تکثیر سلول های بنیادی خونساز cd۳۴+ بند ناف در همکشتی با سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان در حضور tepa
چکیده
چکید ه سابقه و هدف استفاده از سلول های بنیادی خونساز( hscs )، روش استانداردی جهت درمان بسیاری از بدخیمی های خونی و اختلالات غیرخونی محسوب می شود. خون بند ناف، دارای مزایای فراوانی نسبت به سایر منابع سلول های بنیادی است و یکی از محدودیت های مهم این منبع جهت پیوند, تعداد محدود سلول های بنیادی آن می باشد. از راه کارهای پیشنهادی برای غلبه بر این مشکل، تکثیر بدون تمایز این سلول ها در محیط های کشت است. در این مطالعه از tepa به عنوان شلاتور مس و سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان جهت تکثیر ucb-hscs استفاده شد. مواد و روش ها مطالعه انجام شده از نوع کاربردی بود. سلول های cd34+ خون بند ناف با استفاده از آنتی بادی های نشان دار با microbead و ستون macs جدا شدند. سپس این سلول ها در چهار شرایط کشت مختلف شامل: 1) محیط حاوی سایتوکاین 2) محیط دارای فیدر و سایتوکاین 3) محیط دارای tepa و سایتوکاین و 4) محیط دارای فیدر, سایتوکاین و tepa کشت داده شدند. به منظور ارزیابی تکثیر hscs ، از شمارش سلولی, تعیین درصد سلول های cd34+ به روش فلوسایتومتری و روش سنجش کلونی در روز 10 تکثیر استفاده شد. یافته ها بیشترین میزان چند برابر شدن تعداد سلول های cd34+ , tnc ها و cfu-c در شرایط کشت چهارم(به ترتیب 3/15 ± 11/110, 78/21 ± 5/118 و 7/44 ± 9/172 برابر) در مقایسه با سایر شرایط مشاهده شد. نتیجه گیری نتایج بررسی نشان داد که همکشتی hscs با سلول های بنیادی مزانشیمی در حضور عامل شلاته کننده مس ( (tepa ، قادر است میزان تکثیر ucb-hscs را به طور قابل توجهی افزایش دهد. بنابراین، این استراتژی می تواند برای تکثیر hscs مفید واقع شود.