تأثیر فاکتور رشد پروتئین مورفوژنتیک استخوانی-۶ (bmp-۶) بر روند تمایز سلول های بنیادی مشتق از چربی به کندروسیت در سیستم کشت pellet
چکیده
مقدمه: به دلیل فقدان عروق خونی و تعداد اندک سلول های کندروسیت، آسیب های بافت قابل ترمیم نیست. مطالعه ی حاضر جهت جداسازی سلول های بنیادی از بافت چربی زیر جلدی انسانی و القای عضروف سازی طراحی گردید. روش ها: بافت چربی زیر جلدی انسانی تحت تأثیر آنزیم کلاژناز تجزیه شد و پس از سانتریفوژ و فیلتر شدن، در مدیوم dmem-10% fbs کشت داده شد. سپس مارکرهای سطحی سلول های جداسازی شده با روش فلوسیتومتری بررسی گردید. چهارم پس از شمارش تعداد 105 × 2 سلول از سلول های پاساژ چهارم در سیستم کشت pellet تحت تأثیر مدیوم کندروژنیک حاوی bmp-6 به مدت 21 روز کشت داده شد. یافته ها: سلول های بنیادی جدا شده از بافت چربی مارکرهای cd44، cd90 را بیان نمود ولی مارکرهای رده ی سلول های خون ساز مانند cd14 و cd45 را بیان نکردند. بررسی ساختارهای حاصل از القای کندروژنیک با رنگ آمیزی h–e بافت غضروفی را مشخص نمود. رنگ آمیزی با آلسین بلو نیز وجود پروتئوگلیکان های سولفاته را در ماتریکس خارج سلولی اثبات کرد. بررسی ایمینوهیستوشیمی وجود آگریکان و کلاژن نوع ii را در ماتریکس خارج سلولی نشان داد. بررسی با روش rt-pcr نیز نتایج روش های دیگر را تأیید کرد. نتیجه گیری: سیستم pellet و فاکتور رشد bmp-6 به عنوان القا کننده ی غضروف سازی عمل می کنند و بدین ترتیب می توان از سلول های بنیادی مزانشیمی از چربی زیر جلدی بافت غضروف به دست آورد.