مقاله

استفاده از روش nested-pcr برای تشخیص آلودگی کشت های سلولی به ویروس pestivirus

چکیده

در این مطالعه یک روش nested-pcr برای تشخیص دو ویروس bvdv از سویه nadl بهینه سازی گردید. در آزمایش rt-pcr، قسمتی از منطقه غیر قابل ترجمه ناحیه '5 ویروس به طول 249 جفت باز تکثیر شد. محصول pcr در وکتور r/t57ptz کلون گردید و نتیجه تعیین ردیف اسیدهای نوکلوتیدی آن اختصاصی بودن آزمایش را تایید نمود. سپس پرایمرهای داخلی انتخاب و آزمایش nested-pcr انجام گردید و یک قطعه dna به طول 155 جفت باز تکثیر شد. میزان حساسیت آزمایش rt-pcr، 50tcid 104 و میزان حساسیت آزمایش nested-pcr در تشخیص ویروس bvdv در کشت سلول، 50tcid102 تعیین گردید. تعداد 7 نمونه از کشت های سلولی با سه روش pcr, elisaو nested-pcr مورد آزمایش قرار گرفتند. نتایج نشان داد که حساسیت روش های مولکولی در تشخیص ویروس در نمونه ها نسبت به روش elisa بیشتر می باشد.

اسناد مشابه