جستجوی ژن های پلاسمیدی مقاومت به کینولون ها در بین سویه های اشریشیاکلی جدا شده از مدفوع گوساله های مبتلا به اسهال و سالم

این مطالعه با هدف جستجوی ژنهای پلاسمیدی مقاومت به کینولون ها در بین سویه های اشریشیاکلی جداشده از گوساله های مبتلا به اسهال و گوساله های سالم با روش مولتی پلکسpcr انجام شد. در این مطالعه، 100 سویه ی اشریشیاکلی شامل50 سویه جدا شده از مدفوع گوساله های مبتلا به اسهال و 50 سویه جدا شده از مدفوع گوساله های سالم، موجود در کلکسیون باکتر یایی آزمایشگاه میکروبیولوژی دانشکده دامپزشکی فردوسی مشهد، که در محیط کشت نوترینت براث شامل 15% گلیسرین و در20- درجه سانتیگراد نگه داری می شدند، انجام شد. پس از کشت مجدد باکتری ها در محیط نوترینت آگار و اطمینان از خالص بودن آنها با استفاده از آزمایشات استاندارد بیوشیمیایی، آزمایش حساسیت ضدمیکروبی با روش انتشار از دیسک و با استفاده از دیسک های آنتی بیوتیکی نالیدیکسیک اسید و سیپروفلوکساسین روی محیطکشت مولر هینتون آگار انجام شد. نتایج آزمایشات پس از 24 ساعت، بر اساس جداول موسسه ی استانداردهای آزمایشگاهی و بالینی (clsi) قرائت و ثبت شدند. در بین سویه های جدا شده از مدفوع گوساله های سالم، 25 سویه، (50 %)، به سیپروفلوکساسین و 36 سویه، (72 %)، به نالیدیکسیک اسید مقاومت نشان دادند و 37 سویه (74%) به هردو آنتی بیوتیک مقاوم بودند. در میان سویه هایی که از مدفوع گوساله های مبتلا به اسهال جدا شده بود، 18 سویه به سیپروفلوکساسین (36%) و 31 سویه به نالیدیکسیک اسید (62 %)، مقاومت نشان دادند و 24 سویه (48%) نیز به هردو آنتی بیوتیک مقاوم بودند. پس از استخراج dna از سویه های مورد مطالعه، با روش مولتی پلکسpcr جستجوی سه ژن پلاسمیدی با استفاده از سه جفت پرایمر انجام شد. نهایتا محصولات pcr با روش الکتروفورز روی ژل آگارز مورد بررسی قرارگرفتند.