جداسازی و بهینهسازی تولید آنزیم پکتیناز یک آنزیم مفید صنعتی از قارچهای آسپرژیلوس نایجر، ریزوپوس اوریزه و پنیسیلیوم کریزوژنوم
چکیده
مقدمه: آنزیم پکتیناز یکی از مهمترین آنزیمهای صنعتی جهان محسوب میشود که از طیف وسیعی از میکروارگانیسمها مانند باکتریها و قارچهای رشتهای جداسازی میشود. این آنزیم استفادههای زیادی در صنایع آبمیوهسازی، نساجی و غیره دارد. در این پژوهش، جداسازی و بهینهسازی قارچهای تولید کننده آنزیم پکتیناز از میوههای پوسیده سیب و پرتقال بررسی شد. مواد و روشها: جداسازی قارچهای تولید کننده آنزیم پکتیناز با استفاده از محیط کشت پکتیندار و با رنگ آمیزی لگول انجام شد. 3 گونه از بهترین سویهها توسط روش مولکولی توالی its1,4 شناسایی شد و بهینهسازی تولید آنزیم از این قارچ توسط طرح فاکتوریل در حضور 5 متغیر با 3 سطح در نظر گرفته شد. این 5 متغیر شامل منابع کربنی (آب پنیر، گلوکز و استویا) به همراه سولفات آمونیوم، سولفات منگنز، دما و اسیدیته) در 3 آزمایش جداگانه انجام شد. اندازهگیری غلظت آنزیم پکتیناز با روش کلوریمتریک (میلر) انجام شد. نتایج: نتایج نشان داد که شرایط بهینه تولید آنزیم توسط 3 سویه برتر به نام آسپرژیلوس نایجر، پنیسیلیوم کریزوژنوم و ریزوپوس اوریزه در دمای 32 درجه، اسیدیته 6، غلظت 3 گرم بر لیتر سولفات منگنز، 75/ 2 گرم بر لیتر از سولفات آمونیوم و غلظت 10 گرم بر لیتر منابع کربن آب پنیر، استویا و گلوکز است. بالاترین میزان تولید آنزیم در شرایط یاد شده در حضور گلوکز با میزان 328/1میلیگرم بر میلیلیتر برای آسپرژیلوس نایجر و 284/1 و 039/1 میلیگرم بر میلیلیتر در حضور آب پنیر برای ریزوپوس اوریزه و پنیسیلیوم کریزوژنوم مشاهده شد. وزن مولکولی این آنزیم مطابق روش sds-page 40 و 37 کیلودالتون بهدست آمد. بحث و نتیجهگیری: نتایج پژوهش حاضر نشان داد که 3 سویه قادر به تولید آنزیم در حضور منابع مختلف کربن و دامنه وسیعی از اسیدیته و دماست. همچنین، نتایج پژوهش نشان داد که این سویهها کاندید مناسبی برای کاربرد در صنعت میباشند.