بادی توسط آزمون الایزا تعیین گردید. آنتی ژن های سطحی اسپرم انسان توسط لیتیوم دی یدوسالیسیلات (lis) استخراج و الکتروفورز sds-page روی این آنتی ژن ها انجام گرفت. به منظور تعیین وزن مولکولی و برخی خصوصیات بیوشیمیایی آنتی ژن مورد نظر، وسترن بلاتینگ انجام شد و محل قرارگیری این آنتی ژن در سطح اسپرم انسان به کمک آزمون ایمنوفلورسانس غیرمستقیم بررسی شده و در نهایت تأثیر یا عدم تأثیر این آنتی ژن در واکنش آکروزومی مورد بررسی قرار گرفت. تحلیل داده ها بر اساس مقایسه داده های زوج شده و آزمون wilcoxon signed ranks test انجام و سطح معنی داری، 05/0 در نظر گرفته شد. نتایج: با تکنیک sds-page الگوی الکتروفورتیک آنتی ژن های استخراج شده با نمک lis، مشاهده شد و با آزمون الایزا مشخص شد که آنتی ژن مورد شناسایی توسط آنتی بادی منوکلونال hs56، در مجموعه آنتی ژنی استخراج شده از سطح اسپرم با استفاده از lis، وجود دارد. ایزوتیپ آنتی بادی منوکلونال hs56 از نوعigg1 تعیین شد. پس از انجام وسترن بلاتینگ، مشخص شد که وزن مولکولی آنتی ژن مورد نظر حدود kda2±56 است و در ساختار مولکول پروتئین مورد نظر، باند دی سولفیدی وجود دارد. آزمون ایمنوفلورسانس غیرمستقیم نشان داد که محل قرارگیری این آنتی ژن در ناحیه آکروزومی و گردن اسپرم می باشد. با مجاور نمودن آنتی بادی منوکلونال با اسپرم و القاء واکنش آکروزومی، مشخص شد که بلوکه کردن این اپی توپ با آنتی بادی منوکلونال hs56، تأثیری در واکنش آکروزومی ندارد (11/0 =p). نتیجه گیری: براساس بررسی های انجام شده، هرچند آنتی ژن hs56 در ناحیه آکروزومی و سراسپرم قرار دارد ولی نقش اساسی در فرآیند واکنش آکروزومی دارا نمی باشد. بررسی بیشتر این آنتی ژن بوسیله تخلیص و بررسی ساختار مولکولی آن و نیز نقش آن در اتصال اسپرم و تخمک، ارزش این آنتی بادی را مشخص خواهد نمود.

اسناد مشابه

  • طراحی یک روش الایزا با استفاده از آنتی ژن های سطحی اسپرم جهت اندازه گیری آنتی بادی ضد اسپرم و مقایسه آن با تست spermmar

    مقالهjournal of reproduction and infertility

    مقدمه: تاثیر آنتی بادی ضداسپرم با میزان شیوع 26-6% در ایجاد ناباروری به خوبی شناخته شده است. لذا اندازه گیری آن در سرم و یا مایعات بیولوژیک مردان و زنان از اهمیت کلینیکی برخوردار است. امروزه یکی از مهمترین موضوعات مورد بحث در ناباروری ایمونولوژیک، طراحی روشی استاندارد جهت اندازه

  • طراحی کیت سنجش آنتی ژن p24 ویروس hiv با استفاده از آنتی بادی منوکلونال انسانی

    مقاله۲۰۰۹فصلنامه علمی پژوهشی دنیای میکروب هامعصومه هاشمی، سید مهدی بوترابی، رضا حاجی حسینی، علی میرجلیلی

    سابقه و هدف: چندین روز پس از عفونت با ویروس hiv و قبل از تغییرات سرمی در مرحله وجود rna ویروس در خون، آنتی ژن p24 در خون قابل سنجش است. مطالعات نشان می دهد در مراحل اولیه عفونت آنتی ژن p24 بسیار زودتر از آنتی بادی بر علیه ویروس ظاهر می شود. بنابراین ارزیابی آنتی ژن p24 ویروس می ت

  • طراحی کیت سنجش آنتی ژن P24 ویروس HIV با استفاده از آنتی بادی منوکلونال انسانی

    مقاله۲۰۰۹دنیای میکروب هارضا حاجی حسینی، سید مهدی بوترابی، علی میرجلیلی، معصومه هاشمی

    سابقه و هدف: چندین روز پس از عفونت با ویروس HIV و قبل از تغییرات سرمی در مرحله وجود RNA ویروس در خون، آنتی ژن p24 در خون قابل سنجش است. مطالعات نشان می دهد در مراحل اولیه عفونت آنتی ژن p24 بسیار زودتر از آنتی بادی بر علیه ویروس ظاهر می شود. بنابراین ارزیابی آنتی ژن p24 ویروس می ت

  • تهیه و تخلیص آنتی بادی منوکلونال علیه آنتی ژن لیپوآرابینومان مانوزیله مایکوباکتریوم بویس

    مقالهدانشور پزشکیرسول موخواه، rasool moukhah bcg department, integrated manufacturing research, pasteur institute of iranمجتمع تولیدی- تحقیقاتی انستیتوپاستور ایران محمد تقی خانی، mohammad taghikhani - clinical biochemistry department, medical faculty, tarbiat modares universityگروه بیوشیمی بالینی، دانشکده علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرس علیرضا خبیری، alireza khabiry parasitology department, institute pasteur of iranگروه انگل شناسی، انستیتوپاستور ایران سید عطاالله سادات شاندیز

    مقدمه و هدف: لیپوآرابینومان مانوزیله (manlam)­ از آنتی­ژن های گلیکولیپیدی است که درصد قابل توجهی از دیواره سلولی باکتری مایکوباکتریوم بویس ب ث ژ را تشکیل می دهد. نظر به اینکه تولید آنتی بادی منوکلونال آن، به­ویژه در طراحی کیت تشخیص سریع بیماری سل کاربردهایی فراوان دارد، لذا هدف ا

  • طراحی کیت سنجش آنتی ژن P24 ویروس HIV با استفاده از آنتی بادی منوکلونال انسانی

    مقاله۲۰۰۹دنیای میکروب هارضا حاجی حسینی، سید مهدی بوترابی، علی میرجلیلی، معصومه هاشمی

    سابقه و هدف: چندین روز پس از عفونت با ویروس HIV و قبل از تغییرات سرمی در مرحله وجود RNA ویروس در خون، آنتی ژن p24 در خون قابل سنجش است. مطالعات نشان می دهد در مراحل اولیه عفونت آنتی ژن p24 بسیار زودتر از آنتی بادی بر علیه ویروس ظاهر می شود. بنابراین ارزیابی آنتی ژن p24 ویروس می ت

  • طراحی کیت سنجش آنتی ژن p۲۴ ویروس hiv با استفاده از آنتی بادی منوکلونال انسانی

    مقالهدنیای میکروب هامعصومه هاشمی، گروه بیوشیمی، دانشگاه پیام نور تهران سید مهدی بوترابی، شرکت پیشتاز طب رضا حاجی حسینی، گروه بیوشیمی، دانشگاه پیام نور تهران علی میرجلیلی

    سابقه و هدف: چندین روز پس از عفونت با ویروس hiv و قبل از تغییرات سرمی در مرحله وجود rna ویروس در خون، آنتی ژن p24 در خون قابل سنجش است. مطالعات نشان می دهد در مراحل اولیه عفونت آنتی ژن p24 بسیار زودتر از آنتی بادی بر علیه ویروس ظاهر می شود. بنابراین ارزیابی آنتی ژن p24 ویروس می ت