مقاله

تولید و تخلیص نواحی آنزیمی هیالورونیداز استرپتوکوک در باکتری اشریشیا کلی

نفیسه السادات میرجمالی مهرآبادی، nafise o sadat mirjamali mehrabadi department of microbiology, science and research branch, islamic azad university, arak branch, arak, iranکارشناس ارشد میکروبیولوژی، گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات اراک، اراک، ایران صفیه صوفیان، safieh soufian department of biology, payame noor university, arak, iranاستادیار، گروه زیست شناسی، دانشگاه پیام نور اراک، اراک، ایرانسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی علوم و تحقیقات (islamic azad university science and research branch) حمید ابطحی، hamid abtahi department of microbiology, school of medicine, arak university of medical sciences, arak, iranایران، اراک، میدان بسیج، پردیس دانشگاهی پیامبر اعظم، دانشکده پزشکی، گروه میکروب شناسی پزشکیسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه پیام نور اراک (payame noor university of arak)

دانلود متن کاملرایگان، با حساب کاربری؛ ثبت نام با گوگل چند ثانیه است

چکیده

زمینه و هدف: استرپتوکوکوس پیوژنز آنزیم هیالورونیداز خارج سلولی تولید می کند که با انتشار ارگانیسم در طول عفونت ارتباط مستقیم دارد. آنزیم هیالورونیداز قادر به تجزیه هیالورونیک اسید یا سیمان بین بافتی می باشد. از این آنزیم میتوان در درمان سرطان ها استفاده نمود. هدف از تحقیق حاضر کلون کردن و بیان توالی نوکلئوتیدی که در فعالیت آنزیمی هیالورونیداز نقش دارد، می باشد. مواد و روش ها: ابتدا توالی نوکلئوتیدی از ژن هیالورونیداز که در فعالیت آنزیمی دخیل است، شناسایی گردید. سپس ناحیه مورد نظر توسط pcr تکثیر یافت. قطعه تکثیر یافته در وکتور pet32a الحاق شد. پلاسمید نوترکیب به سلول e.coli bl21-de3-plyss ترانسفورم گردید. سپس بیان ژن به وسیله iptg القا گردید. پروتئین تولید شده با روش کروماتوگرافی تمایلی و با استفاده از کیت ni-nta تخلیص گردید. برای تایید پروتئین تولید شده از تست وسترن بلات استفاده گردید. یافته ها: ترادف نوکلئوتیدی ژن تکثیر شده با ژن هیالورونیداز استرپتوکوکوس پیوژن یکسان بود. غلظت پروتئین تولیدشده و خالص شده با کیت ni- nta برابر 500 میلی گرم در میلی لیتر بود. سرم بیماران مبتلا به عفونت های استرپتوکوکی در روش وسترن بلات با پروتئین تولید شده واکنش داد. نتیجه گیری: به طور کلی تولید نواحی آنزیمی هیالورونیداز استرپتوکوک پیوژنز در باکتری اشریشیاکلی امکان پذیر می باشد. پروتئین تولید شده خاصیت آنتی ژنیک خود را به خوبی حفظ می کند. با توجه به نیاز داخلی کشور و هم چنین بازدهی کم تولید و بیماری زا بودن استرپتوکوک ها تولید این محصول به صورت نوترکیب امکان پذیر است.

اسناد مشابه

  • تولید و تخلیص توکسین حساس به حرارت باکتری اشریشیا کلی انتروتوکسیژنیک و شناسایی آن با روش الایزای مبتنی بر گیرنده گانگلیوزیدی gm۱

    مقالهمجله دانشگاه علوم پزشکی اراکراضیه خالصی، raziyeh khalesi biology department, faculty of science, immam hossein university, tehran- iran.تهران- اتوبان شهید بابایی- دانشگاه امام حسین (ع)- جعفر سلیمیان، jafar salimian biology department, faculty of science, immam hossein university, tehran- iran.گروه زیست شناسی، علوم پایه، دانشگاه امام حسین ع، تهران- ایران.سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (imam hosseyn university) شهرام نظریان، shahram nazarian biology department, faculty of science, immam hossein university, tehran- iran.گروه زیست شناسی، علوم پایه، دانشگاه امام حسین ع، تهران- ایران.سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (imam hosseyn university) زهرا احصائی

    زمینه و هدف: باکتری اشریشیا کلی انتروتوکسیژنیک مهم‎ترین عامل باکتریایی ایجاد کننده اسهال است. عوامل حدت زای اختصاصی مانند انتروتوکسین‎ها و عوامل کلونیزاسیون، این باکتری را از سایر گروه‎های ای. کلی متمایز می‎کند. در این مطالعه توکسین حساس به حرارت تخلیص شده و از آن می‎توان جهت سنج

  • تولید پروتئین دوگانه tir-اینتیمین از باکتری اشریشیا کلی o۱۵۷:h۷ در گیاه توتون (nicotiana tobbacum) و بررسی ایمنی‏زایی آن در موش آزمایشگاهی

    مقالهپژوهش های آسیب شناسی زیستیfarideh saberi، m.sc., department of plant biotechnology, national institute of genetic engineering and biotechnology (nigeb), tehran, iran ali hatef salmanian، associated professor, department of plant biotechnology, national institute of genetic engineering and biotechnology (nigeb), tehran, iran jafar amani، assistant professor, applied microbiology research center, baqiyatallah medical science university, tehran, iran mahyat jafari

    هدف: اشریشیا کلی سویه o157:h7 یکی از مهم‏ترین بیماری‏زاهای تولید کننده بیماری کولیت خونریزی دهنده در انسان است. دام‏های اهلی اصلی‏ترین مخزن این باکتری هستند. پروتئین‏های اینتیمین، tir و espa از مهم‏ترین عوامل بیماری‏زایی این باکتری محسوب می‏شوند. پروتئین espa در ساخت کانال ارتباط

  • تولید پروتئین دوگانه espa- tir از باکتری اشریشیا کلی o۱۵۷:h۷ در گیاه توتون (nicotiana tobbacum)

    مقالهزیست فناوری گیاهان زراعیحسین ملکی، کارشناسی ارشد، بیوتکنولوژی گیاهی، دانشکده کشاورزی دانشگاه شاهد، تهران، ایران، علی هاتف سلمانیان، دانشیار، گروه بیوتکنولوژی گیاهی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست‏فناوری، تهران، ایران جعفر امانی، استادیار، مرکز تحقیقات میکروبیولوژی کاربردی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله(عج)، تهران، ایران علاء الدین کردنائیج

    باکتری e.coli o157:h7 یک پاتوژن مهم انسان و حیوان است که در انسان موجب بروز اسهال خونریزی دهنده و سندرم اورمی همولتیک (hus) می­شود. اتصال به سلول­های میزبان اولین گام در تثبیت این باکتری است که به واسطه سیستم ترشحی نوع iii (t3ss) و از طریق میانکش بین پروتئین­های ترشحی صورت می­گیر

  • تولید پروتئین دوگانه EspA- Tir از باکتری اشریشیا کلی O157:H7 در گیاه توتون (Nicotiana tobbacum)

    مقاله۲۰۱۴شیمی آلی و پلیمرجعفر امانی، حسین ملکی، علاء الدین کردنائیج، علی هاتف سلمانیان

    باکتری E.coli O157:H7 یک پاتوژن مهم انسان و حیوان است که در انسان موجب بروز اسهال خونریزی دهنده و سندرم اورمی همولتیک (HUS) می­شود. اتصال به سلول­های میزبان اولین گام در تثبیت این باکتری است که به‌واسطه سیستم ترشحی نوع III (T3SS) و از طریق میانکش بین پروتئین­های ترشحی صورت می­گیر

  • تولید پروتئین دوگانه espa- tir از باکتری اشریشیا کلی o157:h7 در گیاه توتون (nicotiana tobbacum)

    مقاله۲۰۱۴فصلنامه علمی ـ پژوهشی زیست فناوری گیاهان زراعیحسین ملکی، علی هاتف سلمانیان، جعفر امانی، علاء الدین کردنائیج

    باکتری e.coli o157:h7 یک پاتوژن مهم انسان و حیوان است که در انسان موجب بروز اسهال خونریزی دهنده و سندرم اورمی همولتیک (hus) می­شود. اتصال به سلول­های میزبان اولین گام در تثبیت این باکتری است که به واسطه سیستم ترشحی نوع iii (t3ss) و از طریق میانکش بین پروتئین­های ترشحی صورت می­گیر

  • تولید پروتئین دوگانه EspA- Tir از باکتری اشریشیا کلی O157:H7 در گیاه توتون (Nicotiana tobbacum)

    مقاله۲۰۱۴زیست فناوری گیاهان زراعیحسین ملکی، علی هاتف سلمانیان، جعفر امانی، علاء الدین کردنائیج

    باکتری E.coli O157:H7 یک پاتوژن مهم انسان و حیوان است که در انسان موجب بروز اسهال خونریزی دهنده و سندرم اورمی همولتیک (HUS) میشود. اتصال به سلولهای میزبان اولین گام در تثبیت این باکتری است که به‌واسطه سیستم ترشحی نوع III (T3SS) و از طریق میانکش بین پروتئینهای ترشحی صورت میگیرد. د