ویراساینس.
پایان‌نامه

مقایسه کلونی زایی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی موش بالغ پس از هم کشتی با سلول های سرتولی و سلول های رده ی فیبروبلاست موشی (sto)

مومنه محمدی

چکیده

هرچند اسپرماتوژنزیس برای باروری امری ضروری است، اطلاعات موجود درباره ی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی اندک است. این سلول ها ازطریق خودتکثیری و تمایز اسپرماتوزوا را به وجود می آورند و در طول زندگی فرد اسپرم زایی را فراهم می کنند. سلول های سرتولی در لوله های منی ساز در ارتباط نزدیک با سلول های ژرم هستند و یک محیط مطلوب را برای اسپرم زایی به وجود می آورند. هدف از انجام این مطالعه، بررسی اثر لایه های تغذیه کننده ی sto و سرتولی بر کلونی زایی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی در طول دو هفته کشت است. ابتدا سلول های سرتولی و سلول های بنیادی اسپرماتوگونی از بیضه ی موش بالغ با استفاده از دو مرحله ی هضم آنزیمی جدا شدند. ماهیت سلول ها ی سرتولی توسط ویمنتین و سلول های اسپرماتوگونی توسط نشان گرهای oct-4، cdh1، plzf و c-kit تایید شد. سلول های بنیادی اسپرماتوگونی روی لایه های تغذیه کننده ی سرتولی و sto به مدت دوهفته کشت داده شدند. تعداد و قطر کلونی ها توسط میکروسکوپ معکوس در طول دو هفته کشت اندازه گیری شد. همچنین بیان ژن های1 integrin و 6 integrinتوسط تکنیک های rt-pcr و real time pcr و ژن oct-4 توسط real time pcr ارزیابی شد. تحلیل آماری با استفاده از تحلیل واریانس با اندازه های تکراری، تحلیل واریانس یک طرفه، آزمون تعقیبی t زوجی و آزمون تعقیبی توکی انجام شد. نتایج نشان داد که در هر یک از گروه های هم کشتی با سلول سرتولی، هم کشتی با sto و کنترل، در متغیر های تعداد و قطر کلونی ها، بین چهار نقطه ی زمانی اختلاف معنی داری وجود داشت (0/05 <p)، اما تعداد و قطر کلونی ها در گروه هم کشتی با سلول سرتولی نسبت به دو گروه دیگر افزایش بیشتری داشت (0/05 <p). همچنین نتایج نشان داد که در هر یک از روز های مورد بررسی، بین سه گروه اختلاف معنی داری وجود داشت (0/05 <p) و تعداد و قطر کلونی ها در گروه سرتولی نسبت به دو گروه دیگر بیشتر بود (0/05 <p). نتایج به دست آمده rt-pcr نشان داد که بعد از دو هفته کشت، ژن 1 integrin در هر سه گروه بیان شد ولی ژن 6 integrin بیان نشد. همچنین بر اساس نتایج real time pcr، نیز سه ژن ذکر شده بیان شدند. بحث: با توجه به اثر بهینه ای که سلول های سرتولی بر سلول های بنیادی اسپرماتوگونی در هم کشتی با این سلول ها فراهم می کنند، که این موضوع توسط سایر مطالعات نیز تایید شده است، استفاده از سلول های سرتولی برای کلونی زایی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی پیشنهاد می شود.

اساتید راهنما و مشاور

منصوره موحدین، مرتضی کروجی

اسناد مشابه

  • بررسی کلونی زایی سلول های اسپرماتوگونی منجمد- ذوب شده بره قزل پس از هم کشتی با سلول های سرتولی

    مقالهپاتوبیولوژی مقایسه ایمعین زرگرزاده، پرویز تاجیک، منصوره موحدین، قاسم اکبری، بابک قاسمی پناهی ., .

  • جداسازی، تکثیر و غنی‏سازی سلول‏های بنیادی اسپرماتوگونی موش نوزاد در روش هم‏کشتی با سلول‏های سرتولی اتولوگ

    مقالهپژوهش های آسیب شناسی زیستیsetareh javanmardi، ph.d. candidate, department of anatomy, faculty of medicine, baqiyatallah university of medical sciences, tehran, iran mohammad hossein asadi، professor, department of anatomy, faculty of medicine, baqiyatallah university of medical sciences, tehran, iran mansoureh movahedin، professor, department of anatomy, faculty of medical sciences, tarbiat modares university, tehran, iran

    هدف: ارایه یک روش ساده برای جداسازی، تکثیر و غنی‏سازی سلول‏های بنیادی اسپرماتوگونی موش نوزاد مواد و روش‏ها: سوسپانسیون سلولی حاوی سلول‏های اسپرماتوگونی و سرتولی با استفاده از هضم آنزیمی از بیضه موش نوزاد دو روزه جداسازی شد. سلول‏ها به صورت هم‏کشتی و در محیط کشت dmem/f12 حاوی 10 د

  • بررسی شرایط کشت و قدرت کلونی زایی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی انسانی در محیط کشت: یک مطالعه مروری

    مقالهمجله دانشگاه علوم پزشکی فسامریم محل دشتیان، maryam mahal dashtian زهره ماکولاتی، zohreh makoolati محمدتقی قربانیان، mohammad taghi ghorbanian مجید نقدی

    اسپرم زایی، فرآیندی بسیار پیچیده و تنظیم شده است که در طی آن، سلول های زایای بنیادی، به اسپرماتوزوآ تبدیل می شوند. این سلول های بنیادی که سلول های بنیادی اسپرماتوگونی نامیده می شوند، در قاعده ی لوله های منی ساز قرار دارند و دارای توانایی خودنوزایی و تمایز به سلول های زایای عملکرد

  • نقش سلول های سرتولی در تعیین سرنوشت سلول های بنیادی اسپرماتوگونی

    مقالهمجله دانشکده پزشکی دانشگاه علوم پزشکی تهرانمریم خانه زاد، maryam khanehzad department of anatomy, medical school, tehran university of medical sciences, tehran, iran.گروه آناتومی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران. فرید ابوالحسنی، farid abolhasani department of histology, faculty of medicine, tehran university of medical sciences, poursina ave., tehran, iran. tel: +98- 21- 64053329تهران، بین 16 آذر و قدس، خیابان پورسینا، دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی، گروه آناتومی. تلفن: 64053329-021 سید مرتضی کروجی، seyed morteza koruji department of anatomy, medical school, tehran university of medical sciences, tehran, iran.گروه آناتومی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران. ایرج راگردی کاشانی

    زمینه و هدف: اسپرم‎زایی فرآیندی پیچیده و سازمان‎یافته از تکثیر و تمایز سلول‎های بنیادی اسپرماتوگونی است. سلول‎های بنیادی اسپرماتوگونی (sscs) به عنوان سلول های بنیادی منحصر به فرد با توان خود نوزایی، تمایز و انتقال داده های ژنتیکی به نسل بعد در حفظ باروری نقش اساسی دارند. همچنین س

  • ارزیابی بیان مارکرهای پرتوانی در کلونی های سلول هایes-like حاصل از اسپرماتوگونی و سلول های بنیادی جنینی

    مقالهسلول و بافتهاتف قاسمی حمیدآبادی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، دانشکده پزشکی، گروه آناتومی و بیولوژی سلولی، ساری، ایران مریم نظم بجنوردی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، دانشکده پزشکی، گروه آناتومی و بیولوژی سلولی، ساری، ایران نورالله رضایی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، دانشکده پزشکی، گروه آناتومی و بیولوژی سلولی، ساری، ایران

    هدف:اخیرا ماهیت پرتوانی سلول‏های بنیادی اسپرماتوگونی (spermatogonial stem cells, sscs) در محیط کشت مورد توجه قرار گرفته است. هدف از تحقیق حاضر تولید سلولهای شبه بنیادی جنینی es-like cells) (embryonic stem like cells, از sscs و بررسی تغییرات مورفولوژیک و ژنتیکی در این سلول‏ها نسبت

  • تاثیر داربست سیلک و هم کشتی با سلول های سرتولی بر تکثیر سلول های بنیادی اسپرماتوگونی

    مقاله۲۰۲۱مجله دانشگاه علوم پزشکی بابلزینب نریمان پور، مریم نظم بجنوردی، هاتف قاسمی

    BACKGROUND AND OBJECTIVE: In vitro proliferation and maintenance of spermatogonial stem cells is one of the treatment options for infertile men. Creating a suitable microenvironment similar to the natural conditions of reproduction of these cells leads to the improvement of cultu