چکیده کلستریدیوم پرفرینجنس مسئول ایجاد بیماری های زیادی در انسان و حیوانات می باشد. این باکتری دارای پنج تیپ مختلف است که هر کدام بیماری های خاصی را موجب می شوند. جهت شناسایی ژنوتیپ های مختلف این باکتری روش های متفاوتی وجود دارد که هر کدام مزایا و معایبی دارد. هدف از انجام این تحقیق استفاده از روش های پیشرفته ی مولکولی جهت شناسایی ژنوتیپ های مختلف باکتری کلستریدیوم پرفرینجنس در استان کرمان می باشد. در این مطالعه 120نمونه مدفوع از شترمرغ های 12 روستا در اطراف کرمان بطور تصادفی و در دو مرحله گرفته شد. پس از فرآوری و کشت نمونه ها، کلونی های حاصل از نظر ساختاری و رنگ آمیزی بررسی شدند و با استفاده از آزمون های بیوشیمیایی، گونه های آنها شناسایی شد. آزمایش های بیوشیمیایی انجام شده عبارت بودند از: کاتالاز، هیدرولیز ژلاتین، هیدرولیز لستین و لیپاز، تولید اندول، حرکت، واکنش شیر تورنسل دار و تخمیر قندهای ساکارز، گلوکز، لاکتوز و مالتوز. در این تحقیق کلستریدیوم های جدا شده 36.6 درصد نمونه ها را شامل می شدند که عبارت بودند از کلستریدیوم های پرفرینجنس، اسفنوئید، بوتیریکوم، هیستولیتیکوم، پوتریفیکوم ، اینوکوم، سپتیکوم، باراتی ، کارنیس . استخراج dna فقط بر روی گونه ی کلستریدیوم پرفرینجنس جدا شده انجام شد. واکنش pcr با پرایمرهای اختصاصی هر تیپ انجام گردید و سپس جهت تعیین تیپ سویه های کلستریدیوم پرفرینجنس ،از روش multiplex pcr استفاده شد. تنها تیپ جدا شده ی کلستریدیوم پرفرینجنس ، تیپ a بود که جداسازی انواع کلستریدیا از شترمرغ و تعیین تیپ کلستریدیوم پرفرینجنس با روش multiplex pcrبرای اولین بار در دنیا، توسط این مطالعه در ایران انجام گردید. همچنین در این مطالعه، تاثیر جنسیت بر تعداد کلستریدیوم پرفرینجنس جدا شده بررسی شد، بطوری که درصد جداسازی این باکتری بین نرها و ماده ها به ترتیب 2352% و29/16% بود که با احتمال 95% ?<0.05)) معنی دار است.علاوه بر این تاثیر نوع اجزای جیره بر میزان جداسازی این باکتری بررسی شد که نشان داد تغییر جیره بطور معنی داری باعث افزایش تعداد کلستریدیوم پرفرینجنس جدا شده، می گردد. کلمات کلیدی: کلستریدیوم پرفرینجنس، آزمایش های بیوشیمیایی، multiplex pcr

باکتری کلستریدیوم پرفرینجنس جزئی از فلور طبیعی روده انسان و حیوانات است، اما به دلیل تولید توکسین ها و آنزیم های مختلف، عامل بیماریزایی در انسان و گونه های مختلف حیوانات است. این باکتری براساس تولید چهار توکسین اصلی به پنج تیپ مختلف تقسیم می شود که هر کدام بیماری خاصی را ایجاد می کنند. هدف از انجام این مطالعه تعیین درصد تیپ های مختلف کلستریدیوم پرفرینجنس با استفاده از روشهای نوین مولکولی است. در این مطالعه 122 نمونه به طور تصادفی از مرغداری های اطراف کرمان گرفته شد. کلونی های حاصل از کشت نمونه ها از نظر شکل ظاهری و رنگ آمیزی گرم بررسی شدند. پس از خالص سازی با استفاده ازآزمون های بیوشیمیایی گونه های آنها شناسایی شد. تقریبا از 86/77 درصد کل نمونه ها گونه های مختلف باکتری کلستریدیوم جدا شد که عبارت بودند از: باکتری های کلستریدیوم پرفرینجنس، کلستریدیوفرم، لپتوم، باراتی، نوآی، سابترمینس،celatum و chauvoeri. همچنین 63/52 درصد از کل کلستریدیوم های جدا شده از نوع پرفرینجنس بود که نشان دهنده اهمیت بیشتر این گونه باکتری در طیور می باشد. پس از استخراج dna جهت تعیین تیپ، واکنش multiplex pcr با پرایمرهای اختصاصی هر تیپ انجام گردید. تمامی باکتری های کلستریدیوم پرفرینجنس جدا شده از نوع تیپ a بودند. در این تحقیق، پراکندگی باکتری کلستریدیوم پرفرینجنس در بخش های مختلف روده بررسی شد. نتایج حاصل نشان داد، پراکندگی این باکتری در بخش ژوژنوم- ایلئوم نسبت به سکوم بیشتر است. با توجه به نتایج حاصل از این تحقیق، کلستریدیوم پرفرینجنس شایع ترین گونه کلستریدیوم در روده طیور بود که نشان دهنده اهمیت بیشتر این باکتری در طیور می باشد.