نام پژوهشگر: محمد طه محمدی آزاد

نقش دمین wd-40 پروتئین apaf-1 در اتصال به سیتوکروم c
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس - دانشکده علوم پایه 1392
  محمد طه محمدی آزاد   سامان حسینخانی

آپوپتوز یا مرگ برنامه ریزی شده سلول یک نوع از مرگ سلولی می باشد که موجودات چند سلولی جهت حذف سلول های نا مناسب از آن استفاده می نمایند. نکته مهم در خلال حذف این نوع سلول ها این است که فرایند آپوپتوز به حدی کنترل شده و ایمن باشد که به ساختارهای مجاور هیچ نوع آسیبی وارد نشود. در این مطالعه با استفاده از دیدگاه protein complementation assay و تکنولوژی گزارشگر های دو بخشی لوسیفراز نقش دمین wd-40 از پروتئین apaf-1 بررسی شد. در این روش با استفاده از دو سازه که یکی حاوی قطعه آمین آنزیم لوسیفراز ( اسید آمینه های 1-416) متصل شده به سمت آمین مولکول apaf1 و دیگری حاوی قطعه کربوکسی آنزیم لوسیفراز (اسید آمینه های 395-550 ) متصل شده به سمت آمین apaf1 بود، نقش دمین wd-40 مورد بررسی قرار گرفت.برای این بررسی دمین wd-40 با یک جهش نقطه ایی و تبدیل رمز یک آمینواسید به رمز پایان از پروتئین apaf-1 حذف شد.سلول های ترانسفکت شده با این دو سازه نوترکیب تحت القاء آپوپتوز با داروی doxorubicin در غلظت 1 میکرو مولار قرار گرفتند. آنالیز های انجام شده جهت سنجش فعالیت لوسیفراز افزایش 650 برابری را 17 ساعت پس از القاء آپوپتوز نشان می داد و با وجو این افزایش فعالیت کاسپازها تقریبا بدون تغییر ماند. مقایسه نتایج حاصل از این بررسی با نتایج حاصل از کارهای گذشته نشان داد حذف دمین wd-40 سبب حساسیت بسیار بیشتر پروتئن apaf-1 به داروهای ضد سرطان و تشکیل کمپلکس آپاپتوزوم می شود، درضمن این کمپلکس توانایی فعال کردن کاسپازهای سلول را دارد.