بررسی پروتئوم سرم بیماران مبتلا به psoriasis

پسوریازیس یک بیماری التهابی پوست است که با افزایش تکثیر بیش از حد کراتینوسیت ها و الگوی غیر نرمال تمایز کراتینوسیت ها و حضور سلول های t، مونوسیت ها، ماکروفاژها و نوترو فیل ها در درم و اپی درم مشخص می گردد. سرم منبعی غنی از پروتئین ها و نشان دهنده وضعیت فیزیولوژیکی وکلینیکی در افراد است و بروز یک بیماری می تواند باعث ایجاد تغییراتی شامل افزایش یا کاهش در غلظت بعضی از پروتئین ها، حذف بعضی از آنها و یا سنتز پروتئین های جدید در پلاسما باشد بنابراین بررسی مجموعه ای ازپروتئین ها که در یک زمان ویژه، تحت مجموعه ای از شرایط خاص بیان می شوند می تواند نقش مهمی را در شناسایی بیومارکرهای مربوط به بیماری ایفا کند. تکنیک الکتروفورز دو بعدی (2-de) روشی بسیار مناسب برای جداسازی و بررسی پروتئین ها در نمونه های کمپلکسی مانند پلاسما است. کاربرد این تکنیک در جستجوی بیومارکر ها در سرم، بوسیله پروتئین هایی با فراوانی بالا مانند آلبومین و ایمونوگلبولین که بیش از %60 پروتئین های سرم را تشکیل می دهند محدود می شود در این پژوهش برای حذف پروتئین ها با فراوانی بالا از دو روش تری کلرواستیک اسید و روش اختصاصی کیت استفاده شد و پس از انجام الکتروفورز یک بعدی و دو بعدی نمونه ها، لکه ها با رنگ آمیزی آبی کوماسی و نیترات نقره مشخص شدند و پس از شناسایی تفاوتهای موجود بین پروتئین های نمونه بیمار و سالم با دو روش حذف آلبومین، لکه های مورد اختلاف برای انجام طیف سنج جرمی به منظور شناسایی لکه پروتئینی به مرکز سیناژن فرستاده شدند با توجه به اینکه هر دو روش قادر به حذف درصد قابل ملاحظه ای از آلبومین شدند اما الگوی پروتئینی در دو روش حذف آلبومین، تفاوتهایی را با یکدیگر نشان داد بنابراین برای مقایسه پروتئین های نمونه‏ های بیمار و نرمال، به دلیل حذف غیر اختصاصی پروتئین های دیگر علاوه بر آلبومین نمی توان تنها از یک روش برای حذف آلبومین از نمونه ها استفاده نمود. نتایج حاصل از طیف سنج جرمی برای لکه های متفاوت در الگوهای پروتئینی سالم و بیمار (9 لکه ) وجود اختلاف در 3 پروتئین که عبارتند از آلفا یک آنتی تریپسین ( ?-1-at)، رتینول بایندینگ پروتئین (rbp) و کراتین 10 (krt10) را نشان داد. علاوه براین، نتایج حاصل از طیف سنج جرمی برای شناسایی یک لکه که تنها بر روی الگوی پروتئینی افراد بیمار با روش حذف آلبومین توسط کیت ظاهر شد کافی نبود. در الگوی پروتئینی بیماران چهار لکه با وزن ملکولی تقریبی 22 کیلو دالتون و pi تقریبی 7-6 مربوط به آلفا یک آنتی تریپسین که تنها بر روی الگوی پروتئینی افراد بیمار با روش حذف آلبومین توسط تری کلرو استیک اسید/استن ظاهر شد که تا کنون در هیچ منبعی بصورت کتبی گزارش نشده است.