تعیین جنسیت مرغ عشق به روشpcr

چکیده پایان نامه نام خانوادگی: شوشی زاده نام: آزاده عنوان پایان نامه: تعیین جنسیت مرغ عشق با روش pcr اساتید راهنما: دکتر منصور میاحی،دکتر عباس جلودار درجه تحصیلی: دکتری حرفه ای رشته: دامپزشکی گرایش: دامپزشکی محل تحصیل (دانشگاه): شهیدچمران اهواز دانشکده: دامپزشکی تاریخ فارغ التحصیلی: / /89 تعداد صفحه:81 کلید واژه ها: تشخیص جنسیت ، pcr، dna پر، مرغ عشق بسیاری از گونه های پرندگان از نظر جنسی به صورت مونومورفیک هستند . در گونه های پرندگان مونومورفیک بخصوص در پرندگان جوان مانند بوقلمون، اردک،غاز، جغد، طوطی، درنا، مرغ عشق و سایر پرندگان تشخیص جنسیت بر اساس شکل ظاهری بسیار مشکل است و چالش جدی برای تکثیر کنندگان و جانورشناسان ایجاد نموده است. روش های تعیین جنسیت از کلواک ، لاپاروسکوپی و استروییدها غیر قابل اعتماد، زمان بر و گران می باشند ولی روش pcr یک روش مناسب و قابل اعتماد می باشد. بر این اساس در مطالعه ی حاضر جنسیت مرغ عشق براساس استخراج dna از پر آنها و به روش pcr انجام گرفت.جمعاً 30 مرغ عشق نابالغ خریداری شد. ابتدا تعیین جنسیت هر یک بر اساس مورفولوژی رنگ پوست بالای منقار مشخص گردید و در کاربرگ ثبت شد.از هر مرغ عشق 5-3 پر بزرگ از ناحیه ی دم و بال کنده شد و پرهای جمع آوری شده تا هنگام آزمایش در فریزر نگهداری شدند. پس از آسان کشی پرندگان جنسیت آن ها به روش کالبدگشایی تعیین و در کاربرگ ثبت گردید. استخراج dnaاز انتهای کالاموس پر مرغ عشق به روش استخراج فنل - کلروفرم صورت پذیرفت با استفاده از پرایمرهای اختصاصیusp1/usp3 و int-r/int-f و بر اساس دو ژن chd-z و chd-w واکنش pcr انجام شد. نتایج نشان دهنده ی تکثیر دو باند dna به اندازه ی 370bp و 250bp برای جنس ماده و فقط یک باند dna به اندازه ی 250bp برای جنس نر بود.در پایان یافته های سه روش مقایسه شدند نتایج این بررسی نشان داد که روش مورفولوژی خارجی 14 و 13 پرنده به ترتیب نر و ماده بودند و جنسیت سه پرنده غیرقابل تشخیص بود. در هر دو روش کالبد گشایی و pcr، 18 و 12 پرنده به ترتیب نر و ماده بودند.این مطالعه نشان داد روش مورفولوژی روش مناسبی برای تعیین جنسیت نمی باشد ولی دو روش pcr بر اساس استخراج dna از پر و کالبد گشایی دقت بسیار بالایی دارند و می توانند صد درصد جنسیت پرنده را مشخص نمایند.