تشخیص سریع حساسیت به اتامبوتول در سویه های مایکوباکتریوم توبرکلوزیس ایزوله شده از بیماران مسلول با روش مولکولی pcr-rflp

معصومه طاهراحمدی، masumeh taherahmadi department of microbiology, qom branch, islamic azad university,دانشگاه آزاد اسلامی واحد قم، گروه میکروبیولوژیسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی قم (islamic azad university of ghom) اعظم احمدی، azam ahmadi molecular and medicine research center, arak university of medical sciences,مرکز تحقیقات سل و عفونی کودکان، دانشگاه علوم پزشکی اراکسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی اراک (arak university of medical sciences) مانا شجاع پور، mana shojapour molecular and medicine research center, arak university of medical sciencesمرکز تحقیقات پزشکی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی اراکسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی اراک (arak university of medical sciences) راضیه نظری، raziye nazari department of microbiology, qom branch, islamic azad universityدانشگاه آزاد اسلامی واحد قم، گروه میکروبیولوژیسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی قم (islamic azad university of ghom) سیدرضا مودب، seyed reza moadab tuberculosis and lung research center, tabriz university of medical sciencesدانشگاه علوم پزشکی تبریزسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی تبریز (tabriz university of medical sciences) محمد ارجمندزادگان، mohammad arjomanzadegan arak university of medical sciences, tuberculosis and pediatric infections research center, faculty of medicine arak, arak, iran tel: +98 861 4173502مرکز تحقیقات سل و عفونی کودکان، گروه میکروب شناسی و ایمنی شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اراک، تلفن: 988614173502+سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی اراک (arak university of medical sciences)

چکیده

پیش زمینه و هدف: اتامبوتول یکی از داروهای کلیدی جهت درمان بیماری سل بوده و بروز مقاومت به آن به صورت فزاینده ای گزارش می شود. در مطالعه حاضر روش polymorphism) (restriction fragment length pcr-rflp در شناسایی سریع مقاومت سویه های مایکوباکتریوم توبرکلوزیس نسبت به اتامبوتول مورد بررسی قرار گرفته است.روش بررسی: در این مطالعه از127 سویه مایکوباکتریوم توبرکلوزیس در مرکز تحقیقات سل اراک، 60 سویه انتخاب و مورد بررسی قرار گرفتند. جداسازی dna با استفاده از روش chelex100انجام گردید. pcr با کمک پرایمرهای اختصاصی برای آمپلی فیکاسیون قطعه bp167 ژن embb اجرا گردید. محصول pcr با کمک آنزیم های haeiii و nlaii مورد rflp قرار گرفت و الگوی باندها تعیین شد. قطعه مورد نظر در تعدادی از نمونه ها تعیین ترادف (سکوئنس) شده و به عنوان استاندارد طلایی با روش ارائه شده مقایسه گردید.یافته ها: از 60 سویه مورد مطالعه، 43 سویه از نظر فنوتیپی مقاوم به اتامبوتول و 17 سویه حساس به این دارو بودند. انجام pcr، باند 167 را ارائه نمود که نشان دهنده انتخاب صحیح پرایمرها و تعیین برنامه مناسب آمپلی فیکاسیون بود. از 43 سویه مقاوم، 19 سویه با روش rflp دارای موتاسیون در کدون atg-met 306 و 24 سویه غیر موتان تشخیص داده شدند. تمامی 17 سویه حساس، غیر موتان بودند. این روش برای تعیین سویه حساس دارای حساسیت و ویژگی 100درصد می باشد. نتایج تعیین توالی، انطباق کامل با نتایج pcr-rflp را نشان داد.نتیجه گیری: نتایج مطالعه حاضر نشان می دهد که روش pcr-rflp می تواند به عنوان یک روش ساده و سریع برای تعیین حساسیت به اتامبوتول در سویه های مایکوباکتریوم توبرکلوزیس مورد استفاده قرار گیرد.