روش های متعددی برای آشکارسازی جهش های تک نوکلئوتیدی ابداع گردیده است. اندونوکلئاز cel ii یک گلیکوپروتئین خارج سلولی است که از گیاه کرفس متعلق به خانواده چتریان جداسازی شده است. این آنزیم از قابلیت تکنیکی بسیار مطلوب در برش dna هترودوپلکس برخوردار است که آن را بسیار ارزشمند می نماید. جنبه های کاربردی آنزیم cel ii در مطالعات جهش های نقطه ای، تقاضای جهانی قابل توجهی را برای آن بوجود آورده و با تو...

سابقه و هدف: انتقال dna خارجی با بازدهی بالا به داخل باکتری از مهمترین مراحل در زیست فناوری میکروبی می باشد. برای این منظور چند روش مرسوم است که در بین آن ها روش کلسیم کلراید سرد از جمله مهمترین و ارزان ترین روش ها جهت انتقال dna به درون سلول های باکتریایی گرم منفی مانند escherichia coli می باشد. به طور معمول بازدهی انتقال dna در این روش107- 105 کلونی برای یک میکروگرم از dna خارجی می باشد. با ت...

مقدمه: تعدادی از گونه های باکتریایی قادرند تا مولکول dna را از محیط اطرافشان در یافت نمایند؛ میزان این دریافت به شرایطی مانند بزرگی پلاسمید و نوع میزبان بستگی دارد. در مورد باکتری باسیلوس سوبتیلیس نیز این امکان البته با میزان انتقال بسیار پایینی وجود دارد. در حال حاضر روش مرسوم برای انتقال پلاسمید خارجی به درون باکتری باسیلوس سوبتیلیس استفاده از روش طبیعی در یک محیط کشت حداقل ( اسپیزیزن ) است. ...

زمینه و هدف: مقاومت آنتی بیوتیکی همواره به عنوان یک مشکل جدی برای سلامت انسان مطرح بوده است، و بیماران را در بیمارستان های سراسر جهان تحت تأثیر قرار می دهد، از این رو سازمان بهداشت جهانی سال 2011 را به عنوان سال مقاومت آنتی بیوتیکی نامید. کلبسیلا پنومونیه یک پاتوژن فرصت طلب گرم منفی و یکی از عوامل شایع عفونت های بیمارستانی است. این باکتری، به ویژه در نوزادان باعث پنومونی، سپتی سمی، مننژیت، اسها...

تلاش های بیشماری جهت تهیه واکسن موثر علیه بیماری سل گاوی انجام شده است که در این راستا ایمن سازی با پلاسمید نوترکیب حاوی آنتی ژن های هدف، راهکاری امید بخش به شمار می آید. این مطالعه با هدف کلونینگ، تایید بیان و ارزیابی ایمنی زایی پلاسمیدهای یوکاریوتی کد کننده ایمونوژن های هدف در مدل موش balb/c مورد بررسی قرار گرفت. آنتی ژن های 6 esat-و cfp-10 در پلاسمید بیانی یوکاریوتی pcdna3.1(+) کلون شدند. صح...

چکیده فارسی: مقدمه: ویبریو کلره عامل بیماری وبا در انسان می باشد. بیان فلاژله و تحرک آن، در کلونیزاسین و ویرولانس باکتری دخیل است. flaa یکی از پنج ژن کد کننده فلاژلین در این باکتری بوده که به عنوان فلاژلین اصلی در حرکت باکتری، سنتز و ایمنی زائی فلاژله مطرح می باشد. در این مطالعه بیان این پروتئین در باکتری اشرشیا کلی و تولید پروتئین نوترکیب مورد بررسی قرار می گیرد. هدف از این مطالعه تولید یک وا...

زمینه و اهداف: ظهور مقاومت باکتری ها نسبت به آنتی بیوتیک های بتالاکتام مربوط به پلاسمید کد کننده پنی سیلیناز است که به سرعت در بین نمونه های کلینیکی مربوط انتشار یافته است. پلاسمیدهای ESBL اجداد SHV-1, TEM-2, TEM-1 هستند که هم اکنون با جهش نقطه ای در آن باعث بروز بیش از 90 تیپ TEM و 25 تیپ SHV شده است. در همین راستا مطالعه ای جهت بررسی فراوانی انواع پلاسمیدهای ESBL در سویه های اشریشیاکلی و کلبس...

هدف از این مطالعه، کلونینگ ژن هورمون رشد ماهی هامور معمولی (epinephelus coioides) در پلاسمید ptz57r/t می باشد. بدین منظور، cdna ژن هورمون رشد تهیه و با استفاده از پرایمرهای اختصاصی تکثیر cdna صورت گرفت. پس از خالص سازی محصول pcr توسط کیت qiaquick gel extraction، ژن هورمون رشد در پلاسمید ptz57r/t قرار گرفت. محصول اتصال به سلول های مستعد e. coli سویه dh5? انتقال گردید. از کلونی های سفید که نشان د...

هدف: با تلفیق سیستم االقایی تتراسیکلین (tet-inducible system) و ناقلین لنتی ویروسی، القا بیان ژن گزارشگر enhanced green fluorescent protein (egfp) در سلول‏های پرندگان مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روش‏ها: ژن egfp تحت کنترل سیستم‏ tet-on قرار گرفت و بیان آن در سلول های کبدی جوجه رده lmh بررسی شد. ابتدا باکتری‏های مستعد با ناقل لنتی ویروسی القایی حامل egfp به‏همراه یک ناقل دوم که فعال کننده tet (t...

سابقه و هدف: بتاتالاسمی از بیماریهای ژنتیکی است که سبب کم‌خونی حاد در افراد مبتلا می‌شود. یکی از روشهای درمان بتاتالاسمی، القای ژن گاماگلوبین جنینی است. کمپلکس پروتئینی DRED از رپرسورهای گاماگلوبین است که از دو زیر واحد متصل شونده به DNA، به نام 2 TRو 4TR تشکیل شده است. یک روش جالب جهت افزایش بیان گاماگلوبین، مهار بیان 4TR توسط مولکول‌های siRNA می‌باشد. هدف از این تحقیق، راه‌اندازی سیستم RNAi ب...